傳染性法氏囊病病毒（IBDV）是屬于Birnaviridae家族的雙鏈RNA病毒。自噬是真核細(xì)胞的死亡方式之一。有研究表明,IBDV可以引起DF-1細(xì)胞自噬,但其具體機(jī)制仍有待研究。MDA5為模式識(shí)別受體家族中的一員,能夠特異性識(shí)別雙鏈RNA病毒。課題組前期研究顯示,IBDV能夠激活雛雞法氏囊內(nèi)雞MDA5（chMDA5）信號(hào)通路,參與IBDV感染雛雞過(guò)程。因此,本試驗(yàn)以IBDV為致病原,雞胚成纖維細(xì)胞（CEF）為研究對(duì)象,對(duì)MDA5與IBDV引起的自噬之間的關(guān)系進(jìn)行研究,進(jìn)一步揭示IBDV致病機(jī)制。首先,將雙鏈RNA病毒模擬物poly（I:C）轉(zhuǎn)染至CEF,采用Western blot方法對(duì)CEF內(nèi)chMDA5蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)poly（I:C）轉(zhuǎn)染能夠引起CEF內(nèi)chMDA5的表達(dá)升高。之后將CEF分為對(duì)照組、poly（I:C）組、chMDA5 siRNA+poly（I:C）組、Rapa+poly（I:C）組、3-MA+poly（I:C）組,采用Western blot方法對(duì)細(xì)胞內(nèi)自噬標(biāo)志蛋白LC3表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示chMDA5介導(dǎo)poly（I:C）引起CEF的自噬,并且... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

IBDV的PCR鑒定100bp

37注：a)：正常對(duì)照組；b)：IBDV 感染組；c)、d)：chMDA5 siRNA+IBDV 組。A：自噬體；M：線粒體；N：細(xì)胞核。Note: a): control group; b): IBDV infection group; c), d): chMDA5 siRNA+IBDV group.A: autophagosome;M: mitochondria; N: nucleus.圖 3-14 CEF 超微病理學(xué)變化Fig. 3-14 CEF ultramicropathological changes

-18T 載體連接后的產(chǎn)物，轉(zhuǎn)化進(jìn)行測(cè)序分析，經(jīng)軟件分析獲粒構(gòu)建成功。量 PCR 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制粒 T-IBDV VP2 濃度為 273.4 n 6.1×1010（拷貝數(shù)/μL）。故×104、6.1×103、6.1×102，即反1.22×105、1.22×104。進(jìn)行 PC反應(yīng)對(duì)應(yīng)的 Ct 值分別為 12.04，曲線中只有一個(gè)峰值，表明目圖 3-16 IBDV VP2 引物的鑒定6 Identification of IBDV VP2 pr

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]番鴨呼腸孤病毒感染誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的研究[J]. 吳異健,崔龍萍,黃詩(shī)杭,王全溪,吳曉平,周五朵,朱二鵬,黃一帆,吳寶成.  病毒學(xué)報(bào). 2017(02)
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碩士論文
[1]雞MDA5信號(hào)通路在IBDV致雛雞法氏囊病理?yè)p傷中的作用研究[D]. 欒亞男.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]雞TLR3信號(hào)通路在IBDV致雛雞法氏囊免疫損傷中的作用研究[D]. 趙霞.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]雞傳染性法氏囊病病毒主要結(jié)構(gòu)蛋白的克隆與表達(dá)[D]. 朱彩霞.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3294929