G418處理核供體細(xì)胞對(duì)豬克隆胚胎體外發(fā)育效率的影響
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【摘要】:【目的】探索G418處理供體細(xì)胞對(duì)其核移植胚胎發(fā)育效率的影響!痉椒ā坷肎418單獨(dú)處理豬成體成纖維細(xì)胞6 d后,收集細(xì)胞,利用熒光定量PCR的方法檢測處理前后細(xì)胞中抗氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)水平,運(yùn)用亞硫酸鹽結(jié)合測序法分別檢測基因組重復(fù)序列LINE-1、微衛(wèi)星的DNA甲基化狀態(tài),以及其核移植胚胎體外發(fā)育的能力!窘Y(jié)果】經(jīng)不同質(zhì)量濃度G418處理的供體細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激酶相關(guān)基因及細(xì)胞凋亡基因表達(dá)發(fā)生顯著變化(P0.05),但其DNA甲基化水平?jīng)]有發(fā)生改變(P0.05);經(jīng)G418處理的供體細(xì)胞的核移植胚胎的體外發(fā)育效率顯著低于對(duì)照組(P0.05)!窘Y(jié)論】G418處理供體細(xì)胞可能對(duì)其克隆胚胎體外發(fā)育效率有抑制作用。
【作者單位】: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院/國家生豬種業(yè)工程技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】: G 豬 克隆 核移植 轉(zhuǎn)基因 胚胎發(fā)育
【基金】:863計(jì)劃項(xiàng)目(2011AA100304) 廣東省自然科學(xué)基金(2014A030313464)
【分類號(hào)】:S828
【正文快照】: 優(yōu)先出版網(wǎng)址:http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.s.20160705.1200.048.html在利用克隆技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物過程中,遺傳霉素(Geneticin,G418)是最常用于細(xì)胞篩選的藥物之一。G418是一種氨基糖苷類抗生素,具有抑制細(xì)胞增殖[1]、誘發(fā)細(xì)胞凋亡[2]等作用,并對(duì)原核和真核細(xì)胞
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