貓杯狀病毒（Feline calicivirus,FCV）屬于杯狀病毒科（Calicivirdae）水皰疹病毒屬（Vesivirus）,是引起貓上呼吸道疾病的一種常見病原。FCV感染后的主要癥狀是口腔潰瘍、打噴嚏、結(jié)膜炎、慢性胃腸炎等。近幾年出現(xiàn)一些強毒株可引起急性全身性疾病,造成很高的死亡率,嚴重危害貓的健康。FCV感染宿主后,常常和其他的病原混合感染,這為其診斷帶來了困難,因此建立快速高效的FCV檢測方法已經(jīng)迫在眉睫。VP1是FCV的衣殼蛋白,是主要的免疫保護性抗原,在誘導(dǎo)機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答過程中起著重要的作用。VP1分為A-F六個區(qū),B區(qū)在125-397aa之間是保守區(qū)域,同時可誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生非中和性單克隆抗體（MAb）。E區(qū)在427-524aa之間,又分為高變區(qū)和保守區(qū)域,可誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生中和性單克隆抗體。本實驗首先將FCV毒株FCV2280株的VP1的B、E區(qū)序列的重組質(zhì)粒pET-B、pET-E分別轉(zhuǎn)化到E.coli BL21 Star（DE3）表達菌,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后均得到大量可溶性表達。純化的VP1-B、VP1-E蛋白和FCV2280病毒粒子經(jīng)Western blot檢測,三者... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

純化的FCV電鏡分析和Westernblot分析

:純化的 VP1-B、VP1-E 蛋白經(jīng) SDS-PAGE 鑒定;B:純化的 VP1-B、VP1-E 蛋白經(jīng) Western blot 鑒M: Protein Marker ；1:純化的 VP1-B 蛋白；2：純化的 VP1-E 蛋白圖 2.2. 純化的 VP1-B、VP1-E 蛋白經(jīng) SDS-PAGE 和 Western blot 鑒定Fig2.2 Purifed VP1-B and VP1-E protein were identified by SDS-PAGE and Western blot純化的 FCV2280、VP1-B 和 VP1-E 蛋白濃度測定

：FCV-2280；B：F9；C：HRB-SS；D：TIG-1；E：陰性對照；陽性對照：一抗為貓的 FCV 陽性血圖 3.2 IFA 方法鑒定 VP1-B 和 VP1-E MAbsFig3.2 VP1-B and VP1-E MAbs were identified by IFA VP1-B、VP1-E MAbs 特異性分析

【參考文獻】：
期刊論文
[1]豹源貓杯狀病毒ORF2基因的擴增、克隆及原核表達[J]. 劉秋艷,應(yīng)瑛,王一鳴,陳小慶,趙艷麗,胡桂學(xué).  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2015(01)
[2]同時檢測貓細小病毒、杯狀病毒、皰疹病毒1型多重PCR方法的建立[J]. 王翀,劉大飛,劉春國,柴洪亮,張洪英,程景,呂健,華育平,曲連東.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2014(01)
[3]貓杯狀病毒熒光定量PCR檢測方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 姜雪,高玉偉,胡桂學(xué),楊松濤,趙艷麗,劉秋燕,徐春忠,梁秀娟,夏咸柱.  吉林大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版). 2013(05)
[4]貓杯狀病毒分子生物學(xué)特征及研究進展[J]. 謝守玉,張健騑,吳健敏,白安斌,向華.  中國動物傳染病學(xué)報. 2010(06)
[5]貓杯狀病毒自然弱毒株的分離鑒定及對貓的免疫試驗[J]. 劉曄,馮譽齡,張守峰,孟軻音,鄒嘯環(huán),張菲,王穎,扈榮良.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2009(04)
[6]獵豹與虎貓杯狀病毒的分離及其超變區(qū)基因比較研究[J]. 高玉偉,夏咸柱,扈榮良,黃耕,徐春忠,王鐵東.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2003(03)
[7]老虎感染貓傳染性鼻-結(jié)膜炎病毒的研究[J]. 范泉水,夏咸柱,邱薇,黃耕,何洪彬,張建濱,喬軍,余春,鄒嘯環(huán),李金鐘,武銀蓮,殷震.  中國病毒學(xué). 2000(04)

碩士論文
[1]貓杯狀病毒VP1抗原性分析及間接ELISA診斷方法的建立[D]. 蔣艷妹.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2016
[2]基于ORF2基因表達產(chǎn)物的貓杯狀病毒間接ELISA方法的建立及其初步應(yīng)用[D]. 劉秋艷.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[3]抗貓杯狀病毒單克隆抗體的制備及雙抗夾心ELISA檢測方法的建立[D]. 艾純旭.吉林大學(xué) 2013



本文編號：3354131