豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是影響世界養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的重要致病原之一。本研究利用純化的豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）免疫Balb/c小鼠,通過(guò)單克隆抗體技術(shù),篩選獲得3株能穩(wěn)定分泌抗PCV2-Cap蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞株,分別命名為3E5、3E6和5A6。體外培養(yǎng)連續(xù)傳代至第20代,分泌抗體的效價(jià)基本一致。3E5、3E6和5A6培養(yǎng)的上清效價(jià)分別為1:12800、1:1600和1:6400,腹水效價(jià)為1:6400000、1:640000和1:800000;3株單抗亞類鑒定,重鏈均為IgG2a型,輕鏈為κ型;間接免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果顯示,3株單抗均可與PCV2毒株產(chǎn)生特異性熒光反應(yīng);病毒中和試驗(yàn)結(jié)果為,3E5和3E6均具有良好的中和活性,而5A6不具有中和活性;Westernblot結(jié)果表明,3株單抗均能與純化PCV2Cap蛋白（約30kDa）發(fā)生特異性反應(yīng),其識(shí)別的表位需要Cap蛋白N端42-50aa區(qū)域的參與。利用PCV2單克隆抗體3E5作為捕獲抗體,兔抗PCV2血清為第一抗體,成功建立了PCV2夾心ELISA抗原檢測(cè)方法。該方法與豬圓環(huán)病毒1型、豬流行性腹瀉病毒、豬巨細(xì)胞病毒、豬繁殖與呼吸綜... 

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