Ghrelin（促生長激素釋放肽）是1999年被日本科學(xué)家Kojima等發(fā)現(xiàn)的一種由28個(gè)氨基酸組成的腦腸肽,是生長激素促分泌素受體（Growth hormone secretagogue, GHS）的天然配體。Ghrelin在體內(nèi)廣泛分布決定了其功能的多樣性,因此目前已經(jīng)成為人們研究的重點(diǎn)。黃體是由排卵后的膜黃體細(xì)胞和顆粒黃體細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的。黃體在形成過程中伴隨著很多生物學(xué)和分子生物學(xué)變化,在LH峰之后排卵之前,合成孕酮所需要的酶細(xì)胞色素P450側(cè)鏈裂解酶（P450scc）和3p類固醇脫氫酶（3β-HSD）的mRNA表達(dá)暫時(shí)性降低。排卵后和黃體化期間則其mRNA和酶的活性升高,孕酮產(chǎn)量增加,且甾類激素合成靈敏調(diào)節(jié)蛋白（StAR）的出現(xiàn)與孕酮（P4）的合成在時(shí)空上有一致性,因此P4、P450scc、3β-HSD、StAR是黃體形成的標(biāo)志。為了初步了解Ghrelin在顆粒細(xì)胞擬黃體化過程中的作用,我們通過體外培養(yǎng)綿羊卵泡顆粒細(xì)胞后進(jìn)行不同濃度激素調(diào)控,建立體外培養(yǎng)顆粒細(xì)胞向黃體細(xì)胞分化的體系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)聯(lián)合LH（2.5IU/ml）、FSH（2.5IU/ml）、E2（1ug/mL）組在24h... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 Ghrelin的研究概況
    1.2 Ghrelin的發(fā)現(xiàn)
    1.3 Ghrelin的結(jié)構(gòu)域分布
    1.4 Ghrelin受體(GHS-R)及其分布
    1.5 Ghrelin的生理作用
        1.5.1 Ghrelin對生長激素的影響
        1.5.2 Ghrelin對學(xué)習(xí)和記憶的影響
        1.5.3 Ghrelin對胃黏膜的影響
        1.5.4 Ghrelin對心血管的影響
        1.5.5 Ghrelin對細(xì)胞凋亡的影響
        1.5.6 Ghrelin對肥胖的影響
        1.5.7 Ghrelin對生殖激素的影響
    1.6 卵泡顆粒細(xì)胞及其卵泡發(fā)育過程
    1.7 黃體的發(fā)生
        1.7.1 黃體的來源
        1.7.2 黃體形成過程主要的激素調(diào)節(jié)
        1.7.3 黃體化生物學(xué)變化
    1.8 本研究的目的及意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 顆粒細(xì)胞擬黃體化培養(yǎng)
        2.2.2 Ghrelin在黃體形成過程中的作用
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果分析
    3.1 顆粒細(xì)胞的培養(yǎng)
    3.2 不同濃度的激素對顆粒細(xì)胞分泌孕酮的影響
    3.3 確定卵泡上顆粒細(xì)胞模擬黃體化成功與否
    3.4 黃體化顆粒細(xì)胞細(xì)胞總RNA提取檢測
    3.5 熒光定量PCR檢測結(jié)果
        3.5.1 熒光定量PCR產(chǎn)物的擴(kuò)增曲線及溶解曲線
        3.5.2 熒光定量RT-PCR產(chǎn)物的擴(kuò)增效率曲線
        3.5.3 黃體化標(biāo)志基因qPCR產(chǎn)物的電泳檢測及測序結(jié)果
        3.5.4 黃體化標(biāo)志基因表達(dá)量的測定
        3.5.5 Ghrelin在黃體化形成過程中的作用
4 討論
    4.1 顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)
    4.2 顆粒細(xì)胞黃體化培養(yǎng)
    4.3 Ghrelin對黃體化標(biāo)志基因的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人卵泡顆粒細(xì)胞的原代培養(yǎng)與鑒定[J]. 孫艷,杜生榮,張文昌.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(02)
[2]Ghrelin對大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用[J]. 王亞斌,孫冬冬,趙力,張錚,張榮慶,曹豐,王海昌.  心臟雜志. 2010(04)
[3]類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白的研究進(jìn)展[J]. 張育輝,李霞.  陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2009(03)
[4]睪丸間質(zhì)細(xì)胞中睪酮合成酶及蛋白表達(dá)的調(diào)控因子[J]. 孫佳音,應(yīng)鋒,韓曉冬.  生殖與避孕. 2009(01)
[5]Ghrelin對大鼠十二指腸肌電活動(dòng)的影響及作用機(jī)制[J]. 王燕,董蕾,鄒百倉,李慧鵬.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2008(02)
[6]小鼠卵巢顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J]. 王妍,趙曉娥,楊培先,張仕強(qiáng),蘇利紅,馬保華.  西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(08)
[7]顆粒細(xì)胞的增殖分化及其在卵泡發(fā)育中的作用[J]. 盧翠玲,楊巍,胡召元,劉以訓(xùn).  科學(xué)通報(bào). 2005(21)
[8]體外培養(yǎng)人卵巢黃素化顆粒細(xì)胞的鑒定及其分泌功能變化[J]. 白曉紅,糜若然,岳天孚,隨笑琳,趙曉徽.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2005(05)
[9]FSH和胰島素對牛卵泡顆粒細(xì)胞長期培養(yǎng)的影響[J]. 高慶華,蔣超祥,韓春梅.  中國草食動(dòng)物. 2004(04)
[10]卵泡分化排卵和黃體發(fā)生的分子基礎(chǔ)[J]. 劉以訓(xùn).  濰坊學(xué)院學(xué)報(bào). 2002(06)

碩士論文
[1]綿羊生殖周期卵巢形態(tài)學(xué)特點(diǎn)的研究[D]. 毛文智.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3194952