為準(zhǔn)確地鑒別診斷新澤西型水泡性口炎病毒（VSV-NJ）和印第安納型水泡性口炎病毒（VSV-IND）,本研究建立了可以同時檢測和鑒別診斷VSV-NJ和VSV-IND的雙重?zé)晒釸T-PCR方法,并對方法性能進(jìn)行了測試和初步應(yīng)用。結(jié)果顯示,建立的雙重?zé)晒釸T-PCR特異性為100%,最低檢測限1～10個拷貝/μL,擴(kuò)增效率E值均在99%左右,R2值分別為0.999和0.998。VSV-NJ和VSV-IND單熒光RT-PCR與雙重?zé)晒釸T-PCR的相關(guān)性系數(shù)分別為0.999 7和0.999 4,與單熒光RT-PCR相比,該引物和探針的雙重體系混合對特異性和敏感性均未產(chǎn)生明顯干擾。用已知VSV-NJ及VSV-IND陽性核酸驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)符合率為100%,對50份臨床樣品的檢測均為陰性,與單熒光RT-PCR結(jié)果一致。本研究建立的雙重?zé)晒釸T-PCR方法實(shí)現(xiàn)了VSV-NJ和VSV-IND的同步檢測和鑒別,為水泡性口炎的防控提供了技術(shù)儲備。 

【文章來源】：中國動物檢疫. 2020,37(10)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)質(zhì)控品
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 引物和探針設(shè)計與合成
    1.4 陽性質(zhì)控品濃度測定
    1.5 雙重?zé)晒釸T-PCR反應(yīng)
    1.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和最低檢測限確定
    1.7 特異性測試
    1.8 雙重?zé)晒釸T-PCR和單熒光RT-PCR比較
    1.9 方法驗(yàn)證
2 結(jié)果
    2.1 陽性質(zhì)控品定量
    2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和最低檢測限
    2.3 特異性檢測
    2.4 雙重?zé)晒釸T-PCR和單熒光RT-PCR比較
    2.5 驗(yàn)證
3 討論



本文編號：3198728