我國(guó)家禽養(yǎng)殖具有很大規(guī)模,家禽養(yǎng)殖生產(chǎn)過程中疫病的防制尤其重要。目前,主要通過給予疫苗預(yù)防疫病。為了提高疫苗的免疫效果,免疫佐劑的研究成為研究的熱點(diǎn)之一。細(xì)胞因子佐劑由于其功能專一、生物活性強(qiáng)及副作用小等特點(diǎn)成為廣大研究人員研究的重點(diǎn)。本研究探索了IL-4的免疫佐劑作用,開展了以下試驗(yàn)：根據(jù)NCBI中雞IL-4的基因序列（登錄號(hào)AJ621249）,進(jìn)行引物設(shè)計(jì),并克隆出雞IL-4基因;經(jīng)酶切以及PCR鑒定及序列測(cè)定,證實(shí)ChIL-4基因克隆成功；與NCBI發(fā)表的雞IL-4基因序列比對(duì),證實(shí)同源性為100%。最終成功構(gòu)建重組真核表達(dá)載體pcDNA3.1（+）-ChIL-4。動(dòng)物試驗(yàn)共分6個(gè)組,分別為生理鹽水對(duì)照組,疫苗對(duì)照組,pcDNA3.1（+）空載體對(duì)照組,以及50μg、100μg、200μg3個(gè)不同劑量的pcDNA3.1（+）-ChIL-4實(shí)驗(yàn)組,研究其對(duì)雛雞血液活性T/B淋巴細(xì)胞百分率、ND與IB疫苗所誘導(dǎo)的抗體水平、免疫器官（脾臟）指數(shù)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明,pcDNA3.1（+）-ChIL-4可提高雛雞血液中活性T/B淋巴細(xì)胞的百分率,提高ND、IB疫苗所誘導(dǎo)的抗體水平,在14... 

【文章來源】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

雞脾臟細(xì)胞總RNA電泳圖譜

ig.l Electrophoretogram of chicken splenocyte total RNA18S和28S 3條rRNA條帶，可看出所提取的總RN度、OD260與OD280并計(jì)算比值，結(jié)果分別為695n4的電泳圖譜

M: DNA Marker DLIOOO 1、2: Purification of PCR amplification of ChIL-4由圖3可知，純化回收的PCR產(chǎn)物片段與預(yù)期長(zhǎng)度一致，且純度很高，沒有雜質(zhì)污染。測(cè)定純化回收的PCR產(chǎn)物濃度、OD260與OD280并計(jì)算比值，結(jié)果分別為50ng爾L和 L95。3.1.4重組克隆載體pMD19-T-C;7/Z-4的鑒定(1) Oz/Z-Z的轉(zhuǎn)化-19 -I

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CD40-IgG1Fc融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 張家永,李和軍,李頻,周小玲,鄭祥雄.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(02)
[2]CD80-IgG1Fc段融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 李和軍,李頻,周小玲,鄭祥雄.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(01)
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本文編號(hào)：3222841