為了探討生肌中藥黃芪、乳香促進(jìn)傷口修復(fù)機(jī)制,試驗(yàn)以小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH3T3為研究對(duì)象,通過黃芪提取物和乳香提取物分別對(duì)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH3T3的生長干預(yù),通過檢測細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期,組蛋白甲基化酶與去甲基化酶m-RNA增殖情況與ERK蛋白及p-ERK蛋白的變化,為黃芪與乳香在創(chuàng)傷愈合中的作用提供依據(jù)。試驗(yàn)以體外培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞NIH3T3,細(xì)胞傳代,隨機(jī)分為兩組,對(duì)照組和藥物干預(yù)組,加入不同濃度的黃芪提取物與乳香提取物干預(yù)細(xì)胞24h,分別采用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期比例,RT-PCR的方法檢測組蛋白甲基化酶與去甲基化酶增殖情況以及Western Blotting的方法檢測ERK蛋白及p-ERK蛋白。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1.采用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖率:當(dāng)黃芪提取物濃度為8×10-3g/L,1.6×10-3g/L,3.2 X 10-4g/L,乳香提取物濃度為4×10-1和8×10-2g/L時(shí)干預(yù)細(xì)胞24h,吸光度較對(duì)照組差異極顯著（P<0.01）。2.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期:當(dāng)黃芪在濃度8×10-3g/L,1.6×10-3g/L,3.2×... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 創(chuàng)傷愈合的研究進(jìn)展
        1.1.1 中醫(yī)在治療創(chuàng)傷愈合的傳統(tǒng)理論
        1.1.2 細(xì)胞因子在創(chuàng)傷愈合中的作用
    1.2 成纖維細(xì)胞在創(chuàng)傷修復(fù)中的作用
    1.3 成纖維細(xì)胞增殖與細(xì)胞信號(hào)調(diào)控
        1.3.1 MAPK信號(hào)通路與細(xì)胞增殖
        1.3.2 ERK信號(hào)通路與細(xì)胞增殖
        1.3.3 信號(hào)通路阻斷劑在研究細(xì)胞信號(hào)通路中的作用
        1.3.4 ERK信號(hào)通路與相關(guān)疾病
    1.4 DNA甲基化的生物學(xué)特性
    1.5 中藥在創(chuàng)傷修復(fù)中的作用
    1.6 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞
        2.1.2 儀器
        2.1.3 試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 提取物的含量測定
        2.2.2 NIH3T3細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代
        2.2.3 CCK-8法測提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞增殖率的影響
        2.2.4 流式細(xì)胞儀檢測NIH3T3細(xì)胞周期的比例
        2.2.5 RT-PCR法檢測NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶與去甲基化酶的表達(dá)活性
        2.2.6 Western Blotting法檢測NIH3T3細(xì)胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達(dá)
        2.2.7 統(tǒng)計(jì)方法
3 結(jié)果
    3.1 中藥提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞增殖率的影響
        3.1.1 黃芪提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞增殖率的影響
        3.1.2 乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞增殖率的影響
    3.2 中藥提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞周期比例的影響
        3.2.1 黃芪提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞周期比例的影響
        3.2.2 乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞周期比例的影響
    3.3 中藥提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶與去甲基化酶的表達(dá)活性的影響
        3.3.1 黃芪提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達(dá)活性的影響
        3.3.2 ERK信號(hào)通路阻滯后黃芪提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達(dá)活性的影響
        3.3.3 乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達(dá)活性的影響
        3.3.4 ERK信號(hào)通路阻滯后乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達(dá)活性的影響
    3.4 中藥提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達(dá)的影響
        3.4.1 黃芪提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達(dá)的影響
        3.4.2 ERK信號(hào)通路阻滯后黃芪提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達(dá)的影響
        3.4.3 乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達(dá)的影響
        3.4.4 ERK信號(hào)通路阻滯后乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達(dá)的影響
4 討論
    4.1 黃芪和乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響
    4.2 黃芪和乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞組蛋白甲基化酶和去甲基化酶的影響
    4.3 黃芪和乳香提取物對(duì)NIH3T3細(xì)胞ERK信號(hào)通路的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]ERK1/2信號(hào)通路調(diào)控糖尿病視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長因子的作用研究[D]. 葉曉峰.復(fù)旦大學(xué) 2009
[4]姜黃素對(duì)肺纖維化中ERK1/2信號(hào)通路和CTGF生成的作用機(jī)制[D]. 解克芳.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2008
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碩士論文
[1]白藜蘆醇對(duì)大鼠肺纖維化TGFβ1、ERK1/2表達(dá)的影響[D]. 李婉霜.南華大學(xué) 2012
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本文編號(hào)：3165218