為表達藍舌病病毒NS3蛋白,將藍舌病病毒血清8型NS3序列克隆至pFastBac-HTA載體上,經(jīng)轉(zhuǎn)座、轉(zhuǎn)染后獲得重組桿狀病毒rBac-NS3;用間接免疫熒光（IFA）檢測NS3蛋白的表達情況,并采用親和層析進行純化;以Western Blot和間接ELISA方法鑒定NS3蛋白的反應原性。IFA結(jié)果顯示,重組桿狀病毒rBac-NS3感染的Sf9細胞可以大量表達NS3蛋白。Western Blot結(jié)果顯示,純化后的NS3蛋白與抗His單抗和綿羊藍舌病陽性血清能夠發(fā)生特異性反應;以純化的NS3蛋白為包被抗原建立的間接ELISA方法可以區(qū)分藍舌病陽性血清和陰性血清,進一步驗證本試驗利用桿狀病毒表達系統(tǒng)成功表達并純化出藍舌病病毒NS3蛋白,表明純化后的NS3蛋白具有良好的反應原性,可作為開發(fā)鑒別診斷試劑盒的備選蛋白及NS3蛋白的結(jié)構(gòu)和生物學功能研究。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)雜志. 2020,56(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

NS3蛋白表達純化SDS-PAGE結(jié)果

間接ELISA結(jié)果

間接免疫熒光試驗結(jié)果(200×)


本文編號：3304028