提高乳脂含量、提升奶質(zhì)已成為當前奶牛業(yè)研究的重點方向之一。前期經(jīng)GWAS方法研究發(fā)現(xiàn),EEF1D基因5′非翻譯區(qū)（5′-UTR）的G/A突變與乳脂率極顯著相關,為了進一步對候選基因EEF1D的突變位點進行功能分析,首先通過人工合成獲得了EEF1D基因突變型與野生型片段,并在細胞水平上對其開展了功能驗證實驗。研究發(fā)現(xiàn),EEF1D基因5′-UTR的G/A突變引起Sp3轉(zhuǎn)錄起始位點后移33 bp,并且突變型的活性大約是野生型的3倍。研究結(jié)果表明,該突變可改變轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄起始位點,從而使EEF1D的表達上調(diào)。 

【文章來源】：浙江農(nóng)業(yè)學報. 2020,32(07)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

酶切電泳結(jié)果

雙熒光素酶活性檢測實驗結(jié)果見圖3,根據(jù)結(jié)果顯示,pGL3-EEF1Dwt、pGL3-EEF1Dmut的雙熒光素酶活性相對于basic顯著升高(P<0.01),EEF1Dmut的活性大約是EEF1Dwt的3倍(P<0.01),說明突變位點促進目的基因的表達。結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點的預測結(jié)果,可以推測c.-488A>G突變位點是影響EEF1D基因表達的關鍵突變位點。圖3 野生型與突變型重組載體的啟動子活性分析

野生型與突變型重組載體的啟動子活性分析

【參考文獻】：
博士論文
[1]基于目標區(qū)域捕獲測序策略進行奶牛產(chǎn)奶性狀功能基因挖掘[D]. 劉軒.中國農(nóng)業(yè)大學 2014
[2]奶牛產(chǎn)奶性狀候選基因EEF1D和PDE9A功能驗證[D]. 謝巖.中國農(nóng)業(yè)大學 2013

碩士論文
[1]牛AGPAT6基因遺傳多態(tài)性研究及與脂代謝相關功能的驗證[D]. 龍小娟.吉林大學 2016



本文編號：3122620