豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）在臨床上主要引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、繁殖障礙和呼吸道疾病等多種疾病,主要發(fā)病豬為6-16周齡仔豬。根據(jù)國際分類方法主要分為PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e五個(gè)基因型。近年來根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查和遺傳變異分析表明PCV2流行以及變異的趨勢國內(nèi)目前主要流行的為PCV2d基因型毒株。對(duì)于PCV2暫無有效的治療方法,疫苗免疫被認(rèn)為是當(dāng)前最為有效的防控措施。Cap蛋白是PCV2的主要免疫原性蛋白,是近些年研究PCV2相關(guān)亞單位疫苗的首選抗原。目前市場上商品化疫苗主要是針對(duì)PCV2a、PCV2b基因型疫苗,研究證明PCV2a疫苗對(duì)PCV2d毒株能提供較好的保護(hù)作用。本研究內(nèi)容主要研究PCV2b疫苗對(duì)目前國內(nèi)流行的PCV2d基因型毒株是否具有較好的保護(hù)作用以及構(gòu)建表達(dá)量更高的重組Cap蛋白,構(gòu)建表達(dá)了 PCV2 Cap蛋白重組桿狀病毒并進(jìn)行了免疫原性研究。主要內(nèi)容如下:1.通過對(duì)疑似PCV2的病豬組織病料進(jìn)行分離鑒定以及小鼠致病性試驗(yàn),分離到兩株分別為P... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??

４９３ｂｐ??Ｍ．ＤＬ２０００ＤＮＡｍａｒｋｅｒｌ－４?分別為?Ｘ４６?分離株、５１２３、ＰＣＶ２?陽性、水?ＰＣＲ?產(chǎn)物??圖１－１?ＰＣＲ擴(kuò)增結(jié)果??Ｍ．ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ｌ￣４．Ｔｈｅ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?Ｘ４６、５１２３、ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｏｆ?ＰＣＶ２?ａｎｄ?Ｈ２Ｏ??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔ??■?■?■??Ａ．分離株Ｘ４６?Ｂ．分離株５１２３?Ｃ．陰性對(duì)照??圖１－２分離株Ｘ４６和５１２３間接免疫熒光檢測??Ａ．Ｘ４６?ｓｔｒａｉｎ?Ｂ．５１２３?ｓｔｒａｉｎ?Ｃ．ＰＫ１５?ｃｅｌｌ?ｂｌａｎｋ??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ＩＦＡ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?Ｘ４６?ａｎｄ?５１２３??３．３分離病毒ＤＮＡ拷貝數(shù)的測定??應(yīng)用Ｔａｑｍａｎ實(shí)時(shí)熒光定量ＰＣＲ的方法檢測ＰＣＶ２分離株Ｘ４６和５１２３的不同代次病??毒ＤＮＡ拷貝數(shù)，進(jìn)而判斷病毒在細(xì)胞中的增殖情況，結(jié)果如圖１－３所示，傳代到２０代病??毒拷貝數(shù)趨于穩(wěn)定，ＤＮＡ拷貝數(shù)分別約為：Ｘ４６，２．７８ｘｌ０１Ｑｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ；?５１２３，??２．３?３?ｘ?１?〇９ｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ。??

分離株?Ｘ４６?和?５１２３?與?ＧｅｎＢａｎｋ?上的?８?株?ＰＣＶ２?（ＰＣＶ２ａ、ＰＣＶ２ｂ、ＰＣＶ２ｃ?和?ＰＣＶ２ｄ??各２株）全長序列進(jìn)行比對(duì)分析。１０株ＰＣＶ２毒株全基因組序列構(gòu)建遺傳進(jìn)化樹，結(jié)果如??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬圓環(huán)病毒2型Taqman探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法的建立[J]. 石林,吳瑗,巴少波,劉正奎,陳琳,王磊,邵春艷,孫靜,周瑩姍,王曉杜,宋厚輝.  浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(06)
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[9]豬圓環(huán)病毒2型感染昆明小鼠模型的建立[J]. 苗嵐飛,崔尚金,張超范,胡守萍,陳長木,張垚.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(06)
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碩士論文
[1]河南PCV2的分離鑒定及Cap蛋白的表達(dá)與純化[D]. 趙寶磊.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3303033