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黃芪發(fā)酵多糖提取物組份鑒定及其對豬流行性腹瀉的免疫調(diào)節(jié)作用

發(fā)布時間:2021-04-25 12:58
  藥用植物黃芪在中醫(yī)臨床中應(yīng)用廣泛,其根莖是主要入藥部分,以主藥或配藥的方式出現(xiàn)在方劑中,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明黃芪具有多種成分,包括多糖、皂甙、黃酮等,這些成分具有各自的生物活性。多糖的研究成為了近些年研究者的熱點(diǎn)。多糖可以抗高血糖、抗炎、抗氧化、抗病毒,抗輻射等。然而不同來源、提取方式的異同及多糖理化性質(zhì)的不同,其生物活性也會有所差異。本研究采用地衣芽孢桿菌發(fā)酵黃芪粉提取多糖,其中在36 h多糖含量最高達(dá)到5.417 g/100 g。通過液相色譜對發(fā)酵黃芪多糖與水提黃芪多糖中單糖的組成進(jìn)行了鑒定。結(jié)果表明,兩種方式提取的單糖均由有鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖醛酸、木糖、巖藻糖。兩者之間含量存在差異。發(fā)酵提取多糖中甘露糖含量約是水提法含量的1.96倍,約為鼠李糖的2.26倍,葡萄糖醛酸的1倍、葡萄糖的1.83倍,約為半乳糖醛酸的2倍,約為阿拉伯糖的1.8倍。分子量及分子量的分布影響著多糖的活性。采用激光散射-凝膠色譜聯(lián)用的方法對水提多糖提取物和發(fā)酵多糖提取物進(jìn)行了測定。試驗(yàn)結(jié)果表明,兩種不同方法提取多糖的分子量及區(qū)間不同。分子量的分布隨著重均分子量的增大而變大... 

【文章來源】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】:50 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
符號說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 多糖的來源
        1.1.1 動物多糖
        1.1.2 植物多糖
        1.1.3 微生物多糖
    1.2 多糖的提取
        1.2.1 溶劑提取
        1.2.2 超聲波輔助提取
        1.2.3 酶提取法
        1.2.4 微波輔助萃取法
    1.3 多糖的活性
        1.3.1 多糖的抗病毒活性
        1.3.2 多糖的免疫調(diào)節(jié)
        1.3.3 多糖的抗氧化活性
        1.3.4 多糖的抗腫瘤活性
        1.3.5 多糖的其他活性
    1.4 多糖作為佐劑的使用
    1.5 多糖作為添加劑的使用
    1.6 豬流行性腹瀉的流行現(xiàn)狀
    1.7 本研究的目的與意義
2 材料方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要菌株、細(xì)胞及病毒
        2.1.2 主要試劑及試劑盒
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 培養(yǎng)基的配制
    2.2 多糖提取及粗多糖測定方法
        2.2.1 復(fù)蘇地衣芽孢桿菌
        2.2.2 發(fā)酵黃芪多糖的提取
        2.2.3 水提黃芪多糖
        2.2.4 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        2.2.5 樣品粗多糖的測定
        2.2.6 液相色譜測定單糖組成含量
    2.3 分子量及分子量分布測定
    2.4 細(xì)胞培養(yǎng)及病毒增殖
        2.4.1 細(xì)胞的培養(yǎng)、傳代及接毒
        2.4.2 提取Vero細(xì)胞中的總RNA
        2.4.3 病毒擴(kuò)增PCR鑒定
    2.5 TCID50的測定
    2.6 細(xì)胞毒性測定
    2.7 PEDV疫苗的免疫
        2.7.1 測定血清中的IFN-γ
        2.7.2 血清中IL-6的含量測定
        2.7.3 抗體sIgA含量的測定
3 結(jié)果
    3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
    3.2 發(fā)酵黃芪多糖提取含量
    3.3 標(biāo)準(zhǔn)單糖出峰時間及標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性
    3.4 液相色譜測定單糖含量
    3.5 多糖的分子量及分子量分布
    3.6 PEDV PCR鑒定
    3.7 黃芪多糖的細(xì)胞毒性
    3.8 不同濃度黃芪多糖對病毒滴度的影響
    3.9 各時間段不同黃芪多糖濃度對病毒滴度的作用
    3.10 血清中IL-6、IFN-γ的含量
    3.11 sIgA的含量
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]決明子多糖結(jié)構(gòu)和生物活性功能研究進(jìn)展[J]. 劉金金,殷軍藝,黃曉君,聶少平.  食品研究與開發(fā). 2019(23)
[2]黑螵蛸多糖的制備及活性測定[J]. 梅桂雪,孫捷,王曉靜.  食品與藥品. 2019(02)
[3]白術(shù)多糖對育成期蛋雞生長性能和血清免疫指標(biāo)的影響[J]. 荊佳林,趙國先,龔建剛,郝艷霜,馮志華.  飼料研究. 2019(02)
[4]響應(yīng)面優(yōu)化提取蠶蛹多糖及其抗腫瘤活性研究[J]. 王什,李紅玉.  中藥材. 2017(03)
[5]四君子湯總多糖對小鼠腸道菌群及免疫功能的影響[J]. 唐華羽,李玉芝,李長德,解云川.  陜西中醫(yī). 2016(12)
[6]納米山藥多糖對4種腫瘤細(xì)胞的作用[J]. 石億心,于蓮,翟美芳,蘇瑾,孫維彤,李守君,馬淑霞.  中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2016(08)
[7]Anti-tumor and immunoregulatory activities of Ganoderma lucidum and its possible mechanisms[J]. Zhi-bin LIN, Hui-na ZHANGDepartment of Pharmacology, School of Basic Medical Sciences, Peking University Health Science Center, Beijing 100083, China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2004(11)
[8]化學(xué)改性對山藥多糖抗腫瘤活性的影響[J]. 趙國華,李志孝,陳宗道.  中國食品學(xué)報(bào). 2004(01)

碩士論文
[1]香菇多糖和黃芪多糖對感染GPV雛鵝免疫及小腸炎性損傷的作用[D]. 李天琦.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019



本文編號:3159427

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