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水牛體細(xì)胞繼代克隆及卵胞質(zhì)對(duì)供體細(xì)胞核重編程作用的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2021-03-18 01:11
  體細(xì)胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)技術(shù)在科研、動(dòng)物育種、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)、醫(yī)療等領(lǐng)域具有巨大的作用,但其極低的效率嚴(yán)重限制了這一技術(shù)的應(yīng)用。體細(xì)胞繼代克。⊿erial SCNT,SSCNT)技術(shù)可以通過(guò)重復(fù)利用受體胞質(zhì)對(duì)供體細(xì)胞進(jìn)行重編程,理論上將有望提高體細(xì)胞的重編程效率和克隆胚胎的發(fā)育率。因此,本研究對(duì)水牛SSCNT及其分子機(jī)制進(jìn)行了初步的研究,具體結(jié)果如下:1.探討了水牛SSCNT胚胎的體外發(fā)育情況及其表觀遺傳修飾狀態(tài)。使用普通水牛耳部成纖維細(xì)胞BFF,由該BFF細(xì)胞系制備的轉(zhuǎn)催乳素PRL的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞BFF-PRL以及使用BFF-PRL作為供體細(xì)胞進(jìn)行核移植獲得的克隆水牛耳部成纖維細(xì)胞(編號(hào)為8811)進(jìn)行體細(xì)胞核移植,發(fā)現(xiàn)使用8811細(xì)胞作為供體所得的繼代克隆胚胎(SSCNT胚胎)囊胚發(fā)育率顯著高于BFF和BFF-PRL組,且SSCNT囊胚中5mC和組蛋白H3K9me3的水平出現(xiàn)顯著下調(diào)(P<0.05)。另外,SSCNT囊胚中Dnmtl,HDAC1,HDA4C2的表達(dá)水平出現(xiàn)了顯著的下調(diào),多能基因Oct4,Sox2和Nan... 

【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:134 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

水牛體細(xì)胞繼代克隆及卵胞質(zhì)對(duì)供體細(xì)胞核重編程作用的初步研究


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重構(gòu)胚,囊胚,組蛋白乙;,繼代


Fig.?2-1?Expression?pattern?of?5mC?in?blastocysts?derived?from?three?types?of?do5?nip??1.5??B?BFF??a?a?■?BFF+PRL??|?i.〇?—?8811??i?〇5H?1?i??BFF?BFF+PRL?8811??圖2-2?5mC在三種重構(gòu)胚囊胚中的熒光強(qiáng)度??注:肩標(biāo)字母不同表不差異顯者(戶(hù)<0.05)。??ig.?2-2?Fluorescence?intensity?of?3mC?in?blastocysts?derived?from?three?types?of?Note:?Different?letters?represent?significant?difference?(P?<?0.05).??牛體細(xì)胞繼代克隆囊胚組蛋白乙酰化水平的檢測(cè)??了探宄水牛體細(xì)胞繼代囊胚的組蛋白乙;,本試驗(yàn)利用

重構(gòu)胚,組蛋白,囊胚,繼代


廣西大學(xué)博士學(xué)位論文水牛體細(xì)胞繼代克隆及卵胞質(zhì)對(duì)供體細(xì)胞核重編程作用的初步研究??AFLke對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行了分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2-5和圖2-6所示,三種重構(gòu)胚囊??胚之間的組蛋白H3K9me2水平變化并不顯著(戶(hù)>0.05),而組蛋白H3K9me3的??水平在繼代克隆囊胚中則出現(xiàn)顯著下降(P<?0.05)。??Bright?field?IL3K9me''?pj?Bnght?Held?H3K9me3?PI??


本文編號(hào):3087953

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