牛副流感病毒3型血清學(xué)調(diào)查及其單克隆抗體的制備與應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-08-09 13:27
牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type3, BPIV3)是牛引起牛呼吸道疾病的的一種重要病原。BPIV3是單股負(fù)鏈RNA病毒,屬于單分子負(fù)鏈RNA目、副黏病毒科、副黏病毒亞科、呼吸道病毒屬的成員,也常被稱為“運(yùn)輸熱”病毒。BPIV3可引起犢牛肺炎和非典型間質(zhì)性肺炎,BPIV3可與BVDV、IBRV和BRSV等病毒性病原及巴氏桿菌等細(xì)菌性病原共同引起牛的呼吸道疾病綜合癥(Bovine respiratory disease complex. BRDC),每年都會(huì)給世界養(yǎng)牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。BPIV3的血清學(xué)調(diào)查表明,BPIV3在我國(guó)的感染和分布是非常廣泛的。目前國(guó)內(nèi)對(duì)BPIV3的研究處于起步階段,尚沒(méi)有商品化的診斷試劑和疫苗存在,嚴(yán)重制約著國(guó)內(nèi)對(duì)BPIV3的防控和養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展。為調(diào)查BPIV3在我國(guó)的血清學(xué)流行情況,本研究從黑龍江、遼寧、新疆、云南、貴州、廣西、河北、山東、河南、江西、湖南和福建等12個(gè)省區(qū)采集牛血液樣品,經(jīng)離心分離血清后選取2489份樣品,采用血清中和試驗(yàn)檢測(cè)血清中的BPIV3抗體,結(jié)果顯示除江西省血清樣品陽(yáng)性率為27....
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
BPIV3接種MDBK細(xì)胞的病變(400X)
圖2.2 BPIV3全國(guó)分布圖Fig. 2.2 Distribution of BPIV3 in China在對(duì)牛感染BPrV3的診斷中,由于BPIV3的高變異性而使得血清中抗BPIV3抗體的檢測(cè)在BPrV3感染的檢測(cè)中具有了非常重要的意義(Allen etal.,1992)。國(guó)外很多國(guó)家對(duì)BPIV3的流行病學(xué)調(diào)査顯示BPIV3的感染率很高,牛血清樣品中的BPIV3抗體水平也很高。我國(guó)對(duì)BPIV3的報(bào)道比較晚,2001年童澤恩等根據(jù)內(nèi)蒙地區(qū)接牛和幼牛的臨床癥狀判斷和病理變化判斷為BPIV3的感染(童澤恩,2008),這是國(guó)內(nèi)首次關(guān)于BPIV3的報(bào)道。BPrV3的傳播在很大程度上是由于牛只的長(zhǎng)途轉(zhuǎn)運(yùn);糁驹频葘(duì)我國(guó)吉林、內(nèi)蒙和山西3個(gè)省區(qū)的BPIV3進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查,結(jié)果顯示三個(gè)省份的BPIV3感染非常嚴(yán)重(霍志云等,2011)。本次調(diào)查的12個(gè)省份中,除了江西等個(gè)別省份外,其他省份的牛血清BPIV3陽(yáng)性率很高,這表明BPIV3在我國(guó)的流行也是非常普遍且很嚴(yán)重的。江西等省的BPIV3抗體陽(yáng)性率相對(duì)較低,究其原因:第一,有些省份養(yǎng)牛業(yè)不發(fā)達(dá),且以家用水牛居多有關(guān),比如江西省;第二,地理環(huán)境影響,某些省份與外部的交流較少,也是制約BPIV3傳播的一個(gè)重要因素,比如貴州、江西等省份;第三如河南和貴州等省經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá),和其他地區(qū)的牲畜貿(mào)易交流較少也可以明顯減少BPIV3的傳播;糁驹频鹊腂PIV3 Jil清學(xué)調(diào)査結(jié)果證明在養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達(dá)的省份BPIV3感染是非常值得關(guān)注的。2.3.2我國(guó)BPIV3區(qū)域性分布差異分析
— + — + — + —0.186 1.233 0.127 0.819 0.102 0.583 0.0800.205 1.426 0.132 0.870 0.124 0.520 0.0920.198 1.525 0.134 1.031 0.132 0.627 0.0940.214 1.669 0.150 1.358 0.136 0.757 0.1010.238 1.777 0.150 1.585 0.145 0.914 0.1120.252 1.934 0.165 1.627 0.163 1.188 0.1200.301 2.108 0.197 1.889 0.183 1.335 0.1340.287 2.142 0.211 1.832 0.198 1.413 0.143“+”代表陽(yáng)性血清。蹄選、細(xì)胞融合和陽(yáng)性細(xì)胞株蹄選過(guò)程,蹄選出抗BPIV3株再經(jīng)3次的克隆化蹄選,以建立好的間接ELISA方分泌性良好的雜交瘤細(xì)胞克隆,分別為13D10和19泌單抗,經(jīng)檢測(cè),細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇和生長(zhǎng)狀況也
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]北方三。▍^(qū))牛副流感病毒3型的血清學(xué)調(diào)查[J]. 霍志云,童欽,胡嘉欣,王煒. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2012(09)
[2]牛副流感病毒3型NP單抗的制備及初步應(yīng)用[J]. 呂闖,朱遠(yuǎn)茂,董秀梅,蔡紅,于作,高欲燃,薛飛. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(12)
[3]牛副流感病毒3型的分離鑒定及感染牛抗體消長(zhǎng)規(guī)律的研究[J]. 周玉龍,吳海濤,任亞超,耿靜,王密,謝金鑫,樸范澤. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2011(01)
[4]牛副流感病毒3型的分離鑒定[J]. 劉鵬,侯喜林,周玉龍,樸范澤. 微生物學(xué)通報(bào). 2009(09)
[5]一起疑似牛副流感的診斷和治療報(bào)告[J]. 童澤恩,王索柱,郭殿仁,陳勁濤,李學(xué)慶. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2002(08)
博士論文
[1]牛副流感病毒3型山東分離株致病性研究及熒光定量RT-PCR的建立[D]. 董秀梅.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
碩士論文
[1]牛副流感病毒3型NP單抗制備及固相阻斷ELISA的建立和應(yīng)用[D]. 呂闖.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[2]牛呼吸道病毒病血清學(xué)調(diào)查及其多重RT-PCR診斷方法的建立與初步應(yīng)用[D]. 童欽.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]牛副流感病毒3型山東分離株核衣殼蛋白表達(dá)鑒定、多抗制備及應(yīng)用[D]. 史鴻飛.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[4]牛副流感病毒3型的分離鑒定和間接ELISA方法建立及初步應(yīng)用[D]. 劉鵬.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2010
[5]牛副流感病毒3型的分離鑒定和間接ELISA方法建立及初步應(yīng)用[D]. 吳海濤.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2010
本文編號(hào):3332151
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
BPIV3接種MDBK細(xì)胞的病變(400X)
圖2.2 BPIV3全國(guó)分布圖Fig. 2.2 Distribution of BPIV3 in China在對(duì)牛感染BPrV3的診斷中,由于BPIV3的高變異性而使得血清中抗BPIV3抗體的檢測(cè)在BPrV3感染的檢測(cè)中具有了非常重要的意義(Allen etal.,1992)。國(guó)外很多國(guó)家對(duì)BPIV3的流行病學(xué)調(diào)査顯示BPIV3的感染率很高,牛血清樣品中的BPIV3抗體水平也很高。我國(guó)對(duì)BPIV3的報(bào)道比較晚,2001年童澤恩等根據(jù)內(nèi)蒙地區(qū)接牛和幼牛的臨床癥狀判斷和病理變化判斷為BPIV3的感染(童澤恩,2008),這是國(guó)內(nèi)首次關(guān)于BPIV3的報(bào)道。BPrV3的傳播在很大程度上是由于牛只的長(zhǎng)途轉(zhuǎn)運(yùn);糁驹频葘(duì)我國(guó)吉林、內(nèi)蒙和山西3個(gè)省區(qū)的BPIV3進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查,結(jié)果顯示三個(gè)省份的BPIV3感染非常嚴(yán)重(霍志云等,2011)。本次調(diào)查的12個(gè)省份中,除了江西等個(gè)別省份外,其他省份的牛血清BPIV3陽(yáng)性率很高,這表明BPIV3在我國(guó)的流行也是非常普遍且很嚴(yán)重的。江西等省的BPIV3抗體陽(yáng)性率相對(duì)較低,究其原因:第一,有些省份養(yǎng)牛業(yè)不發(fā)達(dá),且以家用水牛居多有關(guān),比如江西省;第二,地理環(huán)境影響,某些省份與外部的交流較少,也是制約BPIV3傳播的一個(gè)重要因素,比如貴州、江西等省份;第三如河南和貴州等省經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá),和其他地區(qū)的牲畜貿(mào)易交流較少也可以明顯減少BPIV3的傳播;糁驹频鹊腂PIV3 Jil清學(xué)調(diào)査結(jié)果證明在養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達(dá)的省份BPIV3感染是非常值得關(guān)注的。2.3.2我國(guó)BPIV3區(qū)域性分布差異分析
— + — + — + —0.186 1.233 0.127 0.819 0.102 0.583 0.0800.205 1.426 0.132 0.870 0.124 0.520 0.0920.198 1.525 0.134 1.031 0.132 0.627 0.0940.214 1.669 0.150 1.358 0.136 0.757 0.1010.238 1.777 0.150 1.585 0.145 0.914 0.1120.252 1.934 0.165 1.627 0.163 1.188 0.1200.301 2.108 0.197 1.889 0.183 1.335 0.1340.287 2.142 0.211 1.832 0.198 1.413 0.143“+”代表陽(yáng)性血清。蹄選、細(xì)胞融合和陽(yáng)性細(xì)胞株蹄選過(guò)程,蹄選出抗BPIV3株再經(jīng)3次的克隆化蹄選,以建立好的間接ELISA方分泌性良好的雜交瘤細(xì)胞克隆,分別為13D10和19泌單抗,經(jīng)檢測(cè),細(xì)胞的凍存、復(fù)蘇和生長(zhǎng)狀況也
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]北方三。▍^(qū))牛副流感病毒3型的血清學(xué)調(diào)查[J]. 霍志云,童欽,胡嘉欣,王煒. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2012(09)
[2]牛副流感病毒3型NP單抗的制備及初步應(yīng)用[J]. 呂闖,朱遠(yuǎn)茂,董秀梅,蔡紅,于作,高欲燃,薛飛. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(12)
[3]牛副流感病毒3型的分離鑒定及感染牛抗體消長(zhǎng)規(guī)律的研究[J]. 周玉龍,吳海濤,任亞超,耿靜,王密,謝金鑫,樸范澤. 中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2011(01)
[4]牛副流感病毒3型的分離鑒定[J]. 劉鵬,侯喜林,周玉龍,樸范澤. 微生物學(xué)通報(bào). 2009(09)
[5]一起疑似牛副流感的診斷和治療報(bào)告[J]. 童澤恩,王索柱,郭殿仁,陳勁濤,李學(xué)慶. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2002(08)
博士論文
[1]牛副流感病毒3型山東分離株致病性研究及熒光定量RT-PCR的建立[D]. 董秀梅.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
碩士論文
[1]牛副流感病毒3型NP單抗制備及固相阻斷ELISA的建立和應(yīng)用[D]. 呂闖.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[2]牛呼吸道病毒病血清學(xué)調(diào)查及其多重RT-PCR診斷方法的建立與初步應(yīng)用[D]. 童欽.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[3]牛副流感病毒3型山東分離株核衣殼蛋白表達(dá)鑒定、多抗制備及應(yīng)用[D]. 史鴻飛.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
[4]牛副流感病毒3型的分離鑒定和間接ELISA方法建立及初步應(yīng)用[D]. 劉鵬.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2010
[5]牛副流感病毒3型的分離鑒定和間接ELISA方法建立及初步應(yīng)用[D]. 吳海濤.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2010
本文編號(hào):3332151
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