發(fā)布時(shí)間：2021-08-28 22:57

　　由血吸蟲感染引起的血吸蟲病是一種危害嚴(yán)重的人畜共患病。大量研究表明,寄生蟲分泌的外泌體（exosomes）可以在病原體寄生過程中發(fā)揮重要的調(diào)控作用。因此,根據(jù)本課題組已有的研究結(jié)果,以日本血吸蟲外泌體功能研究為基點(diǎn),鑒定蟲源性exosomal miRNAs所調(diào)控的宿主體內(nèi)靶基因,初步探討其對(duì)于宿主靶基因的調(diào)控作用,探索新的日本血吸蟲病治療方法;以外泌體標(biāo)志性分子CD63為研究對(duì)象,尋找作為診斷血吸蟲病的標(biāo)志物分子。最終,為血吸蟲病的診斷提供新的研究手段。?本文針對(duì)日本血吸蟲外泌體中miR-125b靶基因的鑒定及其功能的初步探究,及外泌體蛋白CD63的克隆表達(dá),其血清學(xué)檢測等實(shí)驗(yàn)展開,具體實(shí)施步驟如下:一、sjmiR-125b靶基因的鑒定及功能初步研究根據(jù)本課題組之前的研究結(jié)果,結(jié)合生物信息學(xué)分析宿主CD276可能為日本血吸蟲miR-125b的一個(gè)潛在靶基因。通過熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證宿主CD276為日本血吸蟲miR-125b的靶基因,并分析感染血吸蟲后宿主CD276基因在不同組織中的表達(dá)情況。利用PCR擴(kuò)增miR-125b與CD276互作的核酸序列,并將目的片段克隆到表達(dá)熒光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒... 

【文章來源】：天津農(nóng)學(xué)院天津市

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

miR-125b靶基因的生物信息學(xué)分析（a）；及靶基因片段的PCR擴(kuò)增（b）；目的基因片段的PCR擴(kuò)增（c）

圖 2-2 轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒后各處理組熒光素erase activities in the HEK293T cells transfcombined with different miRNA巨噬細(xì)胞后 CD276 的表達(dá)-125b mimic 轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞，利用

圖 2-2 轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒后各處理組熒光素酶表達(dá)情況分Luciferase activities in the HEK293T cells transfected with recocombined with different miRNAs 轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞后 CD276 的表達(dá)miR-125b mimic 轉(zhuǎn)染巨噬細(xì)胞，利用 qRT-PCR 檢水平。結(jié)果表明在轉(zhuǎn)然后 24 h 時(shí)，各處理組之間差異胞內(nèi) CD276 的表達(dá)水平與對(duì)照組（PBS 組、轉(zhuǎn)染 Co）（圖 2-3），提示血吸蟲 miR-125b 可能靶向抑制

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]日本血吸蟲exosomes調(diào)控蟲體與宿主互作的功能研究[D]. 朱麗慧.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016

碩士論文
[1]日本血吸蟲miR-2a靶基因的鑒定及信號(hào)分子Akt和GSK3的初步研究[D]. 周春景.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012



本文編號(hào)：3369387