歐洲型PRRSV基因工程疫苗的構建及其實驗免疫研究
發(fā)布時間:2021-07-23 19:54
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是以懷孕母豬繁殖障礙和豬呼吸系統(tǒng)疾病為特征的傳染性疾病。PRRSV具有較強的變異性,亞洲許多國家和地區(qū)均出現(xiàn)了高致病性的美洲型PRRSV,而且東歐地區(qū)也出出現(xiàn)了致病力和傳染性力更強的歐洲型毒株。隨著PRRSV的傳播打破原有的地域限制,中國不僅存在高致病性美洲型PRRSV,同時也出現(xiàn)了歐洲型PRRSV,導致該病的防控更加復雜。為了更好的防控歐洲型PRRSV,本研究以歐洲型代表株LV株ORF3、ORF5基因為研究對象,構建了ORF3和ORF5基因的原核表達質粒pET-28a-ORF3、pGEX-4T-ORF5和3個重組真核表達質粒pVAX-ORF3、pVAX-ORF5和pVAX-ORF3-ORF5,并對其表達產物進行小鼠及豬的免疫評價。將LV株ORF3、ORF5基因分別構建了原核表達質粒pET-28a-ORF3、pGEX-4T-ORF5,經IPTG誘導表達,顯示目的蛋白能夠以包涵體形式正確表達。免疫印跡實驗表明,目的蛋白均具有良好的反應原性。ORF3和ORF5亞單位疫苗免疫仔豬實驗表明,ORF3和ORF5蛋白均能刺激仔豬產生特異性抗體。細胞因子水平方面能誘導機...
【文章來源】:吉林農業(yè)大學吉林省
【文章頁數】:73 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
第一章 豬繁殖與呼吸綜合征研究進展
1 PRRSV 研究進展
2 PRRSV 的流行病學
3 致病機制研究
4 PRRSV 免疫學研究進展
5 PRRSV 疫苗的研究進展
6 本研究的目的與意義
第二篇 研究內容
第一章 歐洲型 PRRSV ORF3 和 ORF5 基因的原核表達及亞單位疫苗制備
1 實驗材料
2 實驗方法
3 結果與分析
4 討論
5 小結
第二章 核酸疫苗的構建及小鼠免疫試驗
1 實驗材料
2 實驗方法
3 結果與分析
4 討論
5 小結
第三章 核酸疫苗和亞單位疫苗的豬免疫試驗研究
1 實驗材料
2 實驗方法
3 結果與分析
4 討論
5 小結
結論
參考文獻
作者簡介
附錄
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗研究進展[J]. 吳佳俊,遇秀玲,蔣桃珍,田克恭. 中國預防獸醫(yī)學報. 2010(08)
[2]高致病性PRRSV Nsp2變異株Power SYBR Green real time RT-PCR檢測方法的建立[J]. 郭楊,陳世界,林華,郭萬柱,徐志文,顏其貴. 中國獸醫(yī)科學. 2009(05)
[3]豬繁殖與呼吸綜合征和豬2型圓環(huán)病毒病二聯(lián)核酸疫苗的構建及其免疫效力[J]. 隋慧,楊金生. 安徽農業(yè)科學. 2009(11)
[4]豬繁殖與呼吸綜合征病毒HB-3(cz)株ORF5基因序列分析及原核表達[J]. 劉濤,陳賽娟,曹洪戰(zhàn),劉子偉,朱子杰,蘇霞,孫繼國. 中國獸醫(yī)雜志. 2008(12)
[5]豬繁殖與呼吸綜合征病毒M蛋白介導的E蛋白假型鼠白血病病毒的構建[J]. 夏平安,黨占國,周斌,陳溥言,崔保安,邱璜,盧高峰. 病毒學報. 2008(05)
[6]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分離鑒定及其分子流行病學分析[J]. 童光志,周艷君,郝曉芳,田志軍,仇華吉,彭金美,安同慶. 中國預防獸醫(yī)學報. 2007(05)
[7]豬生殖與呼吸綜合征病毒HN6株ORF5基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達[J]. 郭愛英,吳發(fā)興,陳杰,鄭喜邦,李曉成,張燕霞,黃保續(xù). 中國獸醫(yī)科學. 2007(04)
[8]表達PRRSV M蛋白重組腺病毒的構建及其免疫特性研究[J]. 湯景元,姜平,蔣文明,馬蘇,李玉峰. 中國病毒學. 2005(06)
[9]豬繁殖和呼吸綜合征組織滅活苗的研制[J]. 趙坤,張慧輝,郭東升. 安徽農業(yè)科學. 2005(07)
[10]豬生殖與呼吸綜合征ORF5基因疫苗的構建及其安全性和免疫原性檢測[J]. 程安春,汪銘書,希尼尼根,豆文波,陳希文,陳孝躍. 中國獸醫(yī)科技. 2005(01)
本文編號:3299932
【文章來源】:吉林農業(yè)大學吉林省
【文章頁數】:73 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
第一章 豬繁殖與呼吸綜合征研究進展
1 PRRSV 研究進展
2 PRRSV 的流行病學
3 致病機制研究
4 PRRSV 免疫學研究進展
5 PRRSV 疫苗的研究進展
6 本研究的目的與意義
第二篇 研究內容
第一章 歐洲型 PRRSV ORF3 和 ORF5 基因的原核表達及亞單位疫苗制備
1 實驗材料
2 實驗方法
3 結果與分析
4 討論
5 小結
第二章 核酸疫苗的構建及小鼠免疫試驗
1 實驗材料
2 實驗方法
3 結果與分析
4 討論
5 小結
第三章 核酸疫苗和亞單位疫苗的豬免疫試驗研究
1 實驗材料
2 實驗方法
3 結果與分析
4 討論
5 小結
結論
參考文獻
作者簡介
附錄
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗研究進展[J]. 吳佳俊,遇秀玲,蔣桃珍,田克恭. 中國預防獸醫(yī)學報. 2010(08)
[2]高致病性PRRSV Nsp2變異株Power SYBR Green real time RT-PCR檢測方法的建立[J]. 郭楊,陳世界,林華,郭萬柱,徐志文,顏其貴. 中國獸醫(yī)科學. 2009(05)
[3]豬繁殖與呼吸綜合征和豬2型圓環(huán)病毒病二聯(lián)核酸疫苗的構建及其免疫效力[J]. 隋慧,楊金生. 安徽農業(yè)科學. 2009(11)
[4]豬繁殖與呼吸綜合征病毒HB-3(cz)株ORF5基因序列分析及原核表達[J]. 劉濤,陳賽娟,曹洪戰(zhàn),劉子偉,朱子杰,蘇霞,孫繼國. 中國獸醫(yī)雜志. 2008(12)
[5]豬繁殖與呼吸綜合征病毒M蛋白介導的E蛋白假型鼠白血病病毒的構建[J]. 夏平安,黨占國,周斌,陳溥言,崔保安,邱璜,盧高峰. 病毒學報. 2008(05)
[6]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒的分離鑒定及其分子流行病學分析[J]. 童光志,周艷君,郝曉芳,田志軍,仇華吉,彭金美,安同慶. 中國預防獸醫(yī)學報. 2007(05)
[7]豬生殖與呼吸綜合征病毒HN6株ORF5基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達[J]. 郭愛英,吳發(fā)興,陳杰,鄭喜邦,李曉成,張燕霞,黃保續(xù). 中國獸醫(yī)科學. 2007(04)
[8]表達PRRSV M蛋白重組腺病毒的構建及其免疫特性研究[J]. 湯景元,姜平,蔣文明,馬蘇,李玉峰. 中國病毒學. 2005(06)
[9]豬繁殖和呼吸綜合征組織滅活苗的研制[J]. 趙坤,張慧輝,郭東升. 安徽農業(yè)科學. 2005(07)
[10]豬生殖與呼吸綜合征ORF5基因疫苗的構建及其安全性和免疫原性檢測[J]. 程安春,汪銘書,希尼尼根,豆文波,陳希文,陳孝躍. 中國獸醫(yī)科技. 2005(01)
本文編號:3299932
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