為探討3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖分化過程中Ghrelin對microRNAs（miRNAs）表達(dá)的影響,將pcDNA3.1（+）-Ghrelin轉(zhuǎn)染至3T3-L1前脂肪細(xì)胞,real-time PCR檢測10種miRNA的表達(dá)變化,并對顯著差異表達(dá)的miRNA進(jìn)行生物信息學(xué)分析。結(jié)果顯示,pcDNA3.1（+）-Ghrelin的表達(dá)明顯上調(diào),約是對照組的5倍;real-time PCR結(jié)果顯示,miR-125b-5p（P<0.05）表達(dá)顯著上調(diào),miR-21a-5p（P<0.01）、miR-30c-5p（P<0.05）、miR-181-5p（P<0.01）表達(dá)顯著下調(diào);生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示,預(yù)測調(diào)節(jié)的1 062個靶基因與細(xì)胞的生長、分化和發(fā)育功能相關(guān),核因子1b（Nfib）是其共同調(diào)節(jié)的重要潛在靶基因;絲裂原活化蛋白激酶（MAPK signaling pathway）和成脂基因信號通路是其調(diào)節(jié)差異最為顯著的信號通路,與脂肪細(xì)胞的增殖和分化密切相關(guān)。結(jié)果表明,Ghrelin可通過調(diào)節(jié)miRNA的表達(dá)影響3T3-L1前脂肪細(xì)胞的增殖和分化。研究結(jié)果為進(jìn)一步探討Gh... 

【文章來源】：動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,41(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

Real-time PCR檢測Ghrelin的過表達(dá)水平

為鑒定Ghrelin對3T3-L1前脂肪細(xì)胞中miRNAs表達(dá)的影響,共檢測了10個miRNA的表達(dá)。結(jié)果表明(圖2),相比于對照組,轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中miR-125b-5p (P<0.05),miR-26a-5p、miR-let-7c的表達(dá)量明顯升高,其中miR-125b-5p (P<0.05)顯著上調(diào);相比于對照組,轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中miR-140-3p、miR-27a-3p、miR-27b-3p、miR-30e-5p、miR-21a-5p、miR-181a-5p、miR-30c-5p的表達(dá)明顯降低,其中miR-181a-5p(P<0.01)、miR-30c-5p(P<0.05)和miR-21a-5p(P<0.01)顯著下調(diào)。2.3 差異表達(dá)miRNA的靶基因預(yù)測

為進(jìn)一步分析差異表達(dá)miRNA的調(diào)節(jié)作用,首先對其進(jìn)行了靶基因預(yù)測,靶基因預(yù)測結(jié)果表明(圖3),其中miR-21a-5p調(diào)節(jié)的潛在靶基因有66個,miR-30c-5p調(diào)節(jié)的潛在靶基因有339個,miR-125a-5p調(diào)節(jié)的潛在靶基因有375個,miR-181a-5p調(diào)節(jié)的潛在靶基因有384個,去除相互重復(fù)靶基因后共1 062個,其中核因子1B(Nuclear factor 1 B-type,Nfib)是其共同調(diào)節(jié)的潛在靶基因。2.4 差異表達(dá)miRNAs的生物信息學(xué)分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-196a-5p對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響效應(yīng)[J]. 楊瓊,王靈慧,辜浩,堵晶晶,劉進(jìn)遠(yuǎn),張順華,朱礪.  中國生物工程雜志. 2018(11)
[2]Ghrelin與肥胖、胰島素抵抗和2型糖尿病的研究進(jìn)展[J]. 孫英冬,馬凱.  中國糖尿病雜志. 2017(07)
[3]Ghrelin對雞脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及分化為脂肪細(xì)胞的影響[J]. 譚曉彤,梁美樂,張麗華,徐立鳳,張媛,馬勇江,李玉谷.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2017(05)
[4]Ghrelin基因在藏母豬生殖軸中mRNA的表達(dá)[J]. 任子利,高卓然,王建洲,李瑜鑫,趙彥玲.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2017(03)
[5]小鼠Ghrelin基因真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響[J]. 陳健,葉亞瓊,歐陽丹,馬浩然,馬勇江,張媛,李玉谷.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2015(12)
[6]3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中miRNAs基因的表達(dá)變化[J]. 張星星,李楊,周見至,賈乙,劉雅,李曉輝.  中國藥房. 2013(05)
[7]Ghrelin對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響及相關(guān)機(jī)制探討[J]. 劉靜,林漢華,程佩萱,胡秀芬,盧慧玲.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2009(01)



本文編號：3353720