本研究以從某鴨場(chǎng)分離的11株鴨疫里默氏菌為基礎(chǔ)，通過一系列試驗(yàn)在優(yōu)勢(shì)血清型菌株中選擇致病力強(qiáng)且免疫原性好的作為研究對(duì)象，通過對(duì)比試驗(yàn)確定一種增菌效果較好的培養(yǎng)基，再利用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)進(jìn)行鴨疫里默氏菌液體培養(yǎng)基配方的研究，探討何種培養(yǎng)基成份最適宜鴨疫里默氏菌的生長，并把優(yōu)化結(jié)果應(yīng)用到高密度發(fā)酵培養(yǎng)中，進(jìn)行發(fā)酵工藝的優(yōu)化，為下一步研制優(yōu)質(zhì)、高效的疫苗打好基礎(chǔ)。其主要研究內(nèi)容如下。1.鴨疫里默氏菌分離鑒定及制苗菌株的篩選北京某鴨場(chǎng)送檢的鴨傳染性漿膜炎疑似病例開展了鴨疫里默氏菌的分離鑒定工作，并進(jìn)一步進(jìn)行了其致病性試驗(yàn)和免疫原性分析。結(jié)果顯示，成功分離到11株細(xì)菌,并可以分為三個(gè)血清型，以Ⅰ型和Ⅱ型感染為主；攻毒試驗(yàn)表明11株分離株對(duì)14日齡櫻桃谷雛鴨致病性差異較大，從4/10到10/10不等；免疫原性試驗(yàn)結(jié)果表明分離株JX-2、JX-6和JX-10制成的疫苗攻毒保護(hù)率均可以達(dá)到80%以上。故應(yīng)考慮使用含此3種血清型的菌株制成多價(jià)苗對(duì)該養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行預(yù)防接種。2.鴨疫里默氏菌液體增菌培養(yǎng)基的篩選及優(yōu)化本研究對(duì)改良馬丁肉湯、改良酵母肉湯、 P-L肉湯和胰胨大豆胨肉湯四種培養(yǎng)基的增菌效果進(jìn)行了對(duì)... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

血清瓊脂上的菌落形態(tài)

圖 1.1 血清瓊脂上的菌落形態(tài) 圖 1.2 革蘭氏染色為陰性小桿菌ig.1.1 The colony morphology on serum agar Fig.1.2 Gram negative bacillus smal3 生理生化特性結(jié)果表明11株菌對(duì)糖的分解活性都不強(qiáng)，幾乎對(duì) 10 種糖都不發(fā)酵，個(gè)別的發(fā)種或兩種糖，這種對(duì)糖發(fā)酵的惰性可以初步診斷該 11 株分離菌為鴨疫里默氏菌株分離菌生理生化鑒定結(jié)果見表1.1。表 1.1 生理生化鑒定結(jié)果Table1. 1 The results of physiological and biochemical identification萄糖葡糖蔗 糖果 乳糖乳糖半 芽糖麥拉伯糖阿露醇 甘梨山醇水楊苷靛基質(zhì)VP試驗(yàn)素尿酶硝酸鹽化氫 硫甲基紅粉淀 膠明----+-+-+------------------+------------------------------------------------------------+------------------------------+-+++-+++++-++

圖 1.3 PCR 擴(kuò)增結(jié)果e M: DL 2000 Marker；Lane 1-3: 鴨疫 J泳結(jié)果；Lane 4-6: 鴨疫 JX-9 株電泳結(jié)果菌 16S rRNA 序列測(cè)序結(jié)果NA 序列測(cè)定，得到序列結(jié)果如下： 序列：acctctagcttctaaagcagctactacagatgcagctctttctctatatgaccaactactaagaaagtacctccgttagaagacttaatcaatagatgctttattaaagttaaagaatataccctttaatgctcctgtttttgtattctggaagacctggaacattaggacacttatcatctttatcgttattttcagctggtcctgctacatcaacacaagcatcgtctttatcattgttttctactggtcctgctacttctggacagttatcatctttatcattcaggtaaacctggtgtttctgaacataaatcgtctttatctaacaatgaagctgacgcttgccaaaagttagccaatctagacttatct


本文編號(hào)：3122570