本研究建立了飼料中沙門菌的快速檢測PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR方法，進(jìn)行了飼料中沙門菌的分離與鑒定，開展了沙門菌飼料分離株與活禽分離株耐藥性比對及飼料分離株致病性風(fēng)險(xiǎn)評估。我國飼料中沙門菌的檢測一直應(yīng)用傳統(tǒng)的微生物培養(yǎng)法檢測，該方法檢測周期長約5～7天，且操作步驟繁瑣，應(yīng)用試劑種類繁多，對疑似菌落的選取主觀判斷性強(qiáng)，易出現(xiàn)漏檢，對檢測人員技術(shù)水準(zhǔn)要求較高。本研究以沙門菌菌屬特異性基因invA基因?yàn)槟康幕颍梅肿由飳W(xué)方法，建立了飼料中沙門菌的PCR檢測技術(shù)和實(shí)時(shí)熒光PCR檢測技術(shù)，克服了上述缺陷，將檢測時(shí)間縮短至48小時(shí)，同時(shí)具有特異性好，靈敏度高，無假陰性，可操作性強(qiáng)，檢測成本低等優(yōu)點(diǎn)。PCR檢測方法對飼料中沙門菌的檢出限可達(dá)1～3CFU/25g，可檢測的最低菌液濃度為3.2～4.0×102CFU/mL。本課題研究的PCR檢測方法已通過國家標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的評審，現(xiàn)成為國家標(biāo)準(zhǔn)，于2012年11月正式發(fā)布實(shí)施（國標(biāo)號(hào)為GB/T28642-2012）。在2008～2012年，我們對采自遼寧省的1221批飼料樣品進(jìn)行了沙門菌檢測，同時(shí)應(yīng)用本研究中建立的PCR方法和傳統(tǒng)微生物方法檢測，兩種方法檢... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

沙門菌參考菌株invA基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物電泳檢測結(jié)果

PCR產(chǎn)物酶切瓊脂糖凝膠電泳

烯酰胺凝膠電泳檢測（圖結(jié)果相符。4 3 2 1 1-2 PCR 產(chǎn)物酶切瓊脂糖凝膠電CR products enzyme agarose gel elec2.PCR 產(chǎn)物；3. MLuI 酶切產(chǎn)物；3 2 1

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[9]沙門氏菌熱裂解氣相色譜-質(zhì)譜法研究[J]. 董海燕.  針織工業(yè). 2012(06)
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博士論文
[1]沙門氏菌快速檢測體系的建立與應(yīng)用及其耐藥性分析研究[D]. 孔繁德.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3373374