小鵝瘟（GP）也被稱為Derzsy’s病,是由小鵝瘟病毒（學名為鵝細小病毒,Goose parvovirus, GPV）引起的一種主要侵害雛鵝和雛番鴨的高度接觸性傳染病。該病傳播速度快,死亡率和發(fā)病率均高達90%-100%,隨著雛鵝日齡的增長,發(fā)病率和死亡率都有所下降,其主要特征是小腸粘膜表層大片壞死脫落與滲出物凝成假膜栓子物堵塞于小腸,最大發(fā)病日齡為60日齡,其后常成隱性感染。本病一年四季均可發(fā)生流行,具有一定的季節(jié)性和周期性。目前,該病已成為危害養(yǎng)鵝業(yè)和養(yǎng)番鴨業(yè)中最主要傳染病之一,給養(yǎng)殖業(yè)造成重大損失。本研究對疑似小鵝瘟臨床病例進行了病原的分離鑒定,豐富了小鵝瘟的流行病學及病原學資料,為臨床診斷提供依據。在病原分離鑒定的基礎上,擴增了該分離株的全基因序列,進行了序列分析,為小鵝瘟病毒分子流行病學的的研究提供依據。此外,本研究通過構建重組質粒,表達結構蛋白VP3,建立了小鵝瘟病毒雙抗夾心ELISA檢測方法,旨在為基層防疫單位及流行病學調查提供了技術手段。主要研究內容：對來自安徽省五河縣某養(yǎng)殖場所送檢的病死和瀕死小鵝進行的實驗室檢測,通過流行病學、臨診觀察和剖檢病變的檢查,初步疑為小鵝... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
ABSTRACT
縮略語及符號
第一章 小鵝瘟病毒生物學特性及其診斷方法的研究進展
    1 小鵝瘟病毒的發(fā)現(xiàn)
    2 小鵝瘟病毒的特性
        2.1 小鵝瘟病毒的分類地位
        2.2 形態(tài)特征
        2.3 理化特性
        2.4 培養(yǎng)特性
    3 小鵝瘟病毒的分子生物學特性
        3.1 基因組結構特點
        3.2 基因組的轉錄和調節(jié)
    4 小鵝瘟病毒主要蛋白
        4.1 非結構蛋白
        4.2 結構蛋白
    5 小鵝瘟
        5.1 流行病學
        5.2 小鵝瘟的臨床癥狀和病理變化
    6 小鵝瘟病毒的診斷方法
        6.1 病毒分離和鑒定
        6.2 血清學診斷
        6.3 分子生物學診斷
    7 小鵝瘟的防治
    8 研究目的及意義
    參考文獻
第二章 小鵝瘟病毒分離鑒定及全基因序列的測定
    摘要
    1 材料
        1.1 材料
    2 方法
        2.1 病料的采集及處理
        2.2 病料的鑒定
        2.3 病毒的增殖及傳代
        2.4 病毒的分離鑒定
        2.5 動物回歸試驗
        2.6 GPV各片段的擴增與測序
        2.7 GPV全基因序列的拼接和分析
    3 結果
        3.1 病料的鑒定
        3.2 鵝胚的觀察
        3.3 血凝試驗(HA)
        3.4 瓊脂擴散試驗(AGP)
        3.5 PCR方法
        3.6 動物回歸試驗
        3.7 GPVWH-12各片段的擴增
        3.8 克隆的鑒定
        3.9 GPV基因序列的拼接
        3.10 全基因序列同源性的比較
        3.11 遺傳進化分析
        3.12 GPV各基因核苷酸序列及推導氨基酸序列同源性比較
    4 討論
    參考文獻
第三章 小鵝瘟病毒VP3蛋白多克隆抗體的制備與雙抗夾心ELISA方法的建立
    摘要
    1 材料
        1.1 材料
    2 方法
        2.1 VP3基因引物的設計與擴增
        2.2 重組表達載體Pcold Ⅰ—VP3的構建
        2.3 VP3蛋白的表達及鑒定
        2.4 VP3蛋白濃度的測定
        2.5 抗VP3多克隆抗體的制備及鑒定
        2.6 雙抗夾心ELISA方法反應條件的建立
    3 結果
        3.1 VP3基因擴增及鑒定
        3.2 VP3蛋白的表達
        3.3 VP3蛋白的純化
        3.4 VP3蛋白Western-blot的鑒定
        3.5 VP3蛋白的濃度
        3.6 抗VP3多克隆抗體的純化及鑒定
        3.7 雙抗夾心ELISA方法反應條件的建立
    4 討論
    參考文獻
全文總結
附錄一
附錄二
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]鵝細小病毒非結構蛋白B細胞線性抗原表位的鑒定及抗原表位區(qū)分子特性分析[J]. 于天飛,仇錚,馬波,高明春,張文龍,王君偉.  中國預防獸醫(yī)學報. 2011(08)
[2]鵝細小病毒非結構蛋白和結構蛋白的二級結構及B細胞抗原表位預測[J]. 于天飛,馬波,邢明偉,靳淼,劉海暇,李俚,王君偉.  中國家禽. 2007(07)
[3]小鵝瘟的診斷與防制[J]. 蘇穎,王姝.  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2007(03)
[4]幾種常見鵝病的防治方法[J]. 存云.  湖北畜牧獸醫(yī). 2007(02)
[5]小鵝瘟的流行與有效防制措施[J]. 王永坤,田慧芳.  現(xiàn)代畜牧獸醫(yī). 2007(01)
[6]小鵝瘟的防治[J]. 包金蓮.  內蒙古科技與經濟. 2006(24)
[7]小鵝瘟綜合防治[J]. 侯洪烈.  四川畜牧獸醫(yī). 2006(11)
[8]小鵝瘟的研究進展[J]. 李福偉,李惠敏,張桂紅,吳玄光.  廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2006(04)
[9]鵝細小病毒HG5/82株的分離鑒定及生物學特性的研究[J]. 李桂霞,劉勝旺,孔憲剛,谷守林,冉多良.  中國預防獸醫(yī)學報. 2005(03)
[10]小鵝瘟的發(fā)生與防治[J]. 周景明.  湖北畜牧獸醫(yī). 2003(06)

碩士論文
[1]抗鵝細小病毒VP3蛋白單克隆抗體的制備及對應抗原表位的定位[D]. 郭鷺.東北農業(yè)大學 2010
[2]感染鵝細小病毒雛鵝病理學研究[D]. 裴穎.東北農業(yè)大學 2008
[3]鵝細小病毒VP3-ELISA和NS2-ELISA檢測方法的建立及抗體消長規(guī)律的測定[D]. 張雅為.東北農業(yè)大學 2008



本文編號：3172120