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延邊黑熊源鏈球菌的分離鑒定及PCR診斷方法的建立

發(fā)布時(shí)間:2021-06-28 11:41
  鏈球菌。⊿treptocosis)主要是由β溶血性鏈球菌引起的多種人獸共患病的總稱。動(dòng)物鏈球菌病中主要以豬、牛、羊、馬、雞較為常見。近幾年來,水貂、牦牛、兔和魚類也有發(fā)生鏈球菌病的報(bào)道。人鏈球菌病以猩紅熱為多見。鏈球菌病的臨診表現(xiàn)中存在多樣性,在病理變化過程中能夠引起化膿創(chuàng)和菌血癥,也可引起局部感染。鏈球菌的種類繁多,在自然界分布廣泛,主要通過呼吸道和空氣傳播,其次也可通過損傷的皮膚感染傳播,主要引起大葉性肺炎、支氣管炎腦膜炎、化膿性關(guān)節(jié)炎、敗血癥等,能產(chǎn)生多種外毒素和酶,可溶解紅細(xì)胞,對(duì)動(dòng)物有致死作用。有資料顯示,鏈球菌引起的上述疾病時(shí)有發(fā)生,可感染人、家畜、花鯨、狐等野生動(dòng)物,在生后數(shù)日內(nèi)的幼兒或幼齡動(dòng)物大多數(shù)因腦膜炎死亡率較高,造成的經(jīng)濟(jì)損失不可估量。近幾年來,鏈球菌病在延邊州的豬及其他動(dòng)物的流行區(qū)域逐漸擴(kuò)大,發(fā)病率和感染率不斷上升,當(dāng)今已成為嚴(yán)重威脅延邊畜牧業(yè)發(fā)展的重要疫病之一,因此,分離鏈球菌本地株、建立檢測(cè)方法以及疫苗的研究等是十分必要的。為了分離鑒定黑熊鏈球菌延邊株,以及預(yù)防鏈球菌在該區(qū)養(yǎng)熊業(yè)的流行,本試驗(yàn)利用發(fā)病死亡熊病料成功分離出三株致病菌,并應(yīng)用H202試驗(yàn)、奧譜... 

【文章來源】:延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
    1 鏈球菌的流行病學(xué)
    2 鏈球菌菌體的病原學(xué)研究
    3 鏈球菌的生物學(xué)特性
    4 鏈球菌的分類
    5 免疫原性
        5.1 致病性物質(zhì)
        5.2 外毒素類
        5.3 免疫原性
    6 防治原則
    7 鏈球菌所致的疾病
    8 鏈球菌的感染機(jī)理研究
    9 鏈球菌病診斷方法研究
        9.1 病原學(xué)診斷
        9.2 血清學(xué)診斷方法
        9.3 分子生物學(xué)診斷
    10 鏈球菌病的防治措施
    11 本課題研究的目的及意義
材料與方法
    1 材料
        1.1 樣本及菌株
        1.2 質(zhì)粒、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、細(xì)胞
        1.3 主要購(gòu)買酶、試劑及其它配制的試劑
        1.4 主要儀器
        1.5 溶液及培養(yǎng)基
    2 方法
        2.1 延邊黑熊源鏈球菌菌株的分離和鑒定
        2.2 16SrRNA通用引物的設(shè)計(jì)與合成
        2.3 細(xì)菌的分離培養(yǎng)
        2.4 細(xì)菌的純培養(yǎng)
        2.5 細(xì)菌基因組總DNA的提取
        2.6 16SrRNA PCR擴(kuò)增
        2.7 核苷酸序列的測(cè)定與分析
        2.8 熊源鏈球菌特異性PCR診斷方法的建立
結(jié)果
    1 培養(yǎng)基上菌落的生長(zhǎng)情況
    2 過氧化氫(H_2O_2)試驗(yàn)鑒定結(jié)果
    3 奧譜托欣試驗(yàn)、膽汁溶菌試驗(yàn)及生化試驗(yàn)結(jié)果
    4 各種細(xì)菌的涂片染色鏡檢
    5 16SrRAN PCR的擴(kuò)增
    6 PCR診斷方法基因擴(kuò)增
    7 克隆質(zhì)粒的PCR鑒定
    8 PCR診斷方法的特異性試驗(yàn)
    9 靈敏度檢測(cè)結(jié)果
    10 PCR擴(kuò)增的序列分析
    11 熊源鏈球菌的分子分型
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
碩士期間發(fā)表并參與的論文


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]人—感染豬鏈球菌病患者心理狀態(tài)分析及護(hù)理對(duì)策[J]. 萬彬,呂春容.  華西醫(yī)學(xué). 2009(06)
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[7]系統(tǒng)發(fā)育分析中檢測(cè)數(shù)據(jù)不相合性的方法[J]. 田穎,卜文俊.  動(dòng)物分類學(xué)報(bào). 2007(02)
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本文編號(hào):3254255

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