為探討環(huán)格列酮和油酸對(duì)延邊黃牛脂肪細(xì)胞分化的影響,試驗(yàn)采用膠原酶消化法在無(wú)菌條件下分離獲得延邊黃牛脂肪細(xì)胞,進(jìn)行傳代及誘導(dǎo)分化,觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn),通過(guò)油紅O染色法及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法研究環(huán)格列酮和油酸在延邊黃牛脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的作用,對(duì)脂滴形成以及與脂肪細(xì)胞分化相關(guān)的主要標(biāo)志基因PPARγ,SREBP1,C/EBPβ及SCD mRNA表達(dá)量的影響。結(jié)果表明:在不同分化處理144 h后,各處理組均可觀察到有脂滴形成。其中,環(huán)格列酮單獨(dú)處理時(shí),顯著提高了PPARγ、C/EBPβ和SCD基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量（P<0.05）;添加油酸后144 h,PPARγ基因的mRNA表達(dá)量與對(duì)照相比顯著升高（P<0.05）,SCD基因mRNA的表達(dá)量顯著降低（P<0.05）;同時(shí)添加環(huán)格列酮和油酸處理144 h后,PPARγ基因的mRNA表達(dá)量顯著提高（P<0.05）,但SREBP1和C/EBPβ及SCD基因的mRNA表達(dá)量無(wú)明顯變化,說(shuō)明在延邊黃牛脂肪細(xì)胞的分化過(guò)程中,環(huán)格列酮和油酸對(duì)脂滴的形成及主要轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)量變化有著重要的調(diào)節(jié)作用。 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(04)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

圖1 分化前的延邊黃牛脂肪細(xì)胞(10x)

接種1 d后的延邊黃牛脂肪細(xì)胞(10x)

于延邊黃牛脂肪細(xì)胞分化處理144 h后,進(jìn)行油紅O染色(圖4),觀察發(fā)現(xiàn),分化處理144 h后,對(duì)照組未觀察到有脂滴形成,但細(xì)胞形態(tài)與分化前相比體積明顯變大,形狀愈加不規(guī)則,邊界漸模糊,可見(jiàn)明顯的細(xì)胞核,唯獨(dú)不見(jiàn)紅色脂滴;其他3個(gè)處理組均可觀察到被染成紅色的脂滴,其中,Cig組細(xì)胞與對(duì)照組相比體積變大,細(xì)胞形狀較分化前不規(guī)則,細(xì)胞核周?chē)梢砸?jiàn)到明顯的被染成紅色的脂滴形成;OA組也可觀察到被染成亮紅色的脂滴,且脂滴數(shù)量也相對(duì)較多,面積也較大;Cig-OA組的脂滴數(shù)量肉眼判斷雖不如Cig組和OA組多,但脂滴大小卻明顯大于Cig組和OA組。圖4 不同處理144 h后油紅O染色結(jié)果(20×)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3373166