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臺灣云嘉南地區(qū)雞馬立克病的分子流行病學調查及其病原Meq基因序列分析

發(fā)布時間:2017-04-28 20:15

  本文關鍵詞:臺灣云嘉南地區(qū)雞馬立克病的分子流行病學調查及其病原Meq基因序列分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:馬立克病(Marek’s Disease,MD)是的一種雞的傳染性致腫瘤性疾病,由馬立克病毒引起,主要導致機體免疫抑制和T細胞出現(xiàn)淋巴瘤。自從1970年馬立克活毒疫苗開始使用后,已大幅度降低了馬立克病疫情所造成的經(jīng)濟損失,但隨著馬立克野毒毒力的不斷增強,而不斷獲得突破現(xiàn)有疫苗免疫的能力。目前,馬立克病對養(yǎng)禽業(yè)來說始終是一種威脅。因此,分析目前流行的馬立克野毒株毒力及其特征,對于監(jiān)控野毒的變異和防控本病提供依據(jù)。本研究應用PCR方法對臺灣云嘉南地區(qū)80~90日齡的土雞進行馬立克病的分子流行病學調查,并利用DNASTAR內的MegAlign程式,分別針對Meq的核苷酸與氨基酸序列進行比對分析,使用程式內建的clastal W方法進行排列,之后以MEGA 6軟體使用鄰接法構建親緣關系進化樹。獲得結果如下:1.利用PCR的方法對臺灣云嘉南地區(qū)80~90日齡的土雞羽髓樣本進行檢測。據(jù)檢測結果顯示,80~90日齡的土雞馬立克病野毒感染的陽性率為-1.48%~10.23%(4.38%),野毒感染的場陽性率為18.75%(3/16)。由PCR檢測區(qū)分馬立克病毒的三種血清型,可以推測出在臺灣云嘉南地區(qū)93.75%的土雞場都使用過血清一型疫苗進行對馬立克病的免疫,25.00%的土雞場使用過血清一型和血清三型兩種疫苗進行免疫。另外,有兩個土雞場還發(fā)現(xiàn)有馬立克病與禽白血病混和感染現(xiàn)象。2.利用DNASTAR內的MegAlign程式,分別針對馬立克病毒Meq基因的核苷酸與氨基酸序列進行比對分析,使用程式內建的clastal W方法進行排列。之后以MEGA6軟體使用鄰接法構建親緣關系進化樹。結果可見,與國外23株毒株各株間核苷酸序列相似性為94.4%~100%,氨基酸的序列相似性為97.6%~100%。核苷酸和氨基酸親緣關系進化樹分析均發(fā)現(xiàn),美國株和中國株均獨立的成為一個分支,臺灣的無臨床癥狀野毒株同在一個小的分支;而中國的毒株相對不太穩(wěn)定,中國的強毒株與臺灣分離野毒株有向美國的野毒株靠近的趨勢;疫苗株與俄羅斯疫苗株在同一分支。由馬立克病毒Meq基因序列相異性以及進化樹分析方面,可以得出臺灣地區(qū)的野毒株與中國強毒的親緣關系較近,推測其毒力及其致病性不亞于中國強毒株。
【關鍵詞】:馬立克病 分子流行病學 Meq基因 序列分析
【學位授予單位】:西北農林科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S858.31
【目錄】:
  • 摘要5-6
  • ABSTRACT6-10
  • 文獻綜述10-18
  • 第一章 雞馬立克病的研究概述10-18
  • 1.1 背景10-11
  • 1.2 相關基因與蛋白的研究11-12
  • 1.2.1 病原的分類11
  • 1.2.2 病毒的形態(tài)11-12
  • 1.2.3 物理特征12
  • 1.2.4 基因組12
  • 1.3 致瘤基因與蛋白質的研究12-14
  • 1.3.1 糖蛋白14
  • 1.4 流行病學與發(fā)病機理14-15
  • 1.4.1 易感宿主14
  • 1.4.2 發(fā)病日齡14
  • 1.4.3 傳播途徑14-15
  • 1.5 致病機理15-16
  • 1.5.1 早期溶細胞感染15
  • 1.5.2 感染潛伏期15
  • 1.5.3 二次溶細胞感染與腫瘤的形成15-16
  • 1.6 臨床癥狀及病理變化16
  • 1.7 診斷與鑒定16-17
  • 1.8 預防與治療17
  • 1.8.1 預防17
  • 1.8.2 治療17
  • 1.9 本研究的目的和意義17-18
  • 試驗研究18-35
  • 第二章 臺灣云嘉南地區(qū)雞馬立克病的分子流行病學調查18-28
  • 2.1 材料與方法18-24
  • 2.1.1 材料18
  • 2.1.2 方法18-24
  • 2.2 結果24-26
  • 2.3 討論26-27
  • 2.4 小結27-28
  • 第三章 雞馬立克病毒Meq基因序列分析28-35
  • 3.1 材料與方法28-30
  • 3.1.1 材料28
  • 3.1.2 方法28-30
  • 3.2 結果與分析30-33
  • 3.2.1 PCR擴增結果30
  • 3.2.2 Meq基因序列分析結果30-32
  • 3.2.3 進化分析32-33
  • 3.3 討論33-34
  • 3.4 小結34-35
  • 結論35-36
  • 參考文獻36-40
  • 致謝40-41
  • 作者簡介41

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