精原干細胞作為一類能夠自我更新，并且能夠分化為各級生精細胞的成體干細胞，移植到去除內(nèi)源性生殖細胞的受體動物睪丸中，也具有繼續(xù)分化的潛能。移植受體的制備是精原干細胞移植的關鍵，也是移植成功的條件和前提。腺嘌呤在醫(yī)學上普遍應用于腫瘤的治療，同時它也常作為誘發(fā)慢性腎衰竭動物模型的藥物。近期，研究者發(fā)現(xiàn)腺嘌呤能夠引起雄性動物精子數(shù)目的減少。本研究通過腺嘌呤灌胃給藥的方式分別處理大鼠和小鼠，檢測大鼠和小鼠的體重、睪丸和附睪指數(shù)以及組織形態(tài)學變化等，試圖構建大鼠和小鼠的雄性不育動物模型，并通過小鼠精原干細胞移植的方式對不育模型進行驗證，旨在通過腺嘌呤灌胃給藥的方式建立小鼠精原干細胞移植的良好受體。主要研究結(jié)果如下：（1）腺嘌呤誘導雄性不育大鼠模型。將15只2-3月齡雄性大鼠隨機分為三組，對照組、150mg/kg、300mg/kg腺嘌呤實驗組。連續(xù)灌胃三周后取睪丸觀察，發(fā)現(xiàn)實驗組睪丸變小，300mg/kg實驗組變化更明顯。H.E.染色發(fā)現(xiàn)150mg/kg實驗組睪丸間質(zhì)細胞減少，但是大部分曲細精管存在精子。300mg/kg實驗組大鼠睪丸曲細精管內(nèi)精子和生精細胞大量減少，呈現(xiàn)空泡狀，表明300mg/kg... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 腺嘌呤誘導雄性不育模型的研究進展
        1.1.1 腺嘌呤的生物學特性
        1.1.2 腺嘌呤誘導雄性不育模型及其作用機制
    1.2 精原干細胞的研究進展
        1.2.1 精原干細胞的生物學特性
        1.2.2 精原干細胞的分離、純化、培養(yǎng)
        1.2.3 精原干細胞移植的研究進展
    1.3 本研究的目的及意義
第二章 腺嘌呤誘導雄性不育大鼠模型的建立
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗動物及細胞系
        2.1.2 實驗試劑
        2.1.3 實驗儀器
        2.1.4 腺嘌呤灌胃大鼠
        2.1.5 腺嘌呤灌胃后大鼠體重和臟器指數(shù)檢測
        2.1.6 腺嘌呤灌胃后大鼠組織形態(tài)學鑒定
        2.1.7 質(zhì)粒擴繁及慢病毒包裝
        2.1.8 小鼠精原干細胞的分離純化
        2.1.9 小鼠精原干細胞慢病毒轉(zhuǎn)導
        2.1.10 小鼠精原干細胞的移植
        2.1.11 小鼠精原干細胞移植后受體大鼠檢測
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 大鼠體重變化
        2.2.2 大鼠睪丸體積變化
        2.2.3 大鼠臟器指數(shù)變化
        2.2.4 大鼠睪丸組織形態(tài)學鑒定
        2.2.5 小鼠精原干細胞的分離純化
        2.2.6 慢病毒包裝及轉(zhuǎn)導小鼠精原干細胞
        2.2.7 小鼠精原干細胞的移植
        2.2.8 小鼠精原干細胞移植后受體檢測
    2.3 討論
        2.3.1 腺嘌呤誘導雄性不育大鼠模型
        2.3.2 慢病毒包裝及轉(zhuǎn)導精原干細胞
        2.3.3 精原干細胞的移植
    2.4 小結(jié)
第三章 腺嘌呤誘導雄性不育小鼠模型的建立
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗動物
        3.1.2 實驗試劑
        3.1.3 實驗儀器
        3.1.4 腺嘌呤灌胃小鼠
        3.1.5 腺嘌呤灌胃后小鼠體重和臟器指數(shù)檢測
        3.1.6 腺嘌呤灌胃后小鼠組織形態(tài)學鑒定
        3.1.7 小鼠精原干細胞的分離純化
        3.1.8 小鼠精原干細胞的移植
        3.1.9 小鼠精原干細胞移植后受體小鼠檢測
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 小鼠存活率
        3.2.2 小鼠體重變化
        3.2.3 小鼠睪丸體積變化
        3.2.4 小鼠臟器指數(shù)變化
        3.2.5 小鼠睪丸組織形態(tài)學鑒定
        3.2.6 小鼠睪丸曲細精管空管率
        3.2.7 小鼠精原干細胞的分離純化
        3.2.8 小鼠精原干細胞的移植
        3.2.9 小鼠精原干細胞移植后受體檢測
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
縮略詞表
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3236609