流行性感冒（簡(jiǎn)稱流感）是由流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染疾病,傳播迅速且極易造成大規(guī)模爆發(fā)與流行,而接種疫苗是預(yù)防流感病毒傳播的主要措施。近年來(lái)隨著全球流感防控能力建設(shè)的加快以及對(duì)流感疫苗產(chǎn)品質(zhì)量需求的提高,國(guó)外已有基于不同類型細(xì)胞基質(zhì)的流感疫苗相繼獲批上市,而國(guó)內(nèi)的流感疫苗還仍然完全依賴于雞胚進(jìn)行生產(chǎn),目前MDCK細(xì)胞基質(zhì)流感疫苗是國(guó)內(nèi)疫苗研發(fā)的主要方向,但在細(xì)胞基質(zhì)流感疫苗研發(fā)中有關(guān)病毒感染細(xì)胞機(jī)制的研究較少。本研究以MDCK細(xì)胞與H3N2型流感病毒株（NYMCX-223A）為研究對(duì)象,應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)、免疫熒光染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、蛋白免疫印跡分析篩選出了MDCK細(xì)胞在感染H3N2型流感病毒株過程中的差異表達(dá)蛋白,為深入了解MDCK細(xì)胞與A型流感病毒的互作機(jī)制奠定了基礎(chǔ),獲得以下研究結(jié)果:1.通過iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)測(cè)定未感染和以MOI=1的H3N2型流感病毒感染12h的MDCK細(xì)胞中的蛋白質(zhì),共鑒定出374種差異表達(dá)蛋白質(zhì),其中表達(dá)量上調(diào)的差異表達(dá)蛋白質(zhì)有51種,表達(dá)量下調(diào)的差異表達(dá)蛋白質(zhì)有323種。2.通過對(duì)iTRAQ定量蛋白質(zhì)組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)、GO富集與KEGG富... 

【文章來(lái)源】：西北民族大學(xué)甘肅省

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

A型流感病毒結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖

4合，使流感病毒吸附于宿主細(xì)胞表面。唾液酸受體分為α-2,3型和α-2,6型兩種半乳糖苷受體[48]，α-2,3型半乳糖苷受體與人源流感病毒HA結(jié)合，主要存在于人類上呼吸道；α-2,6型半乳糖苷受體與禽流感病毒HA結(jié)合，廣泛存在于人類下呼吸道及禽類胃腸道[49]。A型流感病毒的HA蛋白易發(fā)生突變，從而導(dǎo)致流感病毒與唾液酸受體的結(jié)合方式也隨之發(fā)生改變，也有研究表明一些A型流感病毒可同時(shí)與α-2,3型和α-2,6型兩種唾液酸半乳糖苷受體結(jié)合[50]。（FromZhangJiantao,etal.2019）圖1-2流感病毒復(fù)制周期示意圖Fig.1-2Replicationcycleofaninfluenzavirus流感病毒吸附于宿主細(xì)胞表面后，經(jīng)內(nèi)吞作用侵入宿主細(xì)胞，然后被網(wǎng)格蛋白包裹形成初級(jí)內(nèi)體。初級(jí)內(nèi)體在向細(xì)胞核靠近過程中被酸化形成次級(jí)內(nèi)體，而次級(jí)內(nèi)體中的低pH使流感病毒HA蛋白構(gòu)象發(fā)生改變，導(dǎo)致流感病毒包膜與內(nèi)體膜融合，從而使流感病毒在細(xì)胞質(zhì)中完成脫殼。在流感病毒脫殼過程中，離子通道蛋白M2被激活并使流感病毒內(nèi)部酸化，流感病毒RNP復(fù)合物與基質(zhì)蛋白M1分離后被轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核中進(jìn)行流感病毒RNA的轉(zhuǎn)錄與復(fù)制[51]。流感病毒RNP復(fù)合物在進(jìn)入細(xì)胞核后，通過RNA聚合酶復(fù)合體加工轉(zhuǎn)錄形成流感病毒mRNA，其過程大致為PB2識(shí)別宿主細(xì)胞mRNA帽子結(jié)構(gòu)并與之結(jié)

101.3流感病毒感染激活的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是指細(xì)胞外的信號(hào)分子經(jīng)細(xì)胞膜傳遞信息至細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮效應(yīng)的一系列酶促反應(yīng)通路，大量研究表明病毒在宿主細(xì)胞中的復(fù)制與增殖都依賴于細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，病毒在感染細(xì)胞后將刺激信號(hào)傳遞至細(xì)胞核內(nèi)，啟動(dòng)遺傳物質(zhì)復(fù)制和蛋白質(zhì)合成功能，通過合成與病毒相關(guān)的蛋白以此調(diào)控病毒復(fù)制。流感病毒感染細(xì)胞改變了許多涉及細(xì)胞重要生理功能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，目前已確定流感病毒感染細(xì)胞可激活PI3K/Akt、NF-κB、PKC/PKR、TLR/RIG-1和MAPK等五種細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[70]，如圖1-3所示。這些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響流感病毒的侵入、復(fù)制、增殖及凋亡等流感病毒生命周期過程，同時(shí)還參與宿主細(xì)胞抗病毒免疫應(yīng)答過程[71-78]。（FromGaurPratibha,etal.2011）圖1-3流感病毒感染細(xì)胞激活的信號(hào)通路Fig.1-3HostcellmachinerygetsactivatedduringinfluenzainfectionandleadstotriggerSignalingpathways.1.3.1PI3K/Akt通路PI3K是磷脂酰肌醇-3-激酶的簡(jiǎn)稱，廣泛存在于各種細(xì)胞中，其功能主要為

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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