葡萄球菌腸毒素（SEs）作為超抗原能促進淋巴細胞增殖，引起機體廣泛的炎癥反應(yīng)。腸毒素作用迅速、產(chǎn)生炎癥能力強，暗示其可能影響先天免疫應(yīng)答機制介導(dǎo)適應(yīng)性免疫，促進炎癥的產(chǎn)生。Toll樣受體（TLRs）作為先天免疫模式識別受體，在先天性早期抗感染、炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫中有重要作用，但TLRs對葡萄球菌腸毒素刺激的應(yīng)答反應(yīng)尚不清楚。本文研究了重組葡萄球菌腸毒素對豬先天性免疫分子TLR轉(zhuǎn)錄表達、其介導(dǎo)的炎癥因子表達的影響，以探討腸毒素引發(fā)先天免疫應(yīng)答的分子機制，主要研究結(jié)果如下：應(yīng)用RT-PCR方法從豬肺泡巨噬細胞中克隆了8種Toll樣受體（TLR1、2、4、5、6、8、9、10）全基因，利用生物信息學(xué)技術(shù)分析其單核苷酸多態(tài)性（SNPs）和氨基酸功能區(qū)，預(yù)測TLR蛋白高級結(jié)構(gòu)及其配體識別域，從結(jié)構(gòu)角度分析突變氨基酸對TLR功能的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)TLR基因序列具有個體差異性和種屬特異性，其非同義突變主要位于胞外區(qū)，推測其病原識別具有多樣性。預(yù)測的8種TLR分子均為I型跨膜蛋白，胞外區(qū)富含亮氨酸重復(fù)序列（LRRs）；二級結(jié)構(gòu)主要由α-螺旋、β-折疊組成；TLR單體和二聚體分別為馬蹄形和“M”形。... 

【文章來源】：天津大學(xué)天津市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 葡萄球菌腸毒素超抗原
        1.1.1 葡萄球菌腸毒素簡介
        1.1.2 葡萄球菌腸毒的生物活性
        1.1.3 腸毒素超抗原作用的分子機制
        1.1.4 腸毒素的臨床致病性
    1.2 先天免疫反應(yīng)與獲得性免疫的橋梁——Toll 樣受體
        1.2.1 先天免疫模式識別受體
        1.2.2 Toll 樣受體種類及其特異性配體
        1.2.3 Toll 樣受體的結(jié)構(gòu)
        1.2.4 Toll 樣受體的信號傳導(dǎo)途徑
    1.3 葡萄球菌腸毒素引發(fā)的炎癥反應(yīng)
        1.3.1 腸毒素介導(dǎo)的先天免疫促炎反應(yīng)
        1.3.2 腸毒素介導(dǎo)的先天-后天免疫及其致炎癥作用
        1.3.3 腸毒素超抗原導(dǎo)致的炎癥后果
    1.4 本課題的研究目的及意義
        1.4.1 研究目的、意義
        1.4.2 研究內(nèi)容
第二章 豬先天免疫模式識別受體——Toll 樣受體的克隆與分析
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 RT-PCR 擴增結(jié)果及鑒定
        2.3.2 豬 Toll 樣受體序列分析及關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域預(yù)測
        2.3.3 豬 Toll 樣受體單核苷酸多態(tài)性分析
        2.3.4 豬 Toll 樣受體氨基酸同源性及遺傳演化分析
        2.3.5 豬 Toll 樣受體高級結(jié)構(gòu)預(yù)測
    2.4 討論
        2.4.1 豬 TLRs 單核苷酸多態(tài)性（SNPs）與免疫
        2.4.2 豬 TLRs 結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系
    2.5 小結(jié)
第三章 豬先天免疫相關(guān)分子熒光定量 PCR 檢測方法的建立
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 方法
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 熒光定量 PCR 的特異性分析
        3.3.2 熒光定量 PCR 的敏感性分析
        3.3.3 熒光定量 PCR 的重復(fù)性分析
        3.3.4 熒光定量 PCR 條件優(yōu)化
        3.3.5 熒光定量 PCR 擴增曲線及溶解度曲線
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 重組葡萄球菌腸毒素對豬先天免疫相關(guān)分子轉(zhuǎn)錄表達的影響
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 方法
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 腸毒素促進 T 淋巴細胞增殖實驗
        4.3.2 腸毒素體外刺激先天免疫相關(guān)分子 mRNA 的轉(zhuǎn)錄變化
        4.3.3 腸毒素對豬腸道炎癥反應(yīng)的影響
        4.3.4 腸毒素體內(nèi)刺激實驗
        4.3.5 腸毒素刺激炎癥相關(guān)細胞因子表達的變化
    4.4 討論
        4.4.1 重組腸毒素的先天促炎性作用
        4.4.2 重組腸毒素的超抗原活性
    4.5 小結(jié)
第五章 結(jié)論
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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