牛PLIN1基因CDS區(qū)擴增及時序表達
發(fā)布時間:2021-04-21 13:10
PLIN1( Perilipin1)基因是調(diào)控脂類代謝的"分子開關",其編碼的脂滴包被蛋白是脂滴表面含量最豐富的蛋白,在脂肪沉積中起關鍵作用。采用RT-PCR方法擴增牛PLIN1基因編碼區(qū)序列,利用組織塊法和消化法分離培養(yǎng)牛前體脂肪細胞,進一步利用qPCR技術檢測PLIN1在牛皮下前體脂肪細胞誘導分化過程中(0、2、4、6、10 d)mRNA的相對表達水平。結果表明,牛PLIN1基因CDS區(qū)長為1 551 bp,共編碼517個氨基酸;細胞時序表達結果顯示,誘導分化的第0天PLIN1不表達,隨著分化時間的推移,其表達量呈上升趨勢,與分化的第2天相比,在第6天和第10天表達量上升最快, PPARγ在分化的第0天有少量表達,表達趨勢與PLIN1一致,在第6天和第10天顯著升高。表明PLIN1在牛脂肪組織生成過程中起重要作用,在前體脂肪細胞分化階段依賴于 PPARγ的表達而表達。
【文章來源】:西北農(nóng)業(yè)學報. 2020,29(10)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 組織樣采集
1.1.2 細胞樣采集
1.1.3 主要試劑
1.2 試驗方法
1.2.1 組織總RNA的提取和cDNA的獲得
1.2.2 PLIN1基因CDS區(qū)擴增
1.2.3 PLIN1基因T載體連接及測序
1.2.4 牛皮下脂肪細胞的分離培養(yǎng)
1.2.5 牛前體脂肪細胞的誘導分化
1.2.6 細胞總RNA的提取及
1.2.7 數(shù)據(jù)分析
2 結果與分析
2.1 牛 PLIN1基因序列分析
2.2 分離培養(yǎng)牛前體脂肪細胞
2.3 誘導分化牛前體脂肪細胞
2.4 牛 PLIN1和 PPARγ細胞時序表達分析
3 討 論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]牛前體脂肪細胞的分離培養(yǎng)及誘導分化[J]. 郭紅芳,昝林森,孫永剛. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2014(02)
[2]牛肌內(nèi)脂肪的研究進展[J]. 董丹萍,馬儷珍. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2010(08)
[3]牛肉發(fā)酵香腸成熟過程中菌相變化的研究[J]. 盧士玲,李開雄,廖倩. 西北農(nóng)業(yè)學報. 2007(04)
[4]一種調(diào)控脂解的重要蛋白——圍脂滴蛋白(Perilipin)[J]. 張利紅,張立杰,楊公社. 中國生物化學與分子生物學報. 2006(12)
[5]無血清原代培養(yǎng)人前脂肪細胞并誘導分化[J]. 朱惠娟,鄧潔英,龔鳳英,史軼蘩. 基礎醫(yī)學與臨床. 2006(07)
[6]多不飽和脂肪酸的生理功能及安全性[J]. 鮑建民. 中國食物與營養(yǎng). 2006(01)
本文編號:3151817
【文章來源】:西北農(nóng)業(yè)學報. 2020,29(10)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.1.1 組織樣采集
1.1.2 細胞樣采集
1.1.3 主要試劑
1.2 試驗方法
1.2.1 組織總RNA的提取和cDNA的獲得
1.2.2 PLIN1基因CDS區(qū)擴增
1.2.3 PLIN1基因T載體連接及測序
1.2.4 牛皮下脂肪細胞的分離培養(yǎng)
1.2.5 牛前體脂肪細胞的誘導分化
1.2.6 細胞總RNA的提取及
1.2.7 數(shù)據(jù)分析
2 結果與分析
2.1 牛 PLIN1基因序列分析
2.2 分離培養(yǎng)牛前體脂肪細胞
2.3 誘導分化牛前體脂肪細胞
2.4 牛 PLIN1和 PPARγ細胞時序表達分析
3 討 論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]牛前體脂肪細胞的分離培養(yǎng)及誘導分化[J]. 郭紅芳,昝林森,孫永剛. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版). 2014(02)
[2]牛肌內(nèi)脂肪的研究進展[J]. 董丹萍,馬儷珍. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2010(08)
[3]牛肉發(fā)酵香腸成熟過程中菌相變化的研究[J]. 盧士玲,李開雄,廖倩. 西北農(nóng)業(yè)學報. 2007(04)
[4]一種調(diào)控脂解的重要蛋白——圍脂滴蛋白(Perilipin)[J]. 張利紅,張立杰,楊公社. 中國生物化學與分子生物學報. 2006(12)
[5]無血清原代培養(yǎng)人前脂肪細胞并誘導分化[J]. 朱惠娟,鄧潔英,龔鳳英,史軼蘩. 基礎醫(yī)學與臨床. 2006(07)
[6]多不飽和脂肪酸的生理功能及安全性[J]. 鮑建民. 中國食物與營養(yǎng). 2006(01)
本文編號:3151817
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