豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）在臨床上主要引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）、繁殖障礙和呼吸道疾病等多種疾病,主要發(fā)病豬為6-16周齡仔豬。根據(jù)國際分類方法主要分為PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e五個基因型。近年來根據(jù)流行病學調查和遺傳變異分析表明PCV2流行以及變異的趨勢國內目前主要流行的為PCV2d基因型毒株。對于PCV2暫無有效的治療方法,疫苗免疫被認為是當前最為有效的防控措施。Cap蛋白是PCV2的主要免疫原性蛋白,是近些年研究PCV2相關亞單位疫苗的首選抗原。目前市場上商品化疫苗主要是針對PCV2a、PCV2b基因型疫苗,研究證明PCV2a疫苗對PCV2d毒株能提供較好的保護作用。本研究內容主要研究PCV2b疫苗對目前國內流行的PCV2d基因型毒株是否具有較好的保護作用以及構建表達量更高的重組Cap蛋白,構建表達了 PCV2 Cap蛋白重組桿狀病毒并進行了免疫原性研究。主要內容如下:1.通過對疑似PCV2的病豬組織病料進行分離鑒定以及小鼠致病性試驗,分離到兩株分別為P... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＰＣＲ擴增結果??

４９３ｂｐ??Ｍ．ＤＬ２０００ＤＮＡｍａｒｋｅｒｌ－４?分別為?Ｘ４６?分離株、５１２３、ＰＣＶ２?陽性、水?ＰＣＲ?產(chǎn)物??圖１－１?ＰＣＲ擴增結果??Ｍ．ＤＬ２０００?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ｌ￣４．Ｔｈｅ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?Ｘ４６、５１２３、ｔｈｅ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｏｆ?ＰＣＶ２?ａｎｄ?Ｈ２Ｏ??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔ??■?■?■??Ａ．分離株Ｘ４６?Ｂ．分離株５１２３?Ｃ．陰性對照??圖１－２分離株Ｘ４６和５１２３間接免疫熒光檢測??Ａ．Ｘ４６?ｓｔｒａｉｎ?Ｂ．５１２３?ｓｔｒａｉｎ?Ｃ．ＰＫ１５?ｃｅｌｌ?ｂｌａｎｋ??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ＩＦＡ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?Ｘ４６?ａｎｄ?５１２３??３．３分離病毒ＤＮＡ拷貝數(shù)的測定??應用Ｔａｑｍａｎ實時熒光定量ＰＣＲ的方法檢測ＰＣＶ２分離株Ｘ４６和５１２３的不同代次病??毒ＤＮＡ拷貝數(shù)，進而判斷病毒在細胞中的增殖情況，結果如圖１－３所示，傳代到２０代病??毒拷貝數(shù)趨于穩(wěn)定，ＤＮＡ拷貝數(shù)分別約為：Ｘ４６，２．７８ｘｌ０１Ｑｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ；?５１２３，??２．３?３?ｘ?１?〇９ｃｏｐｉｅｓ／ｍｌ。??

分離株?Ｘ４６?和?５１２３?與?ＧｅｎＢａｎｋ?上的?８?株?ＰＣＶ２?（ＰＣＶ２ａ、ＰＣＶ２ｂ、ＰＣＶ２ｃ?和?ＰＣＶ２ｄ??各２株）全長序列進行比對分析。１０株ＰＣＶ２毒株全基因組序列構建遺傳進化樹，結果如??

【參考文獻】：
期刊論文
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[8]PCR和IFA測定豬圓環(huán)病毒2型半數(shù)細胞培養(yǎng)感染量的比較[J]. 王林山,尹燕博,鄒勇,何錫忠,韓芳婷,倪建平,趙本進,李春華.  上海農業(yè)學報. 2013(01)
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碩士論文
[1]河南PCV2的分離鑒定及Cap蛋白的表達與純化[D]. 趙寶磊.河南農業(yè)大學 2017



本文編號：3303033