本研究以無(wú)角道賽特和小尾寒羊雜交二代羊橫交固定后代羊?yàn)樵囼?yàn)對(duì)象，采用飼養(yǎng)試驗(yàn)、消化代謝試驗(yàn)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法，檢測(cè)添加過(guò)瘤胃蛋氨酸對(duì)肉羊生產(chǎn)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率以及IGF-1mRNA表達(dá)量的影響。本試驗(yàn)采用單因素多水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)，隨機(jī)選取56只四月齡、體重25±1.09kg左右、健康無(wú)疾病的試驗(yàn)羊。隨機(jī)分為4組：對(duì)照組、低量組、中量組和高量組，每組14只，其中公羊6只、母羊8只。分別在各組日糧中按每日每只添加0g、3g、6g、9g過(guò)瘤胃蛋氨酸。先進(jìn)行15天預(yù)飼，再進(jìn)行56天飼養(yǎng)試驗(yàn)。飼養(yǎng)試驗(yàn)期間，每15天空腹稱(chēng)重一次。在飼養(yǎng)試驗(yàn)后期每組隨機(jī)選取4只羊進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)。該試驗(yàn)采取全收糞法，利用代謝籠進(jìn)行試驗(yàn)。預(yù)飼期4天，正式期3天，每日稱(chēng)重糞樣、剩料，并記錄。試驗(yàn)結(jié)束后，采集試驗(yàn)羊肝臟數(shù)小塊（1g左右）以用于基因表達(dá)量檢測(cè)。在試驗(yàn)室利用常規(guī)方法檢測(cè)所采糞樣、料樣的粗蛋白（CP）、粗脂肪（EE）、鈣（Ca）、磷（P）以及干物質(zhì)（DM）含量，用濾袋技術(shù)測(cè)量中性/酸性洗滌纖維（NDF/ADF）的方法測(cè)量NDF、ADF的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明：就公母綜合效果看，3g/d·只組體增重、日增重最佳... 

【文章來(lái)源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

綿羊總RNA電泳結(jié)果

A B M圖 2 RT-PCR 產(chǎn)物電泳檢測(cè)圖ophoresis of IGF-1and GAPDH PA 為 GAPDH 基因擴(kuò)增產(chǎn)物；B 為 I RT-PCR products of GAPDH.; B, RT-P隆測(cè)序結(jié)果后，經(jīng)過(guò)連接轉(zhuǎn)化培養(yǎng)并比對(duì)結(jié)果如圖 3 所示，APDH 基因擴(kuò)增片段與的片段，比對(duì)結(jié)果如圖 綿羊 IGF-1 基因測(cè)序結(jié)果與源序 IGF-1cDNA sequence amplified

A B M圖 2 RT-PCR 產(chǎn)物電泳檢測(cè)圖Fig. 2. Electrophoresis of IGF-1and GAPDH PCR products.M 為 DNA Marker；A 為 GAPDH 基因擴(kuò)增產(chǎn)物；B 為 IGF-1 基因擴(kuò)增產(chǎn)物；M, DNA Marker; A, RT-PCR products of GAPDH.; B, RT-PCR products of IGF-1.3 IGF-1 及 GAPDH 基因克隆測(cè)序結(jié)果將PCR產(chǎn)物凝膠回收純化后，經(jīng)過(guò)連接轉(zhuǎn)化培養(yǎng)并在PCR鑒定后測(cè)序，用件比對(duì)源序列與測(cè)序結(jié)果，比對(duì)結(jié)果如圖 3 所示，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：IGF-1 基因擴(kuò)源序列的同源性為 100%，GAPDH 基因擴(kuò)增片段與源序列的同源性為 100 PCR 擴(kuò)增片段為特異的目的片段，比對(duì)結(jié)果如圖 4 所示。源序列400bp100bp

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]賴(lài)氨酸對(duì)綿羊GHR和IGF-1基因表達(dá)調(diào)控的影響[D]. 李建升.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
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本文編號(hào)：3299971