發(fā)布時間：2021-04-28 09:13

　　為了探討生肌中藥黃芪、乳香促進傷口修復機制,試驗以小鼠胚胎成纖維細胞NIH3T3為研究對象,通過黃芪提取物和乳香提取物分別對小鼠胚胎成纖維細胞NIH3T3的生長干預,通過檢測細胞增殖,細胞周期,組蛋白甲基化酶與去甲基化酶m-RNA增殖情況與ERK蛋白及p-ERK蛋白的變化,為黃芪與乳香在創(chuàng)傷愈合中的作用提供依據(jù)。試驗以體外培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細胞NIH3T3,細胞傳代,隨機分為兩組,對照組和藥物干預組,加入不同濃度的黃芪提取物與乳香提取物干預細胞24h,分別采用CCK-8法檢測細胞增殖率,流式細胞術檢測細胞周期比例,RT-PCR的方法檢測組蛋白甲基化酶與去甲基化酶增殖情況以及Western Blotting的方法檢測ERK蛋白及p-ERK蛋白。實驗結果如下:1.采用CCK-8法檢測細胞增殖率:當黃芪提取物濃度為8×10-3g/L,1.6×10-3g/L,3.2 X 10-4g/L,乳香提取物濃度為4×10-1和8×10-2g/L時干預細胞24h,吸光度較對照組差異極顯著（P<0.01）。2.采用流式細胞術檢測細胞周期:當黃芪在濃度8×10-3g/L,1.6×10-3g/L,3.2×... 

【文章來源】：東北農業(yè)大學黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 創(chuàng)傷愈合的研究進展
        1.1.1 中醫(yī)在治療創(chuàng)傷愈合的傳統(tǒng)理論
        1.1.2 細胞因子在創(chuàng)傷愈合中的作用
    1.2 成纖維細胞在創(chuàng)傷修復中的作用
    1.3 成纖維細胞增殖與細胞信號調控
        1.3.1 MAPK信號通路與細胞增殖
        1.3.2 ERK信號通路與細胞增殖
        1.3.3 信號通路阻斷劑在研究細胞信號通路中的作用
        1.3.4 ERK信號通路與相關疾病
    1.4 DNA甲基化的生物學特性
    1.5 中藥在創(chuàng)傷修復中的作用
    1.6 研究目的與意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞
        2.1.2 儀器
        2.1.3 試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 提取物的含量測定
        2.2.2 NIH3T3細胞的培養(yǎng)與傳代
        2.2.3 CCK-8法測提取物對NIH3T3細胞增殖率的影響
        2.2.4 流式細胞儀檢測NIH3T3細胞周期的比例
        2.2.5 RT-PCR法檢測NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶與去甲基化酶的表達活性
        2.2.6 Western Blotting法檢測NIH3T3細胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達
        2.2.7 統(tǒng)計方法
3 結果
    3.1 中藥提取物對NIH3T3細胞增殖率的影響
        3.1.1 黃芪提取物對NIH3T3細胞增殖率的影響
        3.1.2 乳香提取物對NIH3T3細胞增殖率的影響
    3.2 中藥提取物對NIH3T3細胞周期比例的影響
        3.2.1 黃芪提取物對NIH3T3細胞周期比例的影響
        3.2.2 乳香提取物對NIH3T3細胞周期比例的影響
    3.3 中藥提取物對NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶與去甲基化酶的表達活性的影響
        3.3.1 黃芪提取物對NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達活性的影響
        3.3.2 ERK信號通路阻滯后黃芪提取物對NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達活性的影響
        3.3.3 乳香提取物對NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達活性的影響
        3.3.4 ERK信號通路阻滯后乳香提取物對NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶和組蛋白去甲基化酶的表達活性的影響
    3.4 中藥提取物對NIH3T3細胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達的影響
        3.4.1 黃芪提取物對NIH3T3細胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達的影響
        3.4.2 ERK信號通路阻滯后黃芪提取物對NIH3T3細胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達的影響
        3.4.3 乳香提取物對NIH3T3細胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達的影響
        3.4.4 ERK信號通路阻滯后乳香提取物對NIH3T3細胞ERK蛋白與p-ERK蛋白表達的影響
4 討論
    4.1 黃芪和乳香提取物對NIH3T3細胞增殖和細胞周期的影響
    4.2 黃芪和乳香提取物對NIH3T3細胞組蛋白甲基化酶和去甲基化酶的影響
    4.3 黃芪和乳香提取物對NIH3T3細胞ERK信號通路的影響
5 結論
致謝
參考文獻
附錄
攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[2]厄貝沙坦對大鼠心肌缺血再灌注細胞凋亡與ERK1/2通路的影響[D]. 田明慧.遼寧醫(yī)學院 2012
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本文編號：3165218