胚胎干細胞（Embryonic stem cell, ESC）的研究在發(fā)育生物學,醫(yī)藥學,和農(nóng)業(yè)生物技術領域里一直占據(jù)著極其顯著的位置。但除小鼠（mouse Embryonic stem sell, mESC）和人類的胚胎干細胞（human Embryonic stem sell, hESC）外,畜禽種類ESC的研究進展非常緩慢,特別是雞的ESC（chicken Embryonic stem cell, cESC）,至今尚沒能建立起一個操作簡便狀態(tài)穩(wěn)定且高可重復性的cESC體外長期傳代培養(yǎng)細胞系。誘導多能性干細胞（induced pluripotency stem cell, iPSC）為ESC研究開辟了全新的方向,在去分化和重編程過程中發(fā)揮核心作用的多能性轉(zhuǎn)錄因子成為理解和闡述ESC多能性維持分子機制的新的切入點。本研究借鑒iPSC的研究成果首次將多能性轉(zhuǎn)錄因子以外源表達融合蛋白的形式應用于cESC體外培養(yǎng)。四種雞源多能性轉(zhuǎn)錄因子的CDS序列被完整地克隆,cPOUV, cSox-2, cNanog,和cLin28,并以重組蛋白的形式表達,重組多能性蛋白的羧基端連接有一個連續(xù)的9個精氨... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 胚胎干細胞綜述
    1.2 雞胚胎干細胞綜述
    1.3 iPSC研究綜述
    1.4 Lin28對ESC表觀遺傳學修飾的影響
    1.5 研究目的與意義
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗設計與技術路線
    2.3 實驗方法
    2.4 實驗操作步驟
第三章 結(jié)果
    3.1 連續(xù)的9個精氨酸高效引導重組蛋白進入體外培養(yǎng)細胞
    3.2 重組多能性蛋白體外表達檢測
    3.3 四種重組多能性蛋白在體外培養(yǎng)中抑制cESCs分化并使其增殖至3代
    3.4 重組多能性蛋白與UF和bFGF結(jié)合可使cESCs在體外增殖7代并維持多能性特征
    3.5 多能性和端粒酶活性在體外培養(yǎng)6代的cESCs仍得到維持
    3.6 重組Lin28蛋白添加數(shù)量的增加使體外培養(yǎng)的cESCs獲得10代增殖并維持多能性特性
    3.7 Lin28通過影響細胞周期和染色質(zhì)重塑相關基因的表達維持cESC的多能性
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻
作者簡歷
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Research of blastocyte-like structure in chicken[J]. LI Jia1, PAN Qiuzhen1, LI Junying1, HAN Hongbing1, SUN Shufeng1, YANG Jun1, XU Shuguang, TIAN Liang, LIAN Zhengxing1,2, YANG Ning1,2 & LI Ning2,3 1. College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100094, China; 2. Laboratory of Animal Genetics and Breeding, Ministry of Agriculture, Beijing 100094, China; 3. State Key Laboratory of Agrobiotechnology, Beijing 100094, China.  Science in China（Series C:Life Sciences）. 2005(05)



本文編號：3166236