針對豬胸膜肺炎放線桿菌種特異性基因ApxⅣ和血清1、3、5、7型的特異Cps基因設計5對引物,通過擴增條件的優(yōu)化,建立了豬胸膜肺炎放線桿菌及血清1、3、5、7型的五重PCR檢測方法。特異性試驗顯示,對血清1～15型參考菌株均擴增出相應的預期目的條帶,對6種引起豬發(fā)病的主要病原菌均未擴增出任何條帶。敏感性試驗表明,對各血清型細菌純培物的敏感性皆為10³ CFU/mL;對1、5型感染樣品的敏感性為10⁴ CFU/g,對3、7型感染樣品的敏感性為10³ CFU/g。可在4.5 h左右直接從病豬肺臟中得到檢測結果。方法的建立為相關臨床病例快速診斷及流行病學調(diào)查提供了有效的技術支持。 

【文章來源】：動物醫(yī)學進展. 2020,41(12)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

多重PCR檢測方法條件優(yōu)化結果

用所建立的多重PCR方法檢測APP血清1、3、5、7型的基因組DNA,在相應大小的位置均有特異PCR條帶,對APP血清1～15型均可以擴增出417 bp大小的條帶(圖2)。而對引起豬發(fā)病的主要病原菌(豬多殺性巴氏桿菌、豬大腸埃希菌、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬丹毒桿菌、豬沙門菌)基因組DNA模板均無任何擴增產(chǎn)物(圖3),結果表明所建立多重PCR方法具有良好的特異性。圖3 多重PCR對其它致病菌的特異性試驗結果

多重PCR對其它致病菌的特異性試驗結果

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]胸膜肺炎嗜血桿菌的分離和鑒定[J]. 楊旭夫,彭發(fā)泉.  中國畜禽傳染病. 1990(04)



本文編號：3321404