豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）是豬瘟的病原，在豬群中具有高度的傳染性和致死性。強(qiáng)毒株會引發(fā)如高熱、神經(jīng)癥狀和出血等典型的臨床癥狀，給養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。研究表明，RNA病毒的細(xì)胞核定位將有助于病毒的復(fù)制。因此，研究CSFV C蛋白的亞細(xì)胞定位特征及鑒定細(xì)胞的核定位信號，會進(jìn)一步的了解CSFV的致病機(jī)理，也能為新型疫苗的研究和抗CSFV病毒策略提供相關(guān)依據(jù)。本試驗(yàn)首先將CSFV C蛋白基因克隆于真核表達(dá)載體pEGFP-C2中（pEGFP-CSFV-C）。將pEGFP-CSFV-C重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染ST細(xì)胞，24h后利用激光共聚焦顯微鏡分析C表達(dá)蛋白在細(xì)胞中的定位情況。結(jié)果顯示，CSFV C表達(dá)蛋白在ST細(xì)胞中主要定位于核仁和細(xì)胞質(zhì)。為了確定核定位信號序列，將C基因截短成兩個(gè)部分，并分別克隆到pEGFP-C2真核表達(dá)載體中，構(gòu)建pEGFP-CSFV-C1、pEGFP-CSFV-C2重組質(zhì)粒，然后分別單獨(dú)轉(zhuǎn)染ST細(xì)胞，24h后利用共聚焦顯微鏡分析pEGFP-CSFV-C1、pEGFP-CSFV-C2重組質(zhì)粒表達(dá)后在細(xì)胞中的定位情況。結(jié)果顯示，p... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    1.1 CSF 概述
    1.2 CSFV 的生物學(xué)特性
    1.3 CSFV 基因組編碼蛋白及其功能
    1.4 病毒蛋白亞細(xì)胞定位特征的研究進(jìn)展
    1.5 本研究的目的與意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 豬瘟病毒 C 蛋白亞細(xì)胞定位信號的鑒定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 CSFV C 蛋白與 ST 核仁素蛋白 Nucleolin 的亞細(xì)胞定位分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝



本文編號：3369432