羊呂氏泰勒蟲與嗜吞噬細(xì)胞無漿體雙重PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用
發(fā)布時(shí)間:2021-06-22 15:50
羊泰勒蟲。∣vine Theileriosis)是由寄生在綿羊和山羊紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞或巨噬細(xì)胞內(nèi)的泰勒科(Theileriidae)泰勒屬(Theileria)的血液寄生原蟲引起的一類疾病的總稱;無漿體。ˋnaplasmosis)是由無漿體科(Anaplasmataceae)無漿體(Anaplasma)屬病原寄生于人和動(dòng)物血細(xì)胞內(nèi)引起的蜱傳性血液立克次體病。羊泰勒蟲病和無漿體病均屬于蜱傳性疾病,引起人和動(dòng)物極為類似的高熱、貧血、黃疸和消瘦等臨床癥狀,嚴(yán)重感染時(shí)可導(dǎo)致死亡。呂氏泰勒蟲(T.luwenshuni)是一種惡性羊泰勒蟲,具有很強(qiáng)的致病性;嗜吞噬細(xì)胞無漿體(A.phagocytophilum,AP)作為一種人獸共患病病原,嚴(yán)重威脅著人和動(dòng)物的健康,臨床常見兩種病原混合感染。目前,針對(duì)這兩種病原的檢測(cè)主要是常規(guī)PCR方法,但一次僅限于一種特定病原的檢查,而在臨床應(yīng)用中耗費(fèi)人力物力。迄今為止,關(guān)于同時(shí)檢測(cè)T.luwenshuni和AP的PCR診斷方法,未見報(bào)道。本研究旨在建立一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好的雙重PCR檢測(cè)方法,以期能夠同時(shí)檢測(cè)T.luwenshuni和AP,為兩...
【文章來源】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
血液涂片姬姆薩染色結(jié)果
取的DNA無蛋白和RNA污染,將標(biāo)模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。系及條件對(duì)2次采集的羊血樣品分性和穩(wěn)定性。 3 日、2015 年 7 月 13 日、2015 年共 76 份羊血液 DNA 樣品,利用法對(duì) 76 份樣品進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,檢測(cè)結(jié)果通過雙向測(cè)序,比對(duì)基因物T.lu7F/T.lu7R擴(kuò)增,得到約962
2.2 PCR 反應(yīng)體系及反應(yīng)條件(1)LATaq DNAPolymerase 最佳量為0.25 μL。由電泳圖結(jié)果可知,酶含量過低影響合成產(chǎn)物量,當(dāng)超過0.25 μL時(shí),PCR擴(kuò)增效果基本一致,即最佳量為0.25 μL,見圖3-2。圖 3-1 PCR 擴(kuò)增結(jié)果M:DL2000 DNA Marker; 1-2. 樣品; 3. 陽性對(duì)照;4. 陰性對(duì)照Fig. 3-1 The results of PCRM: DL2000 DNA Marker; 1-2. Samples;3. Positive control;4. Negative control
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羊泰勒蟲病的流行、檢測(cè)及其防控措施[J]. 李松哲. 飼料博覽. 2017(11)
[2]羊泰勒蟲病的診治[J]. 王麗華,張輝,丁春艷. 畜禽業(yè). 2017(10)
[3]羊無形體病的臨床癥狀、剖檢變化、診斷及其防治[J]. 木拉力·阿力甫汗. 現(xiàn)代畜牧科技. 2017(10)
[4]羊泰勒蟲病的防治[J]. 劉永梅. 畜牧獸醫(yī)科學(xué)(電子版). 2017(07)
[5]羊泰勒蟲病二溫式PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 田萬年,薛書江,賈立軍,張守發(fā). 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2017(06)
[6]羊泰勒蟲熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 田萬年,李國(guó)江,薛書江,賈立軍,張守發(fā). 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(05)
[7]羊泰勒蟲病的臨床癥狀、診斷和防治措施[J]. 程雪. 現(xiàn)代畜牧科技. 2017(01)
[8]羊血液原蟲病防治措施[J]. 吉寶蟬. 中獸醫(yī)學(xué)雜志. 2016(05)
[9]羊泰勒蟲病的臨床癥狀、診斷與防治[J]. 王娟. 現(xiàn)代畜牧科技. 2016(07)
[10]羊焦蟲病的臨床癥狀與防控方法[J]. 王金合,趙金玲. 浙江畜牧獸醫(yī). 2016(02)
博士論文
[1]我國(guó)羊泰勒蟲的生物學(xué)特性研究[D]. 李有全.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
碩士論文
[1]新疆南疆綿羊的泰勒蟲感染情況及種類鑒定[D]. 王海國(guó).塔里木大學(xué) 2017
[2]新疆南疆綿羊無漿體流行病學(xué)調(diào)查及分析[D]. 張晶.塔里木大學(xué) 2017
[3]羊血液、羊奶中無漿體分子流行病學(xué)調(diào)查及遺傳鑒定[D]. 呂亞莉.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]嗜吞噬細(xì)胞無漿體和牛無漿體LAMP檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[D]. 王金鴻.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[5]綿羊無漿體和牛無漿體實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 遲慶安.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]羊無漿體PCR診斷方法建立及分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 張菲菲.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[7]我國(guó)部分地區(qū)羊球蟲種類及梨形蟲病分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 衛(wèi)九健.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[8]我國(guó)部分地區(qū)羊梨形蟲病PCR檢測(cè)方法建立及分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 朱丹.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[9]羊梨形蟲核糖體RNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列的測(cè)定及反向線狀印跡技術(shù)的建立[D]. 牛慶麗.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào):3243117
【文章來源】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
血液涂片姬姆薩染色結(jié)果
取的DNA無蛋白和RNA污染,將標(biāo)模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。系及條件對(duì)2次采集的羊血樣品分性和穩(wěn)定性。 3 日、2015 年 7 月 13 日、2015 年共 76 份羊血液 DNA 樣品,利用法對(duì) 76 份樣品進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增,檢測(cè)結(jié)果通過雙向測(cè)序,比對(duì)基因物T.lu7F/T.lu7R擴(kuò)增,得到約962
2.2 PCR 反應(yīng)體系及反應(yīng)條件(1)LATaq DNAPolymerase 最佳量為0.25 μL。由電泳圖結(jié)果可知,酶含量過低影響合成產(chǎn)物量,當(dāng)超過0.25 μL時(shí),PCR擴(kuò)增效果基本一致,即最佳量為0.25 μL,見圖3-2。圖 3-1 PCR 擴(kuò)增結(jié)果M:DL2000 DNA Marker; 1-2. 樣品; 3. 陽性對(duì)照;4. 陰性對(duì)照Fig. 3-1 The results of PCRM: DL2000 DNA Marker; 1-2. Samples;3. Positive control;4. Negative control
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羊泰勒蟲病的流行、檢測(cè)及其防控措施[J]. 李松哲. 飼料博覽. 2017(11)
[2]羊泰勒蟲病的診治[J]. 王麗華,張輝,丁春艷. 畜禽業(yè). 2017(10)
[3]羊無形體病的臨床癥狀、剖檢變化、診斷及其防治[J]. 木拉力·阿力甫汗. 現(xiàn)代畜牧科技. 2017(10)
[4]羊泰勒蟲病的防治[J]. 劉永梅. 畜牧獸醫(yī)科學(xué)(電子版). 2017(07)
[5]羊泰勒蟲病二溫式PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用[J]. 田萬年,薛書江,賈立軍,張守發(fā). 中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2017(06)
[6]羊泰勒蟲熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 田萬年,李國(guó)江,薛書江,賈立軍,張守發(fā). 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(05)
[7]羊泰勒蟲病的臨床癥狀、診斷和防治措施[J]. 程雪. 現(xiàn)代畜牧科技. 2017(01)
[8]羊血液原蟲病防治措施[J]. 吉寶蟬. 中獸醫(yī)學(xué)雜志. 2016(05)
[9]羊泰勒蟲病的臨床癥狀、診斷與防治[J]. 王娟. 現(xiàn)代畜牧科技. 2016(07)
[10]羊焦蟲病的臨床癥狀與防控方法[J]. 王金合,趙金玲. 浙江畜牧獸醫(yī). 2016(02)
博士論文
[1]我國(guó)羊泰勒蟲的生物學(xué)特性研究[D]. 李有全.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2007
碩士論文
[1]新疆南疆綿羊的泰勒蟲感染情況及種類鑒定[D]. 王海國(guó).塔里木大學(xué) 2017
[2]新疆南疆綿羊無漿體流行病學(xué)調(diào)查及分析[D]. 張晶.塔里木大學(xué) 2017
[3]羊血液、羊奶中無漿體分子流行病學(xué)調(diào)查及遺傳鑒定[D]. 呂亞莉.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]嗜吞噬細(xì)胞無漿體和牛無漿體LAMP檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[D]. 王金鴻.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[5]綿羊無漿體和牛無漿體實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立[D]. 遲慶安.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]羊無漿體PCR診斷方法建立及分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 張菲菲.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[7]我國(guó)部分地區(qū)羊球蟲種類及梨形蟲病分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 衛(wèi)九健.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[8]我國(guó)部分地區(qū)羊梨形蟲病PCR檢測(cè)方法建立及分子流行病學(xué)調(diào)查[D]. 朱丹.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[9]羊梨形蟲核糖體RNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列的測(cè)定及反向線狀印跡技術(shù)的建立[D]. 牛慶麗.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào):3243117
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/dongwuyixue/3243117.html
最近更新
教材專著