胚胎干細(xì)胞（Embryonic stem cell, ESC）的研究在發(fā)育生物學(xué),醫(yī)藥學(xué),和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域里一直占據(jù)著極其顯著的位置。但除小鼠（mouse Embryonic stem sell, mESC）和人類的胚胎干細(xì)胞（human Embryonic stem sell, hESC）外,畜禽種類ESC的研究進(jìn)展非常緩慢,特別是雞的ESC（chicken Embryonic stem cell, cESC）,至今尚沒能建立起一個(gè)操作簡(jiǎn)便狀態(tài)穩(wěn)定且高可重復(fù)性的cESC體外長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)細(xì)胞系。誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞（induced pluripotency stem cell, iPSC）為ESC研究開辟了全新的方向,在去分化和重編程過程中發(fā)揮核心作用的多能性轉(zhuǎn)錄因子成為理解和闡述ESC多能性維持分子機(jī)制的新的切入點(diǎn)。本研究借鑒iPSC的研究成果首次將多能性轉(zhuǎn)錄因子以外源表達(dá)融合蛋白的形式應(yīng)用于cESC體外培養(yǎng)。四種雞源多能性轉(zhuǎn)錄因子的CDS序列被完整地克隆,cPOUV, cSox-2, cNanog,和cLin28,并以重組蛋白的形式表達(dá),重組多能性蛋白的羧基端連接有一個(gè)連續(xù)的9個(gè)精氨... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 胚胎干細(xì)胞綜述
    1.2 雞胚胎干細(xì)胞綜述
    1.3 iPSC研究綜述
    1.4 Lin28對(duì)ESC表觀遺傳學(xué)修飾的影響
    1.5 研究目的與意義
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與技術(shù)路線
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.4 實(shí)驗(yàn)操作步驟
第三章 結(jié)果
    3.1 連續(xù)的9個(gè)精氨酸高效引導(dǎo)重組蛋白進(jìn)入體外培養(yǎng)細(xì)胞
    3.2 重組多能性蛋白體外表達(dá)檢測(cè)
    3.3 四種重組多能性蛋白在體外培養(yǎng)中抑制cESCs分化并使其增殖至3代
    3.4 重組多能性蛋白與UF和bFGF結(jié)合可使cESCs在體外增殖7代并維持多能性特征
    3.5 多能性和端粒酶活性在體外培養(yǎng)6代的cESCs仍得到維持
    3.6 重組Lin28蛋白添加數(shù)量的增加使體外培養(yǎng)的cESCs獲得10代增殖并維持多能性特性
    3.7 Lin28通過影響細(xì)胞周期和染色質(zhì)重塑相關(guān)基因的表達(dá)維持cESC的多能性
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Research of blastocyte-like structure in chicken[J]. LI Jia1, PAN Qiuzhen1, LI Junying1, HAN Hongbing1, SUN Shufeng1, YANG Jun1, XU Shuguang, TIAN Liang, LIAN Zhengxing1,2, YANG Ning1,2 & LI Ning2,3 1. College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100094, China; 2. Laboratory of Animal Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100094, China; 3. State Key Laboratory of Agrobiotechnology, Beijing 100094, China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(05)



本文編號(hào)：3166236