發(fā)布時(shí)間：2021-04-29 03:56

　　本研究選用甘肅高山細(xì)毛羊及其與南非肉用美利奴雜交F1代羔羊各6只，研究了遺傳背景對(duì)瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響，并采用變性梯度凝膠電泳技術(shù)（PCR-DGGE）方法檢測(cè)了瘤胃微生物區(qū)系，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-timePCR）技術(shù)分析了宿主中與瘤胃脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)、肌肉發(fā)育和脂肪沉積相關(guān)基因的表達(dá)量。獲得了如下結(jié)果：1.通過對(duì)甘肅高山細(xì)毛羊（A組）和南甘F1（B組）的瘤胃微生物VFAs的測(cè)定，結(jié)果表明：A組和B組兩組羊間除了丁酸無顯著差異外（P>0.05），其余參數(shù)均呈顯著或極顯著差異（P<0.05或P<0.01）。其中，乙酸A組極顯著高于B組（P<0.01）；丙酸B組極顯著高于A組（P<0.01）；乙酸/丙酸A組極顯著高于B組（P<0.01）；總酸A組顯著高于B組（P<0.05）。綿羊瘤胃液尿素氮、氨氮和總氮B組都極顯著高于A組（P<0.01），蛋白氮2組間無顯著差異（P>0.05）。2.運(yùn)用PCR-DGGE技術(shù)分析了2組綿羊瘤胃微生物區(qū)系多樣性，結(jié)果表明，A組和B組綿羊PCR-DGGE圖譜無相似性；瘤胃微生物多樣性指數(shù)分別為3.61和3... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
論文部分縮寫詞的中英文對(duì)照
摘要
Summary
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 問題的提出
    1.2 影響綿羊瘤胃發(fā)育的因素
        1.2.1 遺傳
        1.2.2 年（日）齡
        1.2.3 飼料組成及形態(tài)
        1.2.4 揮發(fā)性脂肪酸
        1.2.5 瘤胃微生物
    1.3 綿羊瘤胃微生物區(qū)系多樣性
    1.4 本研究涉及的基因研究進(jìn)展
        1.4.1 MCTs 家族
        1.4.2 IGF-Ⅰ和 IGF-ⅠR 基因
        1.4.3 PPARγ基因
    1.5 本研究的目的和意義
2 材料方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 動(dòng)物來源與樣品采集
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要分子生物試劑配制
        2.1.5 引物
    2.2 方法
        2.2.1 瘤胃液樣品的采集與處理
        2.2.2 瘤胃參數(shù)測(cè)定指標(biāo)及方法
        2.2.3 DNA提取方法
        2.2.4 DGGE 法
        2.2.5 DGGE 凝膠切膠及 PCR 擴(kuò)增的方法
        2.2.6 DGGE 凝膠回收 DNA
        2.2.7 RNA 提取方法
        2.2.8 Real-time PCR 法
    2.3 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 瘤胃參數(shù)測(cè)定與分析
        3.1.1 瘤胃液中 VFAs 測(cè)定
        3.1.2 瘤胃液中的氮含量測(cè)定
    3.2 PCR-DGGE 結(jié)果與分析
        3.2.1 瘤胃內(nèi)容物總 DNA 的提取及 PCR 擴(kuò)增
        3.2.2 DGGE 指紋圖譜建立及分析
        3.2.3 割膠條帶序列分析
    3.3 宿主基因表達(dá)分析
        3.3.1 總 RNA 的提取
        3.3.2 不同類群綿羊瘤胃背囊 MCTs 基因的表達(dá)量分析
        3.3.3 不同類群綿羊肌肉組織 IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR 基因的表達(dá)量分析
        3.3.4 不同類群綿羊肝臟組織 IGF-Ⅰ基因的表達(dá)量分析
        3.3.5 不同類群綿羊脂肪組織 PPARγ基因的表達(dá)量分析
4 討論
    4.1 不同類群綿羊的瘤胃參數(shù)測(cè)定的差異
    4.2 PCR-DGGE 分析比較不同類群綿羊瘤胃微生物區(qū)系差異
    4.3 宿主基因表達(dá)量分析
        4.3.1 不同類群綿羊瘤胃組織 MCTs 基因家族的表達(dá)差異
        4.3.2 不同類群綿羊脂肪組織 PPARγ基因的表達(dá)差異
        4.3.3 不同類群綿羊肝臟、肌肉組織 IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR 基因的表達(dá)差異
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄一 VFA測(cè)定方法
附錄二 氨態(tài)氮測(cè)定方法
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3166792