目的犬小孢子菌（Microsporum canis）,是臨床上重要的真菌性皮膚病致病菌之一。在世界范圍內(nèi)廣泛分布,對(duì)人類(lèi)健康及動(dòng)物生產(chǎn)等造成危害。傳統(tǒng)的檢測(cè)方法耗時(shí)長(zhǎng)準(zhǔn)確率低。盡管分子生物學(xué)方法縮短了檢測(cè)時(shí)間,但其不僅需具備專(zhuān)業(yè)素質(zhì)的人員操作,且十分依賴(lài)試驗(yàn)室儀器。RAA（重組酶介導(dǎo)的等溫核酸擴(kuò)增）能夠在39℃左右的等溫條件下,20⁴0min內(nèi)便能夠產(chǎn)生大量目的基因擴(kuò)增。本研究擬建立犬小孢子菌的兩種RAA檢測(cè)方法,期望能夠建立可以應(yīng)用于臨床快速檢測(cè)犬小孢子菌的新方法。方法參考犬小孢子菌的U4/U6 snRNA-associated-splicing factor PRP24序列（MCYG₀8382）,設(shè)計(jì)出可以應(yīng)用于RAA反應(yīng)的引物與探針。制備犬小孢子菌DNA陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品。建立了RAA檢測(cè)方法和LF-RAA檢測(cè)方法,并對(duì)兩種方法的反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、特異性、靈敏度進(jìn)行評(píng)價(jià)。同時(shí)使用PCR、RAA、LF-RAA檢測(cè)方法對(duì)臨床上采集到的78份樣品進(jìn)行檢測(cè)。將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,以評(píng)價(jià)兩種RAA檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用價(jià)值。結(jié)果本研究建立的RAA檢測(cè)方法最佳... 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PCR凝膠電泳圖

圖 2-2 切膠前凝膠電泳圖注：M，DNA marker；m，目的條帶Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip圖 2-3 切膠后凝膠電泳圖注：M，DNA marker；m，目的條帶

第二章 PCR 檢測(cè)犬小孢子菌方法的建立與初步評(píng)價(jià)圖 2-2 切膠前凝膠電泳圖注：M，DNA marker；m，目的條帶Figure 2-2 Gel electrophoresis before gelationNote:M,DNA marker;m,Objective strip

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)呼吸道合胞病毒方法的建立和初步評(píng)價(jià)[D]. 陳晨.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 2018
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本文編號(hào)：3216927