尾型同源框轉錄因子Cdx2在調控小鼠早期胚胎滋養(yǎng)外胚層（Trophectoderm, TE）的發(fā)育過程中起關鍵作用,干擾cdx2基因的小鼠胚胎能形成早期囊胚但不能維持囊胚腔,胚胎不能著床。但cdx2在牛早期胚胎發(fā)育及滋養(yǎng)層與內細胞團（Inner cell mass, ICM）細胞分化過程中的相關分子機制還不清楚。本試驗研究了cdx2基因在牛體外受精胚胎發(fā)育過程中的動態(tài)表達變化,并利用干擾cdx2基因的體細胞獲得克隆胚胎,探討了cdx2在克隆胚胎發(fā)育及第一次細胞分化過程中的作用。試驗結果如下：1)通過過表達cdx2的慢病毒顆粒獲得了穩(wěn)定表達外源cdx2的牛胎兒成纖維細胞系,轉基因細胞中cdx2mRNA表達水平是對照組的24.42倍；2)分別選取cdx2基因CDS序列的上、中、下游三個不同區(qū)域構建成干擾載體pLL3.7-shRNA488、pLL3.7-shRNA621、pLL3.7-shRNA672及pLL3.7-shRNA-Control,過表達cdx2的細胞經不同敲減載體病毒顆粒感染后,相對于對照組其cdx2的表達水平分別為0.387、0.183、0.123和0.773,因此選用pLL... 

【文章來源】：內蒙古大學內蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數】：57 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
縮略詞表
一、試驗研究
    摘要
    引言
    1 材料與方法
    2 實驗結果
        2.1 cdx2過表達和敲減載體的構建
        2.2 病毒顆粒的生產
        2.3 過表達cdx2基因的魯西黃牛胎兒成纖維細胞系的建立與鑒定
        2.4 cdx2基因干擾細胞的獲得及干擾效率分析
        2.5 牛早期胚胎發(fā)育過程不同時期cdx2、tead4、oct4表達的動態(tài)變化
        2.6 敲減cdx2的表達對�？寺∨咛ピ缙诎l(fā)育及相關基因表達的影響
    3 討論
    4 小結
    參考文獻
二、文獻綜述
    1 哺乳動物早期胚胎的發(fā)育
    2 關鍵轉錄因子在TE和ICM形成中的作用
    3 關鍵調節(jié)因子的轉錄調控
    4 牛TE的形成
    參考文獻
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號：3087986