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宿主microRNA-181抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒復制的機制研究

發(fā)布時間:2021-08-07 07:07
  豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS),俗稱藍耳病,是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRS virus, PRRSV)引起的豬傳染性疾病,近年來給我國乃至全世界養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。最近研究表明,在病毒感染過程中宿主microRNAs (miRNAs)可以靶向病毒基因組RNA而導致病毒的復制受到抑制,這種作用方式被人們視為一種潛在的宿主抗病毒防御機制。然而宿主miRNAs是否可以靶向PRRSV的基因組RNA并抑制PRRSV復制的問題并不是很清楚,本論文針對這一問題進行了一定的研究;谝呀(jīng)鑒定的豬miRNAs數(shù)目很少,本文首先通過分子克隆和高通量測序技術鑒定了豬肺泡巨噬細胞(Porcine alveolar macrophages, PAMs)中miRNA表達譜,并分析了PAMs在感染PRRSV前后miRNAs表達的差異。初步結果顯示PAMs可以表達800多種miRNAs,且PRRSV感染后幾乎所有miRNAs的表達均呈現(xiàn)下降趨勢。通過生物信息學軟件(RegRNA和ViTa)對PRRSV的基因組R... 

【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:154 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
主要縮略詞
第一章 前言
    1.1 豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)簡介
    1.2 PRRSV病毒學研究進展
    1.3 PRRSV感染的免疫反應特點簡述
    1.4 MicroRNAs(miRNAs)概述
    1.5 miRNAs在抗感染固有免疫應答中的作用
    1.6 miRNAs在宿主-病毒互作關系中的作用
    1.7 本課題的研究目的和意義
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 主要儀器設備
    2.3 實驗方法
第三章 實驗結果與分析
    3.1 PAMs內(nèi)源表達miRNAs的克隆與鑒定
    3.2 高通量測序鑒定PAMs被PRRSV感染前后宿主miRNA表達譜
    3.3 通過生物信息學軟件篩選可能抑制PRRSV復制的潛在miRNAs
    3.4 miR-181家族成員具有很強的抑制PRRSV復制的能力
    3.5 在miR-181家族成員中miR-181c抑制PRRSV復制的能力最強
    3.6 miR-181可以通過直接靶向PRRSV基因組RNA來抑制其復制
    3.7 miR-181在miRISC復合體中與PRRSV基因組RNA相互作用
    3.8 miR-181和其他靶向PRRSV miRNAs在不同細胞和組織中的表達分析
    3.9 滴鼻給藥miR-181c抑制高致病性PRRSV在豬體內(nèi)復制并緩解發(fā)燒
第四章 討論與展望
    4.1 宿主miR-181與PRRSV基因組RNA相互作用
    4.2 miR-181和其他靶向PRRSV miRNAs與PRRSV的復制能力有一定的關聯(lián)
    4.3 體內(nèi)給藥miR-181c抵抗PRRSV的效果
    4.4 miR-181具有抗PRRSV的潛力
第五章 結論
參考文獻
致謝
附錄
    一 在Mock感染PAMs樣本中通過高通量測序鑒定了842種miRAs
    二 在PRRSV感染PAMs樣本中通過高通量測序鑒定了870種miRNAs
作者簡介


【參考文獻】:
期刊論文
[1]我國高致病性豬藍耳病疫情及防控情況[J]. 張銀田.  獸醫(yī)導刊. 2007(07)
[2]從疑似PRRS流產(chǎn)胎兒分離PRRSV的研究[J]. 郭寶清,陳章水,劉文興,崔益洙.  中國畜禽傳染病. 1996(02)



本文編號:3327327

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