肌細胞增強因子2C（myocyte enhancer factor 2C,MEF2C）和肌細胞增強因子2D（myocyte enhancer factor 2D,MEF2D）是肌細胞增強因子2（myocyte enhancer factor 2,MEF2）基因家族的成員,被認為與骨骼肌發(fā)生發(fā)育和再生有關。本研究以貴州省地方品種興義鴨為研究對象,以MEF2C和MEF2D基因為候選基因,利用直接測序方法檢測兩個基因外顯子的多態(tài)性,并與屠宰性狀各指標進行相關性分析,同時構建兩個基因的原核表達載體,以期為興義鴨屠宰性狀的分子標記輔助選育提供依據,為其他畜禽相關基因的研究提供參考,為下一步相關蛋白質功能的研究提供基礎。研究結果如下:1、興義鴨MEF2C和MEF2D基因多態(tài)性與屠宰性狀的關聯性研究。在本試驗群體MEF2C基因外顯子中沒有發(fā)現SNP位點。在MEF2D基因外顯子發(fā)現了6個多態(tài)位點,均為同義突變;群體遺傳學分析顯示,6個多態(tài)位點均表現為中度多態(tài)（0.25<PIC<0.5）,經χ2檢驗表明興義鴨群體在這6個多態(tài)位點均處于Hardy-weinberg平衡狀態(tài)（P>0.05）... 

【文章來源】：貴州大學貴州省 211工程院校

【文章頁數】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1 貴州興義鴨概述
    2 影響畜禽屠宰性狀的候選基因
        2.1 MEF2C基因的研究進展
        2.2 MEF2D基因的研究進展
    3 可變剪接
    4 本研究的目的和意義
第二章 興義鴨MEF2C和MEF2D基因多態(tài)性與屠宰性狀的關聯性研究
    1 試驗材料
        1.1 試驗動物與樣品
        1.2 主要試劑
        1.3 試驗儀器設備
        1.4 主要試劑的配制
    2 試驗方法
        2.1 基因組DNA提取
        2.2 引物設計
        2.3 PCR擴增及測序
        2.4 數據分析
    3 結果與分析
        3.1 MEF2C、MEF2D基因PCR擴增結果
        3.2 測序結果分析
        3.3 多態(tài)位點遺傳多態(tài)性的分析
        3.4 MEF2D多態(tài)性與屠宰性狀相關性分析
    4 討論
    5 小結
第三章 興義鴨MEF2C和MEF2D基因原核表達載體的構建
    1 試驗材料
        1.1 樣品、菌株、載體
        1.2 試驗主要試劑
        1.3 試驗儀器
        1.4 常用試劑配制
    2 試驗方法
        2.1 興義鴨組織總RNA提取
        2.2 cDNA的合成
        2.3 MEF2C和MEF2D基因CDS區(qū)的克隆
        2.4 pET32a(+)-MEF2C、pET32a(+)-MEF2D原核表達載體構建
    3 結果與分析
        3.1 CDS區(qū)擴增產物的PCR檢測結果
        3.2 pUCmT-MEF2C/pMD18-T-MEF2D重組載體的菌液PCR鑒定和測序鑒定
        3.3 pUCmT-MEF2C/pMD18-T-MEF2D重組質粒的雙酶切檢測
        3.4 pET32a(+)-MEF2C/MEF2D重組載體的構建
        3.5 MEF2C和MEF2D基因CDS區(qū)的稀有密碼子分析
    4 討論
    5 小結
第四章 興義鴨MEF2C和MEF2D基因原核表達
    1 實驗材料
        1.1 實驗樣品
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器設備
        1.4 主要試劑的配制
    2 實驗方法
        2.1 重組質粒轉入BL21(DE3)感受態(tài)細胞
        2.2 總蛋白的提取
        2.3 蛋白樣品變性處理
        2.4 SDS-PAGE凝膠電泳
        2.5 重組蛋白的Western Blot檢測
    3 結果與分析
        3.1 重組載體和空載體轉入BL21(DE3)感受態(tài)的酶切檢測
        3.2 重組蛋白的表達形式
        3.3 重組蛋白western blot的檢測
    4 討論
    5 小結
第五章 結論與展望
    1 結論
    2 展望
參考文獻
致謝
附錄


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[8]小體型北京鴨屠宰性能及其相關基因遺傳多態(tài)性研究[D]. 吳豪.中國農業(yè)科學院 2014
[9]新疆卡拉庫爾羊TNF-α基因的克隆、原核表達及抗原性分析[D]. 賀艷艷.塔里木大學 2012
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本文編號：3300405