鹿茸角是一種失去后可完全再生的器官。因此,鹿茸角提供了研究哺乳動(dòng)物器官再生的理想模型。同時(shí),鹿茸也是名貴的傳統(tǒng)中藥,入藥歷史悠久。鹿茸角生長過程包括骨膜干細(xì)胞分化成間充質(zhì)細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞分化成軟骨細(xì)胞等過程,在這一系列過程中,各種細(xì)胞在一些生長因子等的作用下不斷增殖與分化,處在一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡中,維持著鹿茸角的生長發(fā)育。YAP（Yes-associated protein）是Hippo信號通路中起關(guān)鍵作用的開關(guān)蛋白,在細(xì)胞正常生長發(fā)育過程中調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和存活,并在控制器官生長、干細(xì)胞自我更新和細(xì)胞分化中起重要作用。本試驗(yàn)以梅花鹿為研究對象,通過EDU、流式細(xì)胞術(shù)、熒光定量PCR等方法,研究了YAP對梅花鹿鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞及軟骨細(xì)胞增殖與分化的影響,并探討了其調(diào)節(jié)機(jī)理。分離培養(yǎng)鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞,添加一定濃度的YAP抑制劑（Verteporfin）。結(jié)果表明,Verteporfin能夠顯著抑制YAP在鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞中的表達(dá),并能顯著抑制鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞的增殖活性。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),Verteporfin通過增加G0/G1期細(xì)胞的百分比,降低S期細(xì)胞的百分比,抑制間充質(zhì)細(xì)胞的增殖進(jìn)程。同時(shí),V... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮寫詞表
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第1章 鹿茸角的生物學(xué)特性
        1.1 鹿茸角的再生機(jī)理
        1.2 鹿茸角的創(chuàng)傷修復(fù)
        1.3 鹿茸角的生長
    第2章 YAP的研究進(jìn)展
        2.1 Hippo信號通路
        2.2 YAP對干細(xì)胞分化的影響
        2.3 YAP對骨發(fā)育的影響
        2.4 YAP與ROS
        2.5 YAP與Nrf2
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞增殖與分化的影響
        1.1 材料和方法
            1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
            1.1.3 鹿茸取材
            1.1.4 鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞的分離培養(yǎng)
            1.1.5 EdU法
            1.1.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期
            1.1.7 熒光定量PCR
                1.1.7.1 引物設(shè)計(jì)
                1.1.7.2 鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞RNA提取與反轉(zhuǎn)錄
                1.1.7.3 PCR反應(yīng)
            1.1.8 ROS的檢測
            1.1.9 超氧陰離子的檢測
            1.1.10 細(xì)胞線粒體中ROS的檢測
            1.1.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2.1 結(jié)果
            2.1.1 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞增殖的影響
            2.1.2 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期的影響
            2.1.3 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期蛋白及蛋白激酶表達(dá)的影響
            2.1.4 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞分化的影響
            2.1.5 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞中ROS含量的影響
            2.1.6 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞中超氧陰離子的影響
            2.1.7 YAP對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞中線粒體ROS的影響
            2.1.8 YAP通過ROS對鹿茸間充質(zhì)細(xì)胞分化的影響
        3.1 討論
    第2章 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞增殖與分化的影響
        2.1 材料和方法
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和試劑
            2.1.2 鹿茸取材
            2.1.3 鹿茸軟骨細(xì)胞的分離培養(yǎng)
            2.1.4 EdU法
            2.1.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期
            2.1.6 熒光定量PCR
            2.1.7 ROS的檢測
            2.1.8 超氧陰離子的檢測
            2.1.9 細(xì)胞線粒體中ROS的檢測
            2.1.10 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.1.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2.2 結(jié)果
            2.2.1 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞增殖的影響
            2.2.2 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞細(xì)胞周期的影響
            2.2.3 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞細(xì)胞周期蛋白及蛋白激酶表達(dá)的影響
            2.2.4 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞分化的影響
            2.2.5 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞中ROS的調(diào)控
                2.2.5.1 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞中ROS含量的影響
                2.2.5.2 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞中超氧陰離子含量的影響
                2.2.5.3 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞中線粒體ROS、ATP及mtDNA的影響
                2.2.5.4 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞中Nrf2-ARE通路的影響
                2.2.5.5 YAP對鹿茸軟骨細(xì)胞中抗氧化劑的影響
            2.2.6 YAP介導(dǎo)ROS對鹿茸軟骨細(xì)胞分化的影響
        2.3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
導(dǎo)師簡介
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]燃油試驗(yàn)室內(nèi)航空煤油蒸汽擴(kuò)散的數(shù)值模擬[J]. 段安鵬.  科技視界. 2016(27)

博士論文
[1]ATRA在梅花鹿鹿茸軟骨細(xì)胞分化過程中的作用及調(diào)控機(jī)理[D]. 張虹亮.吉林大學(xué) 2017

碩士論文
[1]IGF1R基因沉默對梅花鹿鹿茸軟骨細(xì)胞增殖周期凋亡等作用研究[D]. 秦洋洋.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號：3199701