為促進(jìn)涼茶渣在飼料中的資源化利用,以黑曲霉和產(chǎn)朊假絲酵母為菌種固態(tài)發(fā)酵涼茶渣,考察了發(fā)酵時(shí)長(zhǎng)、溫度、含水量、浸泡液pH值、氮源、碳源共6個(gè)單因素對(duì)內(nèi)切葡聚糖酶、木聚糖酶和果膠酶活力的影響;根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果,利用硫酸銨為氮源,葡萄糖為碳源,菌種濃度為2×10⁹CFU/ml,接種量為10%,通過(guò)正交實(shí)驗(yàn),對(duì)三種酶的生產(chǎn)工藝分別優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)含水量為60%,浸泡液pH值為7.0,發(fā)酵溫度為37℃,發(fā)酵120 h是產(chǎn)三種酶的比較適宜的工藝。該工藝條件下發(fā)酵產(chǎn)物內(nèi)切葡聚糖酶活力為（5.55±0.77） U/g,木聚糖酶活力為（37.32±2.26） U/g,果膠酶活力為（29.51±3.23） U/g。結(jié)果顯示,涼茶渣是一種優(yōu)質(zhì)資源,利用黑曲霉和產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵后,產(chǎn)物含有高活力的內(nèi)切葡聚糖酶、木聚糖酶和果膠酶。 

【文章來(lái)源】：飼料工業(yè). 2020,41(22)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【部分圖文】：

發(fā)酵時(shí)長(zhǎng)對(duì)酶活力的影響

向涼茶渣補(bǔ)充4%硫酸銨，2%葡萄糖，含水量為80%，發(fā)酵72 h，考察溫度在28～37℃范圍內(nèi)以及室溫條件下，對(duì)三種酶活力的影響。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果(見(jiàn)圖2)可以發(fā)現(xiàn)，溫度對(duì)木聚糖酶活力無(wú)顯著影響；而在34℃時(shí)的內(nèi)切葡聚糖酶活力顯著高于28℃時(shí)的活力；溫度在28～37℃范圍內(nèi)變化時(shí)，對(duì)果膠酶的活力無(wú)顯著影響。本實(shí)驗(yàn)是在廣州市的8月下旬進(jìn)行，室溫較高，適合黑曲霉與酵母菌的生長(zhǎng)，因此涼茶渣室溫發(fā)酵時(shí)，三種酶活力也較強(qiáng)。盡管28℃發(fā)酵時(shí)，果膠酶活力較高，但是31℃時(shí)內(nèi)切葡聚糖酶活力和木聚糖酶活力相對(duì)較高，考慮到南方氣溫偏高，并且黑曲霉在發(fā)酵過(guò)程中存在放熱現(xiàn)象，因此將后續(xù)單因素實(shí)驗(yàn)的溫度設(shè)定為31℃。在利用黑曲霉和產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵甜高粱酒糟和麥麩生產(chǎn)蛋白飼料，35℃時(shí)纖維素酶活力最大[24]，與本部分的內(nèi)切葡聚糖酶活力最大值對(duì)應(yīng)溫度基本一致。2.1.3 含水量對(duì)酶活力的影響

含水量是指當(dāng)體系僅含有涼茶渣和水時(shí)，水的百分含量。在本部分實(shí)驗(yàn)中，向涼茶渣補(bǔ)充4%硫酸銨、2%葡萄糖，含水量在65%～85%范圍內(nèi)變化，31℃發(fā)酵72 h，考察含水量對(duì)三種酶活力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果(見(jiàn)圖3)顯示，當(dāng)含水量從65%增加到85%過(guò)程中，內(nèi)切葡聚糖酶活力和果膠酶活力基本上逐漸降低，其中80%和85%時(shí)的內(nèi)切葡聚糖酶活力顯著低于65%的內(nèi)切葡聚糖酶活力；80%和85%時(shí)的果膠酶活力顯著低于65%～75%的果膠酶活力；含水量對(duì)木聚糖酶活力沒(méi)有顯著影響�；|(zhì)的含水量影響著胞外酶的分泌和轉(zhuǎn)移，影響氧的傳遞以及菌體生長(zhǎng)。如果起始含水量太低，使菌種正常生長(zhǎng)受到限制；含水量過(guò)高，基質(zhì)密度過(guò)大，透氣性和傳熱性較差，也不利于菌種生長(zhǎng)。一般來(lái)說(shuō)真菌發(fā)酵時(shí)需要相對(duì)更低的含水量，如利用黑曲霉和產(chǎn)朊假絲酵母發(fā)酵三七渣生產(chǎn)蛋白飼料時(shí)，最優(yōu)含水量為70%[25]；在利用黑曲霉HN-1發(fā)酵豌豆莢生產(chǎn)纖維素酶時(shí)，發(fā)現(xiàn)含水量超過(guò)65%以后，纖維素酶活力顯著降低[17]。本實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)當(dāng)含水量在65%～85%之間時(shí)，三種酶活力基本上隨著含水量的增加而降低。由于新鮮涼茶渣的含水量為79.45%[1]，接近80%，而本研究的目的是為涼茶渣的資源化利用提供參考，因此將后續(xù)的單因素實(shí)驗(yàn)含水量均設(shè)定為80%。

【參考文獻(xiàn)】：
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