豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea,PED）是由豬流行性腹瀉病毒（Epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的各個(gè)不同日齡階段的豬均可發(fā)病的一類急性、高度接觸性腸道傳染病。以哺乳仔豬尤其是3-10日齡仔豬的腹瀉、嘔吐、脫水和高死亡率為主要臨床特征。從1971年被發(fā)現(xiàn)至今已然發(fā)展成為嚴(yán)重影響?zhàn)B豬產(chǎn)業(yè)的重大病毒性傳染病之一。因此,做好豬流行性腹瀉病的防控工作至關(guān)重要。通過(guò)對(duì)吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院疫病檢測(cè)中心近年來(lái)送檢病料的研究分析表明,吉林地區(qū)引起豬腹瀉并致死的病毒性疾病主要包括兩種,即流行性腹瀉（PED）和傳染性胃腸炎（TGE）,且兩種病多數(shù)存在交叉感染。因此,本試驗(yàn)在對(duì)PED的研究基礎(chǔ)上,建立PEDV和TGEV雙重RT-PCR檢測(cè)方法進(jìn)行研究分析。首先用膠體金試劑盒和常規(guī)RT-PCR方法篩選出PED單純感染和PED、TGE雙重感染的陽(yáng)性病料;根據(jù)GeneBank公布的序列的對(duì)比分析,設(shè)計(jì)PEDV和TGEV的引物。目的基因長(zhǎng)度分別為PEDV 223bp,TGEV 832bp。對(duì)建立的雙重RT-PCR方法進(jìn)行多次重復(fù)試驗(yàn),最終摸索出反應(yīng)的最佳條件... 

【文章來(lái)源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

單重PCR最適引物濃度的確定（PEDV）

反應(yīng)條件優(yōu)化，PEDV 擴(kuò)增條帶在引物濃度為 0.85μM/終選擇 0.85μM/L。M 1 2 3圖 1-1 單重 PCR 最適引物濃度的確定（PEDV）ptimal primer concentrations of single P（DL2000DNA Maker）；1：1.0μM/L；2：0.8TGEV 擴(kuò)增條帶在引物濃度為 1μM/L 時(shí) 1μM/L。M 1 2 32

1-3 單重 PCR 最佳退火溫度的確定（PEDV）imal annealing temperature of single PCR2000（DL2000DNA Maker）；1：53℃；2：54℃火溫度在 54℃的條件下，PCR 擴(kuò)增效率為 54℃。M 1 2 3 1-4 單項(xiàng) PCR 最佳退火溫度的確定（TGEV）imal annealing temperature of single PCR2000（DL2000DNA Maker）；1：53℃；2：54℃應(yīng)條件優(yōu)化832b

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬腹瀉三聯(lián)活疫苗席卷全國(guó) 應(yīng)該如何進(jìn)行科學(xué)免疫?[J]. 張金輝.  豬業(yè)科學(xué). 2016(08)
[2]豬傳染性胃腸炎的診治[J]. 周興忠,張金玉.  中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘. 2016(03)
[3]豬傳染性胃腸炎的綜合防治[J]. 郭一學(xué).  湖北畜牧獸醫(yī). 2016(02)
[4]我國(guó)研制成功豬腹瀉三聯(lián)活疫苗[J].   吉林農(nóng)業(yè). 2015(08)
[5]豬傳染性胃腸炎病毒RT-PCR檢測(cè)方法的建立及臨床應(yīng)用[J]. 王黎,李碧,周遠(yuǎn)成,朱玲,徐志文,郭萬(wàn)柱.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(02)
[6]豬流行性腹瀉病毒熒光定量PCR檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[J]. 于長(zhǎng)青,林樹(shù)伯,劉樂(lè)榮,王慶博,李繼良.  北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 2015(03)
[7]豬流行性腹瀉研究進(jìn)展[J]. 李蕾,劉新文,殷穎珊.  南方農(nóng)業(yè). 2014(15)
[8]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬博卡病毒多重PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 焦洋,姜焱,王凱民,張常印,雷治海,唐泰山.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(08)
[9]科學(xué)使用疫苗 防控仔豬腹瀉[J]. 熊慎蘇.  今日畜牧獸醫(yī). 2013(03)
[10]豬傳染性胃腸炎病毒致病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 殷相平,任曉峰,柳紀(jì)省.  世界華人消化雜志. 2013(01)

碩士論文
[1]豬傳染性胃腸炎流行毒株的分離鑒定及全基因組分析[D]. 朱蘊(yùn)暖.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2017
[2]豬流行性腹瀉病毒（PEDV）流行株的序列分析和抗原表位表達(dá)[D]. 程小娜.海南大學(xué) 2015
[3]仔豬流行性腹瀉的診斷[D]. 林勇.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉快速診斷方法的建立及S基因的表達(dá)[D]. 劉鄧.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3243018