豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是以懷孕母豬繁殖障礙和豬呼吸系統(tǒng)疾病為特征的傳染性疾病。PRRSV具有較強(qiáng)的變異性，亞洲許多國家和地區(qū)均出現(xiàn)了高致病性的美洲型PRRSV，而且東歐地區(qū)也出出現(xiàn)了致病力和傳染性力更強(qiáng)的歐洲型毒株。隨著PRRSV的傳播打破原有的地域限制，中國不僅存在高致病性美洲型PRRSV，同時(shí)也出現(xiàn)了歐洲型PRRSV，導(dǎo)致該病的防控更加復(fù)雜。為了更好的防控歐洲型PRRSV，本研究以歐洲型代表株LV株ORF3、ORF5基因?yàn)檠芯繉ο�，�?gòu)建了ORF3和ORF5基因的原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a-ORF3、pGEX-4T-ORF5和3個(gè)重組真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX-ORF3、pVAX-ORF5和pVAX-ORF3-ORF5，并對其表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行小鼠及豬的免疫評價(jià)。將LV株ORF3、ORF5基因分別構(gòu)建了原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a-ORF3、pGEX-4T-ORF5，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，顯示目的蛋白能夠以包涵體形式正確表達(dá)。免疫印跡實(shí)驗(yàn)表明，目的蛋白均具有良好的反應(yīng)原性。ORF3和ORF5亞單位疫苗免疫仔豬實(shí)驗(yàn)表明，ORF3和ORF5蛋白均能刺激仔豬產(chǎn)生特異性抗體。細(xì)胞因子水平方面能誘導(dǎo)機(jī)... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 豬繁殖與呼吸綜合征研究進(jìn)展
        1 PRRSV 研究進(jìn)展
        2 PRRSV 的流行病學(xué)
        3 致病機(jī)制研究
        4 PRRSV 免疫學(xué)研究進(jìn)展
        5 PRRSV 疫苗的研究進(jìn)展
        6 本研究的目的與意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 歐洲型 PRRSV ORF3 和 ORF5 基因的原核表達(dá)及亞單位疫苗制備
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 結(jié)果與分析
        4 討論
        5 小結(jié)
    第二章 核酸疫苗的構(gòu)建及小鼠免疫試驗(yàn)
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 結(jié)果與分析
        4 討論
        5 小結(jié)
    第三章 核酸疫苗和亞單位疫苗的豬免疫試驗(yàn)研究
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 結(jié)果與分析
        4 討論
        5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗研究進(jìn)展[J]. 吳佳俊,遇秀玲,蔣桃珍,田克恭.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2010(08)
[2]高致病性PRRSV Nsp2變異株P(guān)ower SYBR Green real time RT-PCR檢測方法的建立[J]. 郭楊,陳世界,林華,郭萬柱,徐志文,顏其貴.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2009(05)
[3]豬繁殖與呼吸綜合征和豬2型圓環(huán)病毒病二聯(lián)核酸疫苗的構(gòu)建及其免疫效力[J]. 隋慧,楊金生.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(11)
[4]豬繁殖與呼吸綜合征病毒HB-3（cz）株ORF5基因序列分析及原核表達(dá)[J]. 劉濤,陳賽娟,曹洪戰(zhàn),劉子偉,朱子杰,蘇霞,孫繼國.  中國獸醫(yī)雜志. 2008(12)
[5]豬繁殖與呼吸綜合征病毒M蛋白介導(dǎo)的E蛋白假型鼠白血病病毒的構(gòu)建[J]. 夏平安,黨占國,周斌,陳溥言,崔保安,邱璜,盧高峰.  病毒學(xué)報(bào). 2008(05)
[6]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分離鑒定及其分子流行病學(xué)分析[J]. 童光志,周艷君,郝曉芳,田志軍,仇華吉,彭金美,安同慶.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2007(05)
[7]豬生殖與呼吸綜合征病毒HN6株ORF5基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)[J]. 郭愛英,吳發(fā)興,陳杰,鄭喜邦,李曉成,張燕霞,黃保續(xù).  中國獸醫(yī)科學(xué). 2007(04)
[8]表達(dá)PRRSV M蛋白重組腺病毒的構(gòu)建及其免疫特性研究[J]. 湯景元,姜平,蔣文明,馬蘇,李玉峰.  中國病毒學(xué). 2005(06)
[9]豬繁殖和呼吸綜合征組織滅活苗的研制[J]. 趙坤,張慧輝,郭東升.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2005(07)
[10]豬生殖與呼吸綜合征ORF5基因疫苗的構(gòu)建及其安全性和免疫原性檢測[J]. 程安春,汪銘書,希尼尼根,豆文波,陳希文,陳孝躍.  中國獸醫(yī)科技. 2005(01)



本文編號：3299932