小反芻獸疫（PPR）又稱山羊瘟、口腔炎-肺炎綜合征等,是家養(yǎng)和野生小反芻動物的重要傳染性病毒疾病,其病原是副粘病毒科,麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒（PPRV）。目前,該病依然呈現(xiàn)不斷蔓延之勢,造成了巨大的經(jīng)濟損失。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)淋巴細胞激活分子（SLAM）是PPRV感染宿主的主要天然受體,PPRV通過其血凝素蛋白（H）與宿主SLAM受體結(jié)合,使病毒附著并侵入宿主細胞,將SLAM蛋白導(dǎo)入細胞中穩(wěn)定表達可以提高細胞對PPRV的敏感性。有研究表明,SLAM受體N端V結(jié)構(gòu)域通過與H蛋白結(jié)合啟動麻疹病毒的入侵感染,PPRV與麻疹病毒同屬于麻疹病毒科。本研究利用慢病毒表達系統(tǒng)建立穩(wěn)定表達山羊SLAM/V的Vero細胞系,提高細胞對PPRV的敏感性用于PPRV田間毒的分離。本文研究工作如下:1.采用山羊外周血淋巴細胞的總RNA以RT-PCR方法獲得SLAM/V基因,將其插入原核表達載體pGEX-6P-1,并成功表達出包含SLAM/V蛋白與GST標(biāo)簽的融合蛋白,其分子質(zhì)量約為39 kDa,主要以包涵體形式存在。Western-blot試驗證實,純化后的融合蛋白與山羊抗人SLAM多克隆抗體具有良好的反應(yīng)活性。2... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

015年世界PPR流行分布圖

SLAMF在細胞表面的結(jié)構(gòu)

重組質(zhì)粒pMD18-T/SLAM/V的PCR鑒定Fig.1IdentificationofpMD18-T/SLAM/VbyPCR

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]一株小反芻獸疫病毒的分離鑒定與生長曲線測定[J]. 張永強,吳曉東,鄒艷麗,包靜月,王筱真,王志亮.  中國動物檢疫. 2015(10)
[3]穩(wěn)定表達山羊SLAM受體的BHK-21細胞系的建立及應(yīng)用[J]. 張家林,李翠翠,謝梅梅,王子龍,陳偉業(yè),步志高.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報. 2015(07)
[4]慢病毒載體及其研究進展[J]. 孟凡榮,陳琛,萬海粟,周清華.  中國肺癌雜志. 2014(12)
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[9]狐、貉和水貂犬瘟熱病毒受體SLAM的基因克隆及其真核表達[J]. 趙建軍,張海玲,高晗,趙春霏,柴秀麗,陳濤,閆喜軍,吳威.  獸類學(xué)報. 2010(01)
[10]小反芻獸疫病毒F基因真核載體的構(gòu)建與表達[J]. 朱學(xué)亮,張強,楊帆,竇永喜,駱學(xué)農(nóng),岳城,才學(xué)鵬.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2009(05)

博士論文
[1]麻疹病毒通過受體SLAM對昆蟲細胞的感染及其誘發(fā)細胞凋亡的機制研究[D]. 劉鑫.武漢大學(xué) 2005

碩士論文
[1]小反芻獸疫病毒囊膜糖蛋白和受體的相互作用研究[D]. 鄧瑞雪.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]一起小反芻獸疫的診斷及病原分離鑒定[D]. 王春霞.吉林大學(xué) 2015



本文編號：3085027