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沙門氏菌VBNC狀態(tài)突變體的培養(yǎng)與差異基因的篩選

發(fā)布時間:2021-04-04 19:05
  沙門氏菌對動物、對人均有致病性。沙門氏菌病臨診癥狀為敗血癥和腸胃炎等,一般伴有潛伏期,本病一年四季均可發(fā)生。對于人類及動物來說,是一種嚴(yán)重的疾病,重者也可導(dǎo)致人及動物的死亡。VBNC(viable but non-culturable):活的非可培養(yǎng)狀態(tài),即當(dāng)細(xì)菌處于不良條件下,細(xì)胞會發(fā)生萎縮變性,有的會呈現(xiàn)球形,用普通方法培養(yǎng)細(xì)菌不能生長,但用特殊的方法仍可證明其具有活性。雖然目前細(xì)菌的VBNC狀態(tài)發(fā)生機制尚不明確,但是這種狀態(tài)可能代表著細(xì)菌在面對環(huán)境壓力條件下所產(chǎn)生的一種求生反應(yīng)。本研究采用不同濃度的NTG化學(xué)誘變方法,對鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行誘導(dǎo)突變,再在VBNC條件下篩選出一株在平板培養(yǎng)基上仍然具有生長繁殖能力并且具有抗低溫和寡營養(yǎng)狀態(tài)的VBNC沙門氏菌突變菌株,用突變體進(jìn)行研究VBNC狀態(tài)的發(fā)生機制。本研究應(yīng)用SSH技術(shù),構(gòu)建了沙門氏菌-VBNC沙門氏菌突變體的SSH文庫,并獲得差異基因片段,經(jīng)T載體連接、克隆到大腸桿菌感受態(tài)中,再通過PCR篩選驗證和地高辛雜交篩選,獲得了攜帶差異片段的大腸桿菌菌株。經(jīng)過測序最終獲得了59株攜帶差異片段的大腸桿菌菌株。經(jīng)生物信息學(xué)軟件分析后結(jié)果顯... 

【文章來源】:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】:53 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    1.1 沙門氏菌的主要病害
    1.2 細(xì)菌突變體的研究進(jìn)展
    1.3 活的非可培養(yǎng)狀態(tài)
    1.4 差異基因篩選技術(shù)
    1.5 生物信息學(xué)
    1.6 本研究的目的意義
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 沙門氏菌VBNC突變體的培養(yǎng)
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 試驗結(jié)果
        1.4 討論
        1.5 小結(jié)
    第二章 沙門氏菌和VBNC沙門氏菌突變體差異基因文庫的建立及其序列分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 試驗結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]氮離子束注入誘變選育胞外多糖高產(chǎn)菌株[J]. 萬紅貴,王文娟,繆玲玲,張波,汪文進(jìn).  輻射研究與輻射工藝學(xué)報. 2012(03)
[2]一株產(chǎn)纖維素酶細(xì)菌紫外線誘變研究[J]. 鄭哲,賈翠英,張玉輝.  生物學(xué)雜志. 2011(03)
[3]亞硝基胍誘變選育L-蘇氨酸高產(chǎn)菌的研究[J]. 王揚,張力,李偉星,張君勝,楊曉志,張鐸.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(04)
[4]雞大腸桿菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)發(fā)生相關(guān)基因克隆與分析[J]. 李影,段銳,王偉利,孫曉媛,錢愛東.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2010(03)
[5]微波-亞硝基胍復(fù)合誘變篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株[J]. 侯紅萍,杜文娟.  中國釀造. 2009(08)
[6]通過紫外線誘變篩選溶磷細(xì)菌突變體[J]. 蔣本慶,臧威,孫劍秋,王鵬,王登宇,李鐵,熊洪亮.  高師理科學(xué)刊. 2008(06)
[7]乳酸桿菌活的非可培養(yǎng)狀態(tài)誘導(dǎo)條件的篩選與熒光觀察[J]. 李影,魏忠彬,錢愛東,段銳.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(10)
[8]選育高效產(chǎn)氫細(xì)菌的誘變劑選擇[J]. 鄭國香,任南琪,李永峰,林海龍,李建政.  哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2008(08)
[9]超聲波聯(lián)合硫酸二乙酯對海洋真菌TS67的復(fù)合誘變育種研究[J]. 王淑媛,王素英,涂敏勤,馬永金.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(06)
[10]產(chǎn)類細(xì)菌素乳酸乳球菌V528的紫外線誘變育種研究[J]. 陳麗園,姜潔,陳曉琳,張明.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2007(05)

博士論文
[1]大腸桿菌、乳酸桿菌“活的非可培養(yǎng)狀態(tài)”研究[D]. 李影.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[2]應(yīng)用激光捕獲顯微切割技術(shù)進(jìn)行人和大鼠不同階段生精細(xì)胞差異表達(dá)基因的研究[D]. 梁剛.中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2003

碩士論文
[1]嗜酸乳桿菌細(xì)菌素高產(chǎn)菌株的誘變選育及其發(fā)酵工藝的初步研究[D]. 莊國宏.揚州大學(xué) 2007
[2]氮離子束注入硅酸鹽細(xì)菌誘變選育研究[D]. 盧文軒.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號:3118314

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