長期使用抗生素導(dǎo)致了諸多問題,許多國家早已限制在飼料添加劑中抗生素的使用。在此背景下,無毒副作用的益生菌得到了廣泛關(guān)注。乳酸片球菌是具有益生效果的腸道益生菌,利用乳酸片球菌代替抗生素對畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。但是益生菌的活性會受外界環(huán)境的溫度、濕度、pH值等的影響,當(dāng)處于不利條件下時會大量死亡,導(dǎo)致其不能充分發(fā)揮對宿主產(chǎn)生的有益作用。本研究對乳酸片球菌的體外益生特性、發(fā)酵工藝及噴霧干燥工藝進(jìn)行了研究。具體研究結(jié)果如下:對實(shí)驗(yàn)室保藏的菌種進(jìn)行菌落形態(tài)和16S rRNA基因保守序列分析,鑒定該菌株為乳酸片球菌,將其命名為乳酸片球菌S204（Pediococcus acidilactici S204）。從P.acidilactici S204的抑菌能力及其對高溫、模擬胃液、豬膽鹽、抗生素耐受性等方面研究其益生特性。結(jié)果表明該菌株對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長均有抑制作用;55℃處理20 min時活菌數(shù)數(shù)量級沒有變化;60℃處理10 min時活菌數(shù)下降約3個數(shù)量級,20 min時活菌數(shù)降至0。耐受pH2.5的模擬胃液達(dá)1 h時存活率66.17%,2 h時存活率17.95%;對0.1%... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 研究問題的由來
    1.2 益生菌簡介
        1.2.1 益生菌概述
        1.2.2 益生菌的作用機(jī)理
            1.2.2.1 調(diào)整腸道菌群,防治腸道疾病
            1.2.2.2 改善動物體內(nèi)外生態(tài)環(huán)境
            1.2.2.3 增強(qiáng)免疫功能
    1.3 乳酸片球菌簡介
        1.3.1 乳酸片球菌的特征
        1.3.2 乳酸片球菌在畜牧業(yè)及養(yǎng)殖業(yè)中的應(yīng)用
    1.4 影響乳酸菌高密度培養(yǎng)的因素
        1.4.1 培養(yǎng)基的影響
        1.4.2 發(fā)酵條件的影響
    1.5 益生菌微膠囊技術(shù)
        1.5.1 噴霧干燥法
        1.5.2 冷凍干燥法
        1.5.3 擠壓法
        1.5.4 流化床干燥
    1.6 研究意義與內(nèi)容
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株
        2.1.2 藥品
        2.1.3 主要培養(yǎng)基
        2.1.4 模擬胃液
        2.1.5 主要儀器設(shè)備
    2.2 方法
        2.2.1 菌株的簡單染色
        2.2.2 16S rDNA保守序列的PCR擴(kuò)增與分析
        2.2.3 乳酸菌的益生特性分析
            2.2.3.1 生長曲線,pH曲線的測定
            2.2.3.2 耐高溫試驗(yàn)
            2.2.3.3 耐模擬胃液能力
            2.2.3.4 耐豬膽鹽能力
            2.2.3.5 體外平板抑菌實(shí)驗(yàn)
            2.2.3.6 對抗生素的耐藥性分析
        2.2.4 發(fā)酵工藝的研究
            2.2.4.1 碳源種類的優(yōu)化
            2.2.4.2 氮源種類的優(yōu)化
            2.2.4.3 碳源氮源質(zhì)量比的優(yōu)化
            2.2.4.4 碳源添加量的優(yōu)化
            2.2.4.5 氮源添加量的優(yōu)化
            2.2.4.6 吐溫種類的篩選
            2.2.4.7 鎂離子添加量的優(yōu)化
            2.2.4.8 錳離子添加量的優(yōu)化
            2.2.4.9 培養(yǎng)基初始pH的影響
            2.2.4.10 接種量的優(yōu)化
            2.2.4.11 溫度的影響
            2.2.4.12 氧氣的影響
            2.2.4.13 發(fā)酵過程控制恒pH的影響
            2.2.4.14 上罐擴(kuò)大培養(yǎng)
        2.2.5 噴霧干燥工藝的研究
            2.2.5.1 壁材種類的優(yōu)化
            2.2.5.2 脫脂奶粉濃度的優(yōu)化
            2.2.5.3 輔材種類對乳酸片球菌存活率的影響
3 結(jié)果與分析
    3.1 菌株的鑒定
        3.1.1 菌落形態(tài)
        3.1.2 菌株的簡單染色
        3.1.3 16S rRNA基因保守序列分析
        3.1.4 系統(tǒng)發(fā)育樹
    3.2 益生特性分析
        3.2.1 生長曲線和pH曲線的測定
        3.2.2 耐高溫試驗(yàn)
        3.2.3 耐模擬胃液能力
        3.2.4 耐豬膽鹽能力
        3.2.5 體外平板抑菌實(shí)驗(yàn)
        3.2.6 對抗生素的耐藥性分析
    3.3 發(fā)酵工藝的研究
        3.3.1 碳源種類的優(yōu)化
        3.3.2 氮源種類的優(yōu)化
        3.3.3 碳源氮源質(zhì)量比的優(yōu)化
        3.3.4 碳源添加量的優(yōu)化
        3.3.5 氮源添加量的優(yōu)化
        3.3.6 吐溫種類的優(yōu)化
        3.3.7 鎂離子添加量的優(yōu)化
        3.3.8 錳離子添加量的優(yōu)化
        3.3.9 培養(yǎng)基初始pH的影響
        3.3.10 接種量的影響
        3.3.11 溫度的影響
        3.3.12 氧氣的影響
        3.3.13 發(fā)酵過程控制恒pH的影響
        3.3.14 上罐擴(kuò)大培養(yǎng)
    3.4 噴霧干燥工藝的研究
        3.4.1 壁材種類的優(yōu)化
        3.4.2 脫脂奶粉濃度的優(yōu)化
        3.4.3 輔材種類的優(yōu)化
4 討論
    4.1 乳酸片球菌生物學(xué)特性的研究
    4.2 乳酸片球菌發(fā)酵工藝的優(yōu)化
    4.3 噴霧干燥工藝的研究
5 展望
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ
附錄Ⅱ
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Effects of Bacillus coagulans supplementation on the growth performance and gut health of broiler chickens with Clostridium perfringens-induced necrotic enteritis[J]. Yuanyuan Wu,Yujing Shao,Bochen Song,Wenrui Zhen,Zhong Wang,Yuming Guo,Muhammad Suhaib Shahid,Wei Nie.  Journal of Animal Science and Biotechnology. 2018(02)
[2]乳酸菌培養(yǎng)基的優(yōu)化設(shè)計(jì)研究[J]. 杜磊,袁超,董亞敏.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2017(07)
[3]產(chǎn)細(xì)菌素的飼用乳酸菌的分離與鑒定[J]. 王娟,蔡國林,方華,陸健.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2016(08)
[4]巨大芽孢桿菌1259制劑對比絲蘭素、枯草芽孢桿菌對產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能及排泄物中氨氮含量的影響[J]. 丁文駿,王強(qiáng),戴美梅,張為利,張艷云.  動物營養(yǎng)學(xué)報. 2016(05)
[5]一株乳酸片球菌P-24的高密度發(fā)酵[J]. 石娜娜,王波,王玉芳,高坤.  南方農(nóng)業(yè). 2016(03)
[6]Irritable bowel syndrome: A microbiome-gut-brain axis disorder?[J]. Paul J Kennedy,John F Cryan,Timothy G Dinan,Gerard Clarke.  World Journal of Gastroenterology. 2014(39)
[7]母豬糞便中乳酸菌菌株體外益生特性初步研究[J]. 王津,楊燕萍,王葉琛,周志江,韓燁,鄭成江,范寰.  中國飼料. 2014(14)
[8]乳酸片球菌PA003抑菌作用及體外耐受性的研究[J]. 董婷,周志江,韓燁.  食品工業(yè)科技. 2014(05)
[9]低溫乳酸菌混菌培養(yǎng)增殖培養(yǎng)基的優(yōu)化[J]. 田菊梅,梁琪,米蘭,張炎,文鵬程,張衛(wèi)兵.  中國釀造. 2013(02)
[10]安琪首創(chuàng)試劑級酵母浸粉,打破國際壟斷[J]. 浩林.  釀酒科技. 2011(10)

博士論文
[1]抗嗜水氣單胞菌解淀粉芽孢桿菌的抗菌機(jī)理研究及其微膠囊制劑的安全性評價[D]. 曹海鵬.上海海洋大學(xué) 2013
[2]乳酸片球菌細(xì)菌素的發(fā)酵與純化研究[D]. 張健.天津大學(xué) 2012

碩士論文
[1]干酪乳桿菌高密度培養(yǎng)及干燥工藝的研究[D]. 胡榴榴.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[2]乳酸片球菌培養(yǎng)基優(yōu)化、益生特性及在豬肉防腐中的應(yīng)用[D]. 董婷.天津大學(xué) 2014
[3]幾種動物來源益生菌部分生物學(xué)特性的比較研究[D]. 劉釗熠.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]嗜酸乳桿菌微膠囊制備及質(zhì)量評價的研究[D]. 陳超.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[5]豬源益生乳桿菌的分離、篩選及應(yīng)用研究[D]. 侯成立.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[6]流化床制備微囊的處方與工藝參數(shù)的量化控制[D]. 崔鑫萌.青島科技大學(xué) 2012
[7]噴霧干燥制備益生菌發(fā)酵劑的研究[D]. 張書猛.陜西科技大學(xué) 2012
[8]低溫流化床制備油包埋檸檬酸微膠囊的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 張靜.天津科技大學(xué) 2012
[9]乳酸菌高密度發(fā)酵技術(shù)的研究[D]. 朱承亮.浙江大學(xué) 2008
[10]乳酸乳球菌的有氧呼吸研究[D]. 付良.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號：3198532