纖維素是自然界中最為豐富的可再生天然高分子資源,利用生物酶解法對其降解已成為各國研究領(lǐng)域中比較熱門的研究課題。反芻動物瘤胃內(nèi)的微生物對纖維素有著獨特的降解機(jī)制,使得纖維素酶活較高的瘤胃微生物備受矚目。因此選育出瘤胃內(nèi)優(yōu)良纖維素降解菌對反芻動物有效利用粗纖維物質(zhì)具有重要的意義。本實驗以內(nèi)蒙古地區(qū)駱駝瘤胃內(nèi)容物為來源,通過以秸稈唯一碳源的選擇性培養(yǎng)基和纖維素剛果紅鑒別性培養(yǎng)基進(jìn)行初篩和復(fù)篩,再經(jīng)纖維二糖液體和固體培養(yǎng)基對其進(jìn)行富集和傾注培養(yǎng),根據(jù)菌落和菌體形態(tài),將表型特征極為相似的菌株進(jìn)行歸納總結(jié),綜合篩選出11株菌。在此基礎(chǔ)上繼續(xù)選育,淘汰了3株劣勢菌體。對剩余8株纖維素降解菌再次分別進(jìn)行粗纖維分解能力大小測定和分泌纖維素酶胞外酶、胞內(nèi)酶的測定。排除實驗誤差以及其他不確定因素后,從8株菌種中選出降解纖維素能力較強(qiáng)的1#、2#,以及纖維素胞外酶酶活較高的8#、17#作為優(yōu)勢菌株,另外選擇15#作為參照菌株,根據(jù)經(jīng)典微生物學(xué)鑒定方法對選育的優(yōu)勢菌株進(jìn)行生理生化以及分子生物學(xué)鑒定。實驗結(jié)果顯示：1.駱駝瘤胃內(nèi)分離到的纖維素降解菌主要以桿菌為主,且多數(shù)為兼性厭氧菌,只有一株菌為嚴(yán)格厭氧菌,駱駝瘤... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

纖維素結(jié)構(gòu)圖

稻稈液體培養(yǎng)基：培養(yǎng)24h后，培養(yǎng)基液體變渾油，表面出現(xiàn)一層白膜，并伴有氣泡產(chǎn)生，味臭，液體內(nèi)的稻稈出現(xiàn)毛邊，底部有沉濱狀沉淀物。如圖3-1，左側(cè)為對照組，右側(cè)為實驗組。M圖3-1結(jié)稈液體培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)物實驗結(jié)果Fig.3-1 The fermentation culture on straw fluid medium培養(yǎng)結(jié)果表明通過該培養(yǎng)基從瘤胃內(nèi)容物中分離出了能夠分解纖維素、木質(zhì)素甚至是淀粉等纖維混合物的菌株，這些菌株中可能還有真菌，或芽孢類菌體，致使液體表面產(chǎn)生白膜；且分離的菌體有些能夠產(chǎn)生氣體，導(dǎo)致液體表面產(chǎn)生氣泡。3. 3. 2固體鑒別分離培養(yǎng)基的生長特性剛果紅纖維素瓊脂培養(yǎng)基：培養(yǎng)24h后，剛果紅培養(yǎng)基內(nèi)有菌落生長，有的菌落周圍有水解圈，如圖3-2。培養(yǎng)結(jié)果表明通過該培養(yǎng)基從稻稈液體培養(yǎng)基分離到的菌體中蹄選出了降解纖維素的菌體。

剛果紅纖維素瓊脂培養(yǎng)基：培養(yǎng)24h后，剛果紅培養(yǎng)基內(nèi)有菌落生長，有的菌落周圍有水解圈，如圖3-2。培養(yǎng)結(jié)果表明通過該培養(yǎng)基從稻稈液體培養(yǎng)基分離到的菌體中蹄選出了降解纖維素的菌體。


本文編號：3234344