B.pseudomallei感染RAW264.7細胞的轉(zhuǎn)錄組分析
發(fā)布時間:2021-04-05 04:08
類鼻疽是由類鼻疽桿菌(B.pseudomallei)引起的一種熱帶疾病,廣泛分布于南北緯度20°間地區(qū)。我國海南、廣東、廣西等地都是類鼻疽的疫源地。類鼻疽不僅被美國CDC列為I類生物恐怖源,也是我國入境動物檢疫疫病名錄中規(guī)定的二類動物疫病之一。目前還沒有疫苗可用,即使經(jīng)抗生素治療,類鼻疽的死亡率也高達40%。鑒于其對人類公共衛(wèi)生安全構(gòu)成的威脅,加快類鼻疽的研究具有重要的實際意義。試驗一利用革蘭氏染色和16s rRA基因特異性檢測等方法對本實驗室保存的B.pseudomallei(BPHNl)菌株進行初步鑒定;通過B.pseudomallei OD600nm 的測定與平板計數(shù)相結(jié)合,建立了B.pseudomalle 菌數(shù)與OD值間的線性回歸方程:y=4E+08x+5E+06(R2=0.9836)(0≤OD600nm≤l.2)。在不同感染復數(shù)(MOI)的條件下,感染RAW264.7細胞。通過分析B.pseudomallei對RAW264.7細胞的侵襲率和宿主細胞的形態(tài)變化特點,成功構(gòu)建B.pseudomallei感染RAW264.7細胞模型。試驗二是在B.pseudomallei感染RAW...
【文章來源】:海南大學海南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1類鼻痕感染全球分布圖(Limma化urotsakul?D?et?al.,2016)??Fig.l?Global?Distribution?of?Melioidosis??,,、??
圖2公./wei/rfomaMe!'顯微鏡下的形態(tài)斤波,20U)??Fig.2?The?microscopic?of?公.jweii如》1。"幻.??公./wew沾勵3脈/為革蘭氏陰性桿菌,長度約為2-5jxm,直徑約為0.4-0.8畔1,兩端??純圓、無芽抱,有2到4條鞭毛,可W利用鞭毛進行運動(Vietrietal.,1997)。??公成w/a庇/核質(zhì)分布不均使革蘭氏染色時呈兩極濃染。公./wew沈>wa//ez廣泛存在??pH2-9、低鹽、含鐵量離的止壤環(huán)境中,而pH5-7是其生長存活的最佳pH值,最適??宜的生長溫度是37r-42°C。并且在潮濕環(huán)境中,其生存時間與含水量呈正比巧offler??etal',2012)。??目前用于識別公.psew沁ma航/的方法主要包括生化檢測、形態(tài)分析和活性測試,??例如抗原抗體檢測、萃蘭氏染色和其他組織病理學染色等(Kang,201巧。革蘭氏染色法??具有所需樣品少、快速、簡單、準確率高等優(yōu)點。因此,它是細菌學中使用頻率最高??的鑒定染色法。從臨床標本中分離出公fsewfowa航/仍然是診斷類鼻痘的"金標準"。??PCR檢測技術(shù)被廣泛用于及濁w/aWe/初步鑒定(Kang?,2010)。針對公.所成)庇/??的16?S?rRNA基因、訴C基因和皿型分泌基因的PCR檢測,不僅可W檢測公.wa//ez和??反護'61/妓W70脈/,還可W用于區(qū)別其他相關(guān)菌種或菌屬(Kang?,2010)。近年來,類鼻誼??
海南大學碩±學位論文、tr?油、?、??I???/?少?*?、??令'又,、、V巧??、苗?,A???#,I*?*??-/,'?-^一/?'爹??:V?皆^‘^?!??、二如-'、乂?4'^??/心>^、一?'?、*??>?以?>?人了/’?’?W??圖1及斬6?加/?0航1’革蘭巧染色??Fig.l?B.pseudomallei?Gram-stain??Ml?2?34?56?M?789?10?11?12?M?13?14?M?15?16??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]類鼻疽桿菌基因組學概述及進展[J]. 方瑤,顧江,李倩,于波,王海光,毛旭虎. 中國人獸共患病學報. 2012(10)
碩士論文
[1]穩(wěn)定表達SHEV ORF3的HepG2細胞的轉(zhuǎn)錄組研究[D]. 徐開蓮.海南大學 2016
[2]國境口岸進口動物及動物產(chǎn)品傳入人畜共患病風險分析體系的研究[D]. 任彤.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2015
[3]類鼻疽桿菌鞭毛蛋白FliC與腸出血性大腸桿菌蛋白EspA的融合表達及其免疫學性質(zhì)研究[D]. 于波.第三軍醫(yī)大學 2013
本文編號:3119107
【文章來源】:海南大學海南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1類鼻痕感染全球分布圖(Limma化urotsakul?D?et?al.,2016)??Fig.l?Global?Distribution?of?Melioidosis??,,、??
圖2公./wei/rfomaMe!'顯微鏡下的形態(tài)斤波,20U)??Fig.2?The?microscopic?of?公.jweii如》1。"幻.??公./wew沾勵3脈/為革蘭氏陰性桿菌,長度約為2-5jxm,直徑約為0.4-0.8畔1,兩端??純圓、無芽抱,有2到4條鞭毛,可W利用鞭毛進行運動(Vietrietal.,1997)。??公成w/a庇/核質(zhì)分布不均使革蘭氏染色時呈兩極濃染。公./wew沈>wa//ez廣泛存在??pH2-9、低鹽、含鐵量離的止壤環(huán)境中,而pH5-7是其生長存活的最佳pH值,最適??宜的生長溫度是37r-42°C。并且在潮濕環(huán)境中,其生存時間與含水量呈正比巧offler??etal',2012)。??目前用于識別公.psew沁ma航/的方法主要包括生化檢測、形態(tài)分析和活性測試,??例如抗原抗體檢測、萃蘭氏染色和其他組織病理學染色等(Kang,201巧。革蘭氏染色法??具有所需樣品少、快速、簡單、準確率高等優(yōu)點。因此,它是細菌學中使用頻率最高??的鑒定染色法。從臨床標本中分離出公fsewfowa航/仍然是診斷類鼻痘的"金標準"。??PCR檢測技術(shù)被廣泛用于及濁w/aWe/初步鑒定(Kang?,2010)。針對公.所成)庇/??的16?S?rRNA基因、訴C基因和皿型分泌基因的PCR檢測,不僅可W檢測公.wa//ez和??反護'61/妓W70脈/,還可W用于區(qū)別其他相關(guān)菌種或菌屬(Kang?,2010)。近年來,類鼻誼??
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【參考文獻】:
期刊論文
[1]類鼻疽桿菌基因組學概述及進展[J]. 方瑤,顧江,李倩,于波,王海光,毛旭虎. 中國人獸共患病學報. 2012(10)
碩士論文
[1]穩(wěn)定表達SHEV ORF3的HepG2細胞的轉(zhuǎn)錄組研究[D]. 徐開蓮.海南大學 2016
[2]國境口岸進口動物及動物產(chǎn)品傳入人畜共患病風險分析體系的研究[D]. 任彤.中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院 2015
[3]類鼻疽桿菌鞭毛蛋白FliC與腸出血性大腸桿菌蛋白EspA的融合表達及其免疫學性質(zhì)研究[D]. 于波.第三軍醫(yī)大學 2013
本文編號:3119107
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