為實現(xiàn)PCV3快速定量檢測的需求,參考GenBank中已登錄的PCV3 rep基因序列設計引物,建立了PCV3 TaqMan探針法實時熒光PCR檢測方法,并進一步構建標準曲線,采用絕對定量法對豬的心、肝、脾、肺、腎、淋巴結組織進行PCV3病毒載量的檢測。結果顯示,所建立的PCV3實時熒光定量PCR檢測方法具有良好的敏感性和特異性,敏感性可達16.3 copies/μL質粒DNA。病毒載量檢測結果顯示,在肺和淋巴結中檢測到了PCV3,且淋巴結中的病毒含量明顯高于肺中的病毒含量,這表明不同組織器官中PCV3的病毒含量存在較大差異。 

【文章來源】：動物醫(yī)學進展. 2020,41(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

PCV3熒光PCR檢測質粒的結果

經敏感性試驗檢測(圖2),該方法的檢測靈敏度可達16.3 copies質粒DNA,其對應的Ct值為37.65。2.3 PCV3實時熒光定量PCR檢測方法的特異性檢測結果

經檢測,得到PCV3實時熒光定量PCR方法的標準曲線(圖4),方程式為:y=-3.431 8x+41.666,其擴增效率為95.6%,反應相關系數(shù)為0.998 8,符合熒光定量的要求,可以用于PCV3病毒的絕對定量分析。對病豬的心、肝、脾、肺、腎、淋巴結進行PCV3實時熒光定量PCR檢測,反應結束后,分別記錄Ct值,計算出平均Ct值,根據絕對定量方法計算不同組織器官中PCV3的病毒載量。結果顯示(表1),僅在肺和淋巴結中檢測到了PCV3,而且淋巴結中的病毒載量是肺中的70.8倍。圖4 PCV3熒光定量PCR檢測方法的標準曲線

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3332092