為了解偽狂犬病病毒（PRV）變異株對(duì)自然感染仔豬的組織病理?yè)p傷,對(duì)自然感染發(fā)病仔豬進(jìn)行病理剖檢、細(xì)菌分離、病毒PCR鑒定、病毒分離培養(yǎng)、病毒粒子觀察、基因序列分析及病理組織學(xué)觀察,證實(shí)該發(fā)病仔豬為典型的PRV病毒變異株感染發(fā)病。病理剖檢和病理組織學(xué)檢查結(jié)果顯示,發(fā)病仔豬腦、心臟、肝、脾、肺、腎等主要器官組織可見(jiàn)典型的豬偽狂犬病剖檢病變和病理組織學(xué)變化。腦實(shí)質(zhì)中小血管擴(kuò)張充血,大量膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn),形成明顯的血管套和噬神經(jīng)元現(xiàn)象;肝索紊亂、肝細(xì)胞壞死;全身免疫器官淋巴細(xì)胞減少等。同時(shí)發(fā)現(xiàn)PRV在發(fā)病仔豬全身分布廣泛,且組織中病原含量與組織病理?yè)p傷程度密切相關(guān)。結(jié)果表明,自然發(fā)病仔豬感染的PRV變異毒株屬于強(qiáng)毒株,具有較強(qiáng)的致病性。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(10)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

發(fā)病仔豬的病理剖檢Figure1AutopsylesionsofdiseasedpigletA、E：發(fā)病仔豬臨床癥狀；B、C、D、F、G、H：分別為發(fā)病仔豬的肝、脾、肺、腦、腎和扁桃體；→：典型剖檢病變發(fā)生處

10期鄭琳等：變異豬偽狂犬病病毒自然感染仔豬的病理組織學(xué)研究第圖7發(fā)病仔豬不同器官組織的病理切片觀察（HE染色）Figure7Pathologicalsectionresultsofdifferentorgansindiseasedpiglet（HEstain）A、A′：腦組織；B、B′：心臟；C、C′：肝；D、D′：脾；E、E′：肺；F、F′：腎；G、G′：淋巴結(jié)；H、H′：扁桃體；I、I′：胸腺；“→”典型組織病變發(fā)生處。A，A′：Brains；B，B′：Hearts；C，C′：Livers；D，D′：Spleens；E，E′：Lungs；F，F(xiàn)′：Kidneys；G，G′：Lymphnodes；H，H′：Tonsils；I，I′：Thymus；“→”Loca-tionoftypicaltissuelesions.ABCA′B′C′GHIG′H′I′DEFD′E′F′200×200×200×200×200×100×400×400×100×200×100×200×200×200×200×200×100×100×1307

中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)第50卷圖3PRVFJLY201709株感染Vero細(xì)胞產(chǎn)生的CPE情況（200×）Figure3CytopathogeniceffectsofVerocellsinfectedwithPRVFJLY201709strainA：對(duì)照組Vero細(xì)胞；B：病毒感染的Vero細(xì)胞。A：NormalVerocells；B：InfectedVerocells.圖2發(fā)病仔豬組織樣品CSFV、PRRSV、PCV-2和PRV的PCR或RT-PCR檢測(cè)結(jié)果Figure2PCR/RT-PCRresultsofCSFV，PRRSV，PCV-2andPRVindiseasedpiglettissuesamplesM：DNA分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；1：陰性對(duì)照；2～5：PRV、CSFV、PRRSV和PCV2。M：DL2000DNAMarker；1：Negativecontrol；2—5：PRV，CSFV，PRRSVandPCV2.果為陽(yáng)性，在400bp左右有一特異性條帶，與預(yù)期結(jié)果相符。其余病原檢測(cè)結(jié)果均為陰性（圖2）。2.4病毒的分離鑒定2.4.1病毒的分離培養(yǎng)將PRV檢測(cè)為陽(yáng)性的發(fā)病仔豬腦組織勻漿液經(jīng)0.22m濾器過(guò)濾除菌后，接種Vero細(xì)胞，36h后細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)圓縮、聚集，48h后出現(xiàn)典型的拉網(wǎng)CPE，有合胞體出現(xiàn)（圖3B），對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)正常（圖3A）。利用gE特異性引物對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行PCR鑒定，能夠擴(kuò)增到預(yù)期片段，表明能從病料中分離出PRV野毒株，將其命名為FJLY201709株。2.4.2病毒粒子的電鏡觀察將出現(xiàn)CPE的Vero細(xì)胞進(jìn)行超薄切片電鏡觀察可見(jiàn)，細(xì)胞內(nèi)分布有多個(gè)直徑為100nm左右、外觀呈球形帶有囊膜的較大病毒粒子，核心電子致密度高，為典型的偽狂犬病病毒特征（圖4）。2.4.3gE基因的序列分析通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得了與預(yù)期大小相一致的約1755bp的DNA片段（圖5）。將回收的PCR產(chǎn)物連接于pMD19-T載體中送Invitrogen

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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