MicroRNA（miRNA）是一類內(nèi)源性的長約21-23 nt的非編碼小RNA分子,主要通過其5’種子區(qū)域（2-8 nt）與靶基因的3’非編碼區(qū)互補配對結(jié)合來抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄或者使得靶基因降解,作為關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子調(diào)控真核生物的基因表達。骨骼肌是一種高度異質(zhì)性的組織,由不同的肌纖維組成,結(jié)合其功能、形態(tài)特征以及肌球蛋白重鏈比例,可以將其分為紅肌、中間型和白肌。最近研究發(fā)現(xiàn)在紅肌和白肌之間存在差異表達的miRNAs,這些差異的miRNA主要跟骨骼肌發(fā)育、代謝等功能相關(guān)。然而,在3種肌纖維類型（紅肌、中間型和白肌）中的miRNA轉(zhuǎn)錄組差異有待進一步研究。豬作為重要的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟動物和生物醫(yī)學(xué)研究模型,本實驗以豬不同骨骼肌為研究對象,主要通過熒光定量和高通量測序方法檢測不同類型肌肉中的miRNAs轉(zhuǎn)錄組差異,結(jié)果如下：1本實驗采集了豬不同部位的15種骨骼肌,用Sanger sequencing驗證過的特異肌球蛋白重鏈引物來定量在這15種骨骼肌中的肌球蛋白重鏈表達量,根據(jù)肌球蛋白重鏈比例的聚類分析顯示,可以聚成紅肌、中間型和白肌三大類。進一步定量線粒體拷貝數(shù)和酵解酶（乳酸脫氫酶的A,LDHA... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１各種骨骼肉的特征??Ｆｉｇ．?１?Ｔｈｅ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉ之ａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｖａｒｉｏｕｓ?ｓｋｅｌｅ化?１?ｍｕｓｃｌｅｓ??

如氧化、酵解。為了進一步區(qū)分不同的肌纖維代謝能力的差異Ｗ及證明??這１５種肌肉的分類結(jié)果，本實驗同時還檢測線粒體拷貝數(shù)和Ｌ公化４的相對表達水??平。如圖２Ｂ所示，紅肌類肌肉中的ｍｔＤＮＡ的拷貝數(shù)極涅著高于中間型和白肌纖??維，中間型肌肉中的ｍｔＤＮＡ的拷貝數(shù)極顯著高于白肌，白肌纖維中ｍｔＤＮＡ的拷??貝數(shù)最化。如圖２Ｃ所示，紅肌類肌肉中的ＩＸ估４表達量極顯著低于中間型和白肌??纖維，中間型肌肉中的王�；幢磉_量顯著高于紅肌類肌肉但是低于白肌類纖維，白??肌纖維中ＬＤ化４表達量極顯著高于中間型和紅肌纖維。并且線粒體拷貝數(shù)和么０化４??在不同肌纖維類型內(nèi)的肌肉中表達差異不大，從圖２Ｂ和２Ｃ中可Ｗ明顯看出分為了??３大類。綜上所述，根據(jù)氧化、酵解氧化能力也將肌肉很顯著分成了紅肌、白肌和??中間型，證明我們之前用ＭｙＨＣ亞型的比值進行肌肉分型的正確性。??為了節(jié)約實驗成本，本實驗從這１５種肌肉組織中選擇３種具有典型的每種肌??纖維特征的肌肉代這紅肌、白肌和中間型纖維。在紐肌纖維類型中

共表達高豐度的豬已知ｍｉＲＮＡｓ的用于下面的功能分析。為了驗證深度測序結(jié)果的??可靠性，本實驗隨機選擇了?２０個ｍｉＲＮＡｓ用ｑＲＴ－ＰＣ艮進行驗證。結(jié)果顯示小ＲＮＡ??測序數(shù)據(jù)與ｑＲＴ－ＰＣＲ結(jié)果呈極顯著顯著的正相關(guān)護＝０．７８０，?ｆ?＜?１０氣（圖３巧，再??次驗證了深度測序方法的可靠性。??２２??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]榮昌豬和長白豬MyHC基因的表達模式及其與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性研究[D]. 冉彪.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3242808