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豬偽狂犬病毒貴州株的分離鑒定及gB/gE/TK基因分子特征分析

發(fā)布時(shí)間:2021-06-05 20:57
  豬偽狂犬病(Pseudorabies,PR)是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一種豬的急性傳染病,臨床上母豬主要出現(xiàn)繁殖障礙,產(chǎn)死胎或木乃伊胎;種公豬出現(xiàn)精液帶毒;仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,直至死亡。近30年來(lái)我國(guó)廣泛應(yīng)用偽狂犬病基因缺失疫苗,使該病得到了有效的控制。但在2011年底我國(guó)再次出現(xiàn)豬偽狂犬病的爆發(fā)流行,有的地方發(fā)生了流行毒株的變異,使我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)遭受了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬偽狂犬病的凈化已被列為《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃》(2012-2020年)。本研究通過(guò)采集疑似豬偽狂犬病的哺乳仔豬病料,經(jīng)PCR檢測(cè)確定為PRV感染后分離偽狂犬病病毒,通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、電鏡觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)、TCID50測(cè)定、易感動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)成功分離PRV貴州株,經(jīng)并分別對(duì)分離毒株的gB/gE/TK基因進(jìn)行克隆與基因分子特征分析,以期為貴州省豬偽狂犬病的凈化提供理論依據(jù)。1.偽狂犬病病毒T4貴州株的分離鑒定通過(guò)采集疑似豬偽狂犬病的哺乳仔豬,對(duì)病料進(jìn)行相關(guān)處理后進(jìn)行病毒的分離鑒定,通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)、電鏡觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)、TCID50測(cè)定、易感動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)... 

【文章來(lái)源】:貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

豬偽狂犬病毒貴州株的分離鑒定及gB/gE/TK基因分子特征分析


PRV病毒粒子結(jié)構(gòu)示意圖(PomeranzLEetal.,2005)

分布情況,分布情況,毒株,偽狂犬病毒


狂犬病毒概述偽狂犬病毒簡(jiǎn)介偽狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)能夠感染豬和其他多種家畜及野生發(fā)熱、奇癢(豬除外)、腦脊髓炎等癥狀,給生豬養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失粒子為圓形,完整病毒粒子大小通常在 150~250 nm 之間,主要由中央核心因組 DNA,包裹基因組的二十面體的衣殼(Capsid),衣殼外的由蛋白質(zhì)皮層(Tegument)以及最外層的鑲嵌著病毒的囊膜(Envelope)四個(gè)部分組圖 1 PR 在我國(guó)的分布情況 A.1980 年以前傳統(tǒng)毒株分布情況;B.2011 年以后的變異毒株分布情況(Sun et al. 2016) .Fig1 Distribution of PR in China A. Distribution of traditional strains before 1980; B.Distribution of variable strains after 2011(Sun et al. 2016).

模式圖,異構(gòu)體,基因組,模式圖


因的功能V 基因組編碼 70-100 種蛋白,包括結(jié)構(gòu)蛋白、毒力因子、酶類、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)NA 復(fù)制和釋放相關(guān)的多類蛋白(表 1)。其中:gC、gD、gE、gM、gN、gI、gK 和 gL 等 11 種蛋白是病毒增殖所必需的,其中 gC、gE、gL、gN 是病毒毒力決定因素(Pomeranz,et al. 2005.)。囊膜蛋白 蛋白質(zhì)皮層 核衣殼化膜蛋白 非糖基化膜蛋白) UL20 UL11 UL19(VP5) US9 UL13 UL25表 1 PRV 基因編碼的主要蛋白質(zhì)(Pomeranz LE et al., 2005)Tab 1 The major proteins encoded by the PRV gene(Pomeranz LE et al., 2005)圖 4 PRV 基因組兩種異構(gòu)體模式圖(王昕,2017)Fig4 Two Patterns of PRV Genome Isomer(Wang xin,2017 )

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬偽狂犬病的診斷與防控凈化[J]. 李天芝,于新友.  養(yǎng)豬. 2017(06)
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[3]豬偽狂犬病毒gB基因序列分析[J]. 陳如敬,周倫江,吳學(xué)敏,黃曉鳳,車勇良,嚴(yán)山,王晨燕,王隆柏,劉玉濤,魏宏.  福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2016(11)
[4]育肥豬群豬偽狂犬病的防控[J]. 方奎,陳基萍.  中國(guó)豬業(yè). 2016(08)
[5]豬偽狂犬病流行病學(xué)特征、凈化技術(shù)及其應(yīng)用示范[J]. 何啟蓋,童光志,楊漢春,張桂紅,姜平,張永光,張改平,伍少欽,章洪皸.  中國(guó)畜牧雜志. 2015(24)
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[7]規(guī);i場(chǎng)豬瘟和偽狂大病的凈化方案[J]. 李達(dá),馬萍,湯德元,唐宇,張?jiān)?曾智勇,劉霞,王洪光,韋冠東.  畜牧與獸醫(yī). 2015(07)
[8]PRV、PCV2與PPV三重PCR檢測(cè)方法的建立與初步應(yīng)用[J]. 王洪光,李紹洪,湯德元,曾智勇,李春燕,郝飛,劉建,李達(dá),韋冠東.  畜牧與獸醫(yī). 2015(01)
[9]偽狂犬病病毒BJ/YT株毒力相關(guān)基因gE和TK序列分析[J]. 鐘承,劉蕾,張樂(lè)天,王巨實(shí),王安琦,陸寶生,楊萬(wàn)蓮,呂艷麗.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2014(11)
[10]偽狂犬病毒UL49基因核定位信號(hào)的初步確定[J]. 齊曉玲,任曉明.  病毒學(xué)報(bào). 2014(04)

博士論文
[1]偽狂犬病毒LLT基因miRNA簇的功能研究[D]. 王昕.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]豬偽狂犬病病毒野毒與基因缺失疫苗株鑒別檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用[D]. 郭廣君.吉林大學(xué) 2013

碩士論文
[1]豬偽狂犬病病毒變異株的分離鑒定及gE基因缺失株的構(gòu)建[D]. 劉珍.揚(yáng)州大學(xué) 2017
[2]豬偽狂犬病毒變異毒株鑒別診斷PCR方法建立與基因缺失滅活疫苗免疫保護(hù)效力研究[D]. 孫濤.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]變異豬偽狂犬病毒的分離鑒定及生物學(xué)特性分析[D]. 張青占.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013



本文編號(hào):3212898

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