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快速鑒別診斷不同亞型鴨肝炎病毒的多重RT-PCR檢測方法的建立和應(yīng)用

發(fā)布時間:2021-08-09 13:43
  鴨病毒性肝炎(duck viral hepatitis, DVH)是由鴨病毒性肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHV)引起雛鴨的一種發(fā)病急、死亡快、死亡率高的疾病,主要感染3周齡以內(nèi)的雛鴨剖檢病變主要存在于肝臟。根據(jù)2009年的國際病毒分類委員第十次分類報告,將DHV分為鴨甲肝病毒(DHAV),鴨星狀病毒1型(DAstV-1),鴨星狀病毒2型(DAstV-1)三個血清型。同時,DHAV又包括三個基因亞型或血清亞型,分別稱為DHAV-1、DHAV-2和DHAV-3。鴨肝炎病毒的三個血清型及鴨甲肝病毒三個亞型之間均沒有明顯的抗原交叉保護(hù),給鴨肝炎病毒的防治帶來了很大的困難。DHAV-1一直是我國流行的優(yōu)勢血清型,但近年來DHAV-3在我國廣泛流行,甚至一些地區(qū)出現(xiàn)DHAV-1和DHAV-3共流行的現(xiàn)象,DAstV-1在我國的出現(xiàn)由進(jìn)一步增加了鴨病毒性肝炎的防治難度。本研究建立了可以快速鑒別診斷不同亞型鴨肝炎病毒單純或混合感染的多重RT-PCR方法,并對2011年從山東,四川,河南,廣東四省隨機(jī)采集的病料以及2012年從山東省不同鴨場采集的病料進(jìn)行了鑒別診斷。本研究共分為... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:76 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

快速鑒別診斷不同亞型鴨肝炎病毒的多重RT-PCR檢測方法的建立和應(yīng)用


鴨胚和雛鴨接種DAstV-1臨床癥狀及剖檢變化

凝膠電泳,產(chǎn)物,組序,核苷酸同源性


合 結(jié) 構(gòu) AAAAAAC , 緊 接 著 在 3736 到 3742 位 置 有 一 個 二 級 頸CTGAAACATCATGGCCCC。ORF1b和ORF2也不在同一個開放閱讀框重疊區(qū)(圖3-3)。WF1201株的全基因組序列與GeneBank中登錄的5株因組序列用DNASTAR.Lasergene.v7.1中的Clustal W方法進(jìn)行同源新1株的全基因組序列與GeneBank中登錄的C-NGB株(江蘇地區(qū)分離株)高,為98.7%,與其他四株(DA06株、DA07株為河北地區(qū)分離株;DA08株京地區(qū)分離株)全基因組序列的核苷酸同源性為92.2%~93.3%(圖3-4)

基因組結(jié)構(gòu),核苷酸同源性,北京地區(qū),凝膠電泳


株為北京地區(qū)分離株)全基因組序列的核苷酸同源性為92.2%~93.3%(圖3-4)。圖3-2 PCR產(chǎn)物凝膠電泳圖Fig. 3-2 amplification fragments of the DAstV-1 WF1201 strainM: DL5000 plus DNA Marker; 1-10: 10 PCR amplification fragments uing primers of 1F/R-10F/R. 11: PCRamplification fragment using primer 3′ Race

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]鴨肝炎病毒分子流行病學(xué)分析[J]. 袁率珍,范書才,李虹,姜畔,張兵.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2010(11)
[4]鴨肝炎的防治[J]. 唐林生,李嬋,韋平.  農(nóng)村新技術(shù). 2009(17)
[5]Ⅰ型鴨病毒性肝炎的病原特性及防控研究進(jìn)展[J]. 李嬋,韋平,唐林生,蒙秋,黎宗強(qiáng).  中國家禽. 2008(24)
[6]鴨病毒性肝炎卵黃抗體防治鴨肝炎研究[J]. 王岳,薛樂全,張壯志.  山東畜牧獸醫(yī). 2008(11)
[7]一株Ⅹ型鴨疫里默氏桿菌GN52穩(wěn)定性的研究[J]. 孫亞妮,趙欽,姜世金,張興曉,孔義波,魏秀麗.  微生物學(xué)通報. 2008(07)
[8]鴨病毒性肝炎的病原分離和鑒定[J]. 陳海軍,程安春,汪銘書,朱德康,楊苗,周毅,陳孝躍.  中國家禽. 2007(12)
[9]一例鴨病毒性肝炎病原的分離鑒定[J]. 吳憶春,苗立中,郭時金.  中國家禽. 2007(07)
[10]Ⅰ型鴨病毒性肝炎病毒RT-PCR檢測方法的建立[J]. 馬秀麗,宋敏訓(xùn),黃兵,廖明,辛朝安.  家禽科學(xué). 2006(11)

碩士論文
[1]Ⅰ型鴨肝炎病毒LY0801株的分離鑒定及致病性研究[D]. 高繼明.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號:3332175

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