發(fā)布時(shí)間：2021-06-22 12:09

　　MicroRNA（miRNA）是一類內(nèi)源性的長(zhǎng)約21-23 nt的非編碼小RNA分子,主要通過(guò)其5’種子區(qū)域（2-8 nt）與靶基因的3’非編碼區(qū)互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合來(lái)抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄或者使得靶基因降解,作為關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子調(diào)控真核生物的基因表達(dá)。骨骼肌是一種高度異質(zhì)性的組織,由不同的肌纖維組成,結(jié)合其功能、形態(tài)特征以及肌球蛋白重鏈比例,可以將其分為紅肌、中間型和白肌。最近研究發(fā)現(xiàn)在紅肌和白肌之間存在差異表達(dá)的miRNAs,這些差異的miRNA主要跟骨骼肌發(fā)育、代謝等功能相關(guān)。然而,在3種肌纖維類型（紅肌、中間型和白�。┲械膍iRNA轉(zhuǎn)錄組差異有待進(jìn)一步研究。豬作為重要的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物和生物醫(yī)學(xué)研究模型,本實(shí)驗(yàn)以豬不同骨骼肌為研究對(duì)象,主要通過(guò)熒光定量和高通量測(cè)序方法檢測(cè)不同類型肌肉中的miRNAs轉(zhuǎn)錄組差異,結(jié)果如下：1本實(shí)驗(yàn)采集了豬不同部位的15種骨骼肌,用Sanger sequencing驗(yàn)證過(guò)的特異肌球蛋白重鏈引物來(lái)定量在這15種骨骼肌中的肌球蛋白重鏈表達(dá)量,根據(jù)肌球蛋白重鏈比例的聚類分析顯示,可以聚成紅肌、中間型和白肌三大類。進(jìn)一步定量線粒體拷貝數(shù)和酵解酶（乳酸脫氫酶的A,LDHA... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１各種骨骼肉的特征??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉ之ａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｖａｒｉｏｕｓ?ｓｋｅｌｅ化?１?ｍｕｓｃｌｅｓ??

如氧化、酵解。為了進(jìn)一步區(qū)分不同的肌纖維代謝能力的差異Ｗ及證明??這１５種肌肉的分類結(jié)果，本實(shí)驗(yàn)同時(shí)還檢測(cè)線粒體拷貝數(shù)和Ｌ公化４的相對(duì)表達(dá)水??平。如圖２Ｂ所示，紅肌類肌肉中的ｍｔＤＮＡ的拷貝數(shù)極涅著高于中間型和白肌纖??維，中間型肌肉中的ｍｔＤＮＡ的拷貝數(shù)極顯著高于白肌，白肌纖維中ｍｔＤＮＡ的拷??貝數(shù)最化。如圖２Ｃ所示，紅肌類肌肉中的ＩＸ估４表達(dá)量極顯著低于中間型和白肌??纖維，中間型肌肉中的王�；幢磉_(dá)量顯著高于紅肌類肌肉但是低于白肌類纖維，白??肌纖維中ＬＤ化４表達(dá)量極顯著高于中間型和紅肌纖維。并且線粒體拷貝數(shù)和么０化４??在不同肌纖維類型內(nèi)的肌肉中表達(dá)差異不大，從圖２Ｂ和２Ｃ中可Ｗ明顯看出分為了??３大類。綜上所述，根據(jù)氧化、酵解氧化能力也將肌肉很顯著分成了紅肌、白肌和??中間型，證明我們之前用ＭｙＨＣ亞型的比值進(jìn)行肌肉分型的正確性。??為了節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本，本實(shí)驗(yàn)從這１５種肌肉組織中選擇３種具有典型的每種肌??纖維特征的肌肉代這紅肌、白肌和中間型纖維。在紐肌纖維類型中

共表達(dá)高豐度的豬已知ｍｉＲＮＡｓ的用于下面的功能分析。為了驗(yàn)證深度測(cè)序結(jié)果的??可靠性，本實(shí)驗(yàn)隨機(jī)選擇了?２０個(gè)ｍｉＲＮＡｓ用ｑＲＴ－ＰＣ艮進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果顯示�。遥危�??測(cè)序數(shù)據(jù)與ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果呈極顯著顯著的正相關(guān)護(hù)＝０．７８０，?ｆ?＜?１０氣（圖３巧，再??次驗(yàn)證了深度測(cè)序方法的可靠性。??２２??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞對(duì)肉品質(zhì)的影響及其分化調(diào)控[J]. 沈林園,張順華,吳澤輝,鄭夢(mèng)月,李學(xué)偉,朱礪.  遺傳. 2013(09)
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碩士論文
[1]榮昌豬和長(zhǎng)白豬MyHC基因的表達(dá)模式及其與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性研究[D]. 冉彪.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3242808